細(xi)胞計數(shu)是(shi)確定(ding)培(pei)養(yang)中(zhong)鋪(pu)板(ban)的細(xi)胞濃度(du)、確定(ding)細(xi)胞活力(li)和評估(gu)細(xi)胞分離程序(xu)結(jie)果(guo)的壹(yi)個(ge)組成部分(fen)。建(jian)議在(zai)細(xi)胞分離之前(qian)進行(xing)初始(shi)細(xi)胞計數(shu)；然(ran)後(hou)可(ke)以(yi)將該數(shu)字與細(xi)胞分離後的(de)細(xi)胞計數(shu)進(jin)行(xing)比(bi)較(jiao)，以(yi)計算細(xi)胞恢(hui)復率。此(ci)外，當預期細(xi)胞活力(li)可能(neng)會降低(di)時，應進(jin)行(xing)活細(xi)胞計數(shu)，例如(ru)，在(zai)處(chu)理(li)冷(leng)凍保存(cun)的細(xi)胞或(huo)離(li)體操(cao)作的(de)細(xi)胞時。可以(yi)使(shi)用臺(tai)盼(pan)藍或(huo)3%乙(yi)酸(suan)和亞(ya)甲(jia)藍進行(xing)細(xi)胞計數(shu).進(jin)行(xing)總有(you)核細(xi)胞計數(shu)時(shi)，建(jian)議使(shi)用3%乙(yi)酸(suan)和亞(ya)-CH3藍。乙(yi)酸(suan)溶(rong)解(jie)細(xi)胞膜，亞(ya)甲(jia)藍染(ran)色暴露(lu)的細(xi)胞核。由(you)於成熟的(de)紅(hong)細(xi)胞缺乏細(xi)胞核，因(yin)此(ci)在(zai)計數(shu)時(shi)被(bei)排(pai)除(chu)在(zai)外(wai)。或(huo)...

胎(tai)牛血(xue)清(qing)是(shi)細(xi)胞培養(yang)常(chang)用的(de)生(sheng)物試劑，那(na)麽用不(bu)完(wan)的(de)胎(tai)牛血(xue)清(qing)FBS該如(ru)何(he)儲存(cun)呢？胎(tai)牛血(xue)清(qing)FBS壹(yi)般(ban)需要(yao)冷(leng)凍保存(cun)，在(zai)-5到(dao)-20°C之間(jian)，並且可(ke)以(yi)在(zai)2到(dao)8°C的(de)溫(wen)度(du)下(xia)解(jie)凍。將血清(qing)等(deng)分(fen)並冷凍在(zai)較(jiao)小(xiao)的(de)部(bu)分（通常(chang)為50ml試管）中通常(chang)很有(you)用，以(yi)避(bi)免多次(ci)冷(leng)凍和解(jie)凍循(xun)環(huan)。有(you)時(shi)，壹(yi)些FBS等(deng)分(fen)試樣(yang)在(zai)冷(leng)凍溫(wen)度(du)下(xia)仍(reng)保(bao)留(liu)在(zai)液體中(zhong)。這(zhe)是(shi)由(you)於缺乏用於(yu)開(kai)始(shi)結(jie)晶(jing)（冷(leng)凍）的成核中(zhong)心(xin)（顆(ke)粒(li)物質）。如(ru)果(guo)您只是(shi)用手(shou)指(zhi)輕彈管子(zi)，它們(men)通(tong)常(chang)幾(ji)乎會立(li)即(ji)凝(ning)固。解(jie)凍後有(you)壹(yi)些沈(chen)澱是(shi)很(hen)常(chang)見的(de)。沈(chen)澱物(wu)，可(ke)能(neng)是(shi)由(you)於某(mou)些血(xue)清蛋白的變性(xing)，可(ke)...

