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          胎牛(niu)血清選購(gou)的冷(leng)知(zhi)識

          更(geng)新時(shi)間:2022-04-12點(dian)擊次數:1489

             胎(tai)牛(niu)血清 (FBS) 是來自(zi)胎牛(niu)的凝結血(xue)液(ye)的液體(ti)部(bu)分,不(bu)含(han)細(xi)胞、纖維蛋(dan)白(bai)和凝(ning)血因子(zi),但含(han)有大(da)量對細(xi)胞生長(chang)至(zhi)關(guan)重(zhong)要的營(ying)養和大(da)分子(zi)因子(zi)。牛(niu)血(xue)清白(bai)蛋(dan)白(bai)是FBS 的主(zhu)要成(cheng)分。FBS 中(zhong)的(de)生長(chang)因子(zi)對於培(pei)養細(xi)胞的維持(chi)和生長(chang)至(zhi)關(guan)重(zhong)要。FBS 還(hai)含(han)有多(duo)種小(xiao)分子(zi),如(ru)氨(an)基(ji)酸、糖、脂(zhi)質和激(ji)素。

                FBS 應(ying)用廣(guang)泛(fan)。FBS 的主(zhu)要用途之(zhi)壹(yi)是在真核(he)細(xi)胞培(pei)養中(zhong),其(qi)濃度(du)高(gao)達 20% 甚(shen)至(zhi)更(geng)高(gao),它提(ti)供許(xu)多促進(jin)細(xi)胞存活(huo)和增(zeng)殖(zhi)的(de)必需營(ying)養素和生長(chang)因子(zi)。然(ran)而(er),需(xu)要註意的(de)是,人(ren)類細(xi)胞培(pei)養物(wu)中(zhong)的(de) FBS  可(ke)能(neng)會引(yin)入研究(jiu)成(cheng)果(guo)。用人(ren)類血(xue)清培(pei)養的人(ren)類細(xi)胞與用 FBS 培(pei)養的細(xi)胞表(biao)現不(bu)同。FBS 還(hai)用於人(ren)類和獸(shou)用疫苗以及生物(wu)技術(shu)藥物(wu)的研究(jiu)、制造(zao)和控(kong)制,並用於阻止(zhi)胰蛋(dan)白(bai)酶(mei)消化(hua) 或用作冷(leng)凍保存中(zhong)的(de)保(bao)護劑(ji)。

          胎(tai)牛(niu)血(xue)清

          為(wei)什(shen)麽(me)使用胎兒(er)血(xue)清而不(bu)是新生兒(er)血(xue)清或成(cheng)人(ren)血清?

                胎兒(er)血(xue)清含有較(jiao)多的(de)生長(chang)因子(zi),丙種球(qiu)蛋(dan)白(bai)(即抗體)含量較(jiao)低,非(fei)胎(tai)兒(er)血(xue)清也(ye)有。這(zhe)些很重(zhong)要,因為(wei)生長(chang)因子(zi)促(cu)進(jin)細(xi)胞存活(huo)和增(zeng)殖(zhi),而(er)抗體可以與培(pei)養的細(xi)胞結合(he)。此外(wai),與成(cheng)人(ren)或新(xin)生兒(er)相(xiang)比(bi),胎兒(er)血(xue)清中(zhong)的(de)補體蛋(dan)白(bai)(補體)含(han)量(liang)較低。這(zhe)些(xie)補體具有溶解培(pei)養細(xi)胞和幹(gan)擾(rao)免疫測(ce)定的不(bu)良(liang)作(zuo)用。

          血清和血(xue)漿(jiang)有什(shen)麽(me)區(qu)別(bie)?

                 血(xue)清和血(xue)漿(jiang)均(jun)來(lai)自(zi)全血(xue),通過(guo)離心(xin)去除包(bao)括紅(hong)細(xi)胞在內的成(cheng)分。血漿(jiang)和血(xue)清之間的(de)區別(bie)在於,凝血蛋(dan)白(bai)存在於血漿(jiang)中(zhong),但已從(cong)血清中(zhong)去除。血漿(jiang)壹(yi)般是通過(guo)在離心(xin)前向血(xue)液中(zhong)加(jia)入抗凝劑(ji)來(lai)制備的,但不(bu)會去除凝血蛋(dan)白(bai)。通過(guo)在離心(xin)前使血液凝固或通(tong)過廣(guang)泛(fan)/漸進離心(xin)來制備血清。因此,與凝(ning)血相(xiang)關(guan)的(de)纖維蛋(dan)白(bai)原(yuan)和蛋(dan)白(bai)質不(bu)存(cun)在於血清中(zhong)。

                 在人(ren)類中(zhong),以(yi)下 22 種蛋(dan)白(bai)質占(zhan)血(xue)清和血(xue)漿(jiang)總蛋(dan)白(bai)質含量的(de) 99%:白(bai)蛋(dan)白(bai)、總 IgG、轉鐵蛋(dan)白(bai)、纖維蛋(dan)白(bai)原(yuan)、總(zong) IgA 、α-2-巨(ju)球(qiu)蛋(dan)白(bai)、總 IgM、α-1-抗胰蛋(dan)白(bai)酶(mei)、C3 補體、結合(he)球(qiu)蛋(dan)白(bai)、α-1-酸性糖蛋(dan)白(bai)、載脂蛋(dan)白(bai)-B 、載脂蛋(dan)白(bai)-A1、脂蛋(dan)白(bai) (a)、因子(zi) H、銅藍(lan)蛋(dan)白(bai)、C4 補體、補體因子(zi) B 、前(qian)白(bai)蛋(dan)白(bai)、C9  補體、C1q 補體和 C8 補體。剩下的 1% 包(bao)括數百種蛋(dan)白(bai)質。血清蛋(dan)白(bai)白(bai)蛋(dan)白(bai),濃度(du)為(wei) 50 mg/ml ,約占(zhan)總(zong)蛋(dan)白(bai)質量的壹(yi)半。

          胎牛(niu)血清的檢(jian)驗標準是什(shen)麽(me)?

                 國(guo)際(ji)血(xue)清工業(ye)協會 ISIA是血清供應(ying)貿(mao)易(yi)組織(zhi),制定(ding)了(le)質量控制標(biao)準化(hua)指(zhi)南。這些指(zhi)南要求(qiu)使用特定(ding)方(fang)法進行(xing)以下測(ce)試(shi),並且測(ce)試(shi)結果(guo)必須作(zuo)為(wei)分析證(zheng)書(shu)提(ti)供。

          測(ce)試(shi)

          細(xi)菌和真(zhen)菌 - 無菌測(ce)試(shi)

          支(zhi)原(yuan)體(ti)

          細(xi)胞病(bing)變(bian)劑(ji) - 病(bing)毒檢(jian)測(ce)

          血(xue)液吸附(fu)劑(ji) - 病(bing)毒檢(jian)測(ce)

          牛(niu)病(bing)毒性腹(fu)瀉(xie) - 病(bing)毒檢(jian)測(ce)

          pH 測(ce)量

          滲透壓

          總(zong)蛋(dan)白(bai), 雙縮(suo)脲(niao)法測(ce)定

          內毒素

          血(xue)紅(hong)蛋(dan)白(bai)

          電(dian)泳(yong)圖

          性能(neng)測(ce)試(shi),例(li)如(ru)幹(gan)細(xi)胞培(pei)養

          徑(jing)向免(mian)疫擴(kuo)散

          免(mian)疫(yi)球(qiu)蛋(dan)白(bai)

          γ-谷(gu)氨酰(xian)轉移酶(mei) (GGT)

          內毒素檢(jian)測(ce)

          內毒素,也(ye)稱(cheng)為(wei)脂(zhi)多(duo)糖(tang)(LPS)或(huo)脂寡糖(LOS),來(lai)自革蘭(lan)氏(shi)陰(yin)性菌的外(wai)膜,有助(zhu)於多(duo)種致病(bing)性革蘭(lan)氏(shi)陰(yin)性菌的臨(lin)床表(biao)現。在體內 ,內毒素會引(yin)起(qi)發燒(shao)和炎(yan)癥反應(ying),而(er)在細(xi)胞培(pei)養中(zhong)它(ta)們(men)會引(yin)起(qi)細(xi)胞反應(ying)的(de)變化(hua)。

          內毒素水平通過(guo)鱟變(bian)形(xing)細(xi)胞裂(lie)解物(wu) (LAL) 測(ce)試(shi)或較(jiao)新的合(he)成(cheng)測(ce)試(shi)(稱為(wei)重(zhong)組因子(zi)測(ce)定)進行(xing)測(ce)量。變形(xing)細(xi)胞類似於(yu)脊(ji)椎動物(wu)中(zhong)的(de)白(bai)細(xi)胞,LAL 是由鱟(hou) (美洲(zhou)鱟;圖(tu) 1)的(de)血(xue)液制備的。LAL 對內毒素非常(chang)敏(min)感(gan),即使存在微量的(de)內毒素也(ye)會凝(ning)結。許(xu)多(duo)鱟種群(qun)處於(yu)危(wei)險之(zhi)中(zhong),因此應(ying)註(zhu)意保(bao)護它們(men)免(mian)受 消 失。

          鱟

          圖 1.美洲(zhou)鱟

          不(bu)含(han)外(wai)泌體或其(qi)他成(cheng)分的 FBS

          常(chang)規(gui) FBS 含(han)有大(da)量細(xi)胞外囊(nang)泡(pao),其(qi)中(zhong)壹(yi)些是外泌(mi)體。使用培(pei)養細(xi)胞進行(xing)外泌(mi)體研究(jiu)時(shi),使用不(bu)含(han)外(wai)泌體的 FBS 至(zhi)關(guan)重(zhong)要。然而(er),重(zhong)要的是要意識到,去除外泌體(ti)的(de) FBS  可(ke)能(neng)會以(yi)不(bu)同於(yu)常(chang)規(gui) FBS 的(de)方(fang)式(shi)影(ying)響和支(zhi)持(chi)細(xi)胞生長(chang)。去除外泌體(ti)的(de) FBS 可(ke)以可(ke)以通(tong)過超(chao)速離心(xin)或超(chao)濾制備.

          蘇(su)州(zhou)阿爾(er)法生物(wu)13年專(zhuan)註(zhu)於(yu)生物(wu)實驗室儀器(qi)及生物(wu)試(shi)劑(ji)耗材的(de)供(gong)應(ying),阿(e)爾法試(shi)劑(ji)主(zhu)要(yao)包(bao)括:胎(tai)牛(niu)血(xue)清,新生牛血(xue)清,培(pei)養基(ji),抗體,天根質粒小提(ti)試(shi)劑(ji)盒(he),基(ji)因組提(ti)取試(shi)劑(ji)盒(he),純(chun)化試(shi)劑(ji)盒(he),壹(yi)抗、二(er)抗等。


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