胎(tai)牛血(xue)清(qing)(FBS)是(shi)來(lai)自(zi)胎(tai)牛的(de)凝(ning)結血(xue)液的液體部(bu)分，不(bu)含(han)細(xi)胞、纖(xian)維(wei)蛋白和凝血(xue)因子(zi)，但含(han)有(you)大(da)量對細(xi)胞生(sheng)長(chang)至(zhi)關重(zhong)要(yao)的營養(yang)和大(da)分(fen)子(zi)因子(zi)。牛血清(qing)白(bai)蛋白是(shi)FBS的(de)主要成分。FBS中(zhong)的生(sheng)長(chang)因(yin)子(zi)對於培養(yang)細(xi)胞的維(wei)持和生(sheng)長(chang)至(zhi)關重(zhong)要(yao)。FBS還(hai)含(han)有(you)多(duo)種(zhong)小(xiao)分子(zi)，如氨基(ji)酸(suan)、糖、脂質和激素(su)。FBS應用廣泛。FBS的主要用途(tu)之壹(yi)是(shi)在(zai)真核細(xi)胞培養(yang)中(zhong)，其濃度(du)高(gao)達20%甚至更(geng)高(gao)，它提供許(xu)多促進(jin)細(xi)胞存(cun)活和增殖(zhi)的必(bi)需營養(yang)素(su)和生(sheng)長(chang)因(yin)子(zi)。然而(er)，需要(yao)註(zhu)意的(de)是(shi)，人類細(xi)胞培養(yang)物(wu)中(zhong)的(de)FBS可(ke)能(neng)會引(yin)入(ru)研(yan)究(jiu)成果(guo)。用人類血(xue)清培(pei)養(yang)的(de)人類...

電(dian)泳(yong)是(shi)分(fen)離(li)蛋白質和其他(ta)物(wu)質(zhi)如(ru)核酸(suan)、嘌呤、嘧(mi)啶、壹(yi)些有(you)機(ji)化(hua)合物甚至無機離子(zi)的主要技(ji)術(shu)。目前(qian)的大(da)部(bu)分電(dian)泳(yong)是(shi)將樣(yang)品分(fen)離(li)到(dao)固(gu)定介(jie)質(zhi)中的流(liu)動(dong)相(xiang)中(zhong)。聚丙(bing)烯酰(xian)胺(an)凝(ning)膠(jiao)是(shi)主要介(jie)質(zhi)之壹(yi)。它是(shi)壹(yi)種(zhong)多(duo)孔凝膠(jiao)，其孔徑接近(jin)蛋白質分子(zi)的大(da)小(xiao)，提高了(le)蛋白質的分(fen)辨(bian)率。此(ci)外，聚(ju)丙(bing)烯酰(xian)胺(an)凝(ning)膠(jiao)化(hua)學穩定(ding)性(xing)好，重復性強(qiang)，對pH和溫(wen)度(du)變(bian)化穩定(ding)，顏色(se)觀察(cha)容易(yi)。SDS聚丙(bing)烯酰(xian)胺(an)凝(ning)膠(jiao)電(dian)泳(yong)（SDS-PAGE）在(zai)蛋白質分子(zi)量測(ce)定(ding)、特(te)異性(xing)蛋白質檢測(ce)、菌(jun)種(zhong)鑒(jian)定等(deng)方面具有(you)操(cao)作簡(jian)單(dan)、重現(xian)性好等(deng)特(te)點(dian)，因(yin)此(ci)廣為使(shi)用。電(dian)泳(yong)SDS-PAGE的工(gong)作...

本(ben)文摘(zhai)要蛋白質印跡(ji)技(ji)術(shu)（免疫印(yin)跡(ji)實驗(yan)）又(you)稱(cheng)為WesternBlot。它是(shi)分(fen)子(zi)生(sheng)物學、生(sheng)物化(hua)學和免疫遺(yi)傳(chuan)學中常(chang)用的(de)壹(yi)種(zhong)實驗(yan)方法(fa)。WesternBlot主要用於(yu)檢(jian)測(ce)或(huo)分(fen)析蛋白，應用領(ling)域集中在(zai)基(ji)因表達研究、抗(kang)體活性檢測(ce)和疾(ji)病(bing)診(zhen)斷(duan)等(deng)。01蛋白質印跡(ji)基(ji)本(ben)流(liu)程(cheng)圖02westernblot步(bu)驟(zhou)樣(yang)品準(zhun)備：Tanon連續(xu)梯度(du)預制膠(jiao)（4-20%10孔/15孔/17孔）；（4-12%10孔/15孔/17孔）TanonMops/MES電泳(yong)緩(huan)沖(chong)液（粉劑）Tanon預染(ran)蛋白MarkerTanon4×LD...