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胎(tai)牛血清的保(bao)存方法
更(geng)新(xin)時間(jian):2022-04-12
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胎(tai)牛血清是細(xi)胞(bao)培養常用的生物(wu)試(shi)劑,那(na)麽用(yong)不完(wan)的胎(tai)牛血清FBS該(gai)如何儲(chu)存呢?
胎(tai)牛血清FBS 壹(yi)般需(xu)要(yao)冷凍(dong)保存,在(zai) -5 到 -20°C 之間(jian),並(bing)且(qie)可(ke)以在(zai) 2 到 8°C 的溫(wen)度下解凍(dong)。將(jiang)血清等分(fen)並冷(leng)凍(dong)在(zai)較小(xiao)的部分(fen)(通常為 50 ml 試(shi)管(guan))中通常很有(you)用(yong),以避(bi)免多(duo)次(ci)冷(leng)凍(dong)和(he)解凍(dong)循(xun)環(huan)。有(you)時(shi),壹(yi)些 FBS 等分(fen)試樣(yang)在(zai)冷(leng)凍(dong)溫(wen)度下仍(reng)保(bao)留在(zai)液(ye)體(ti)中。這是(shi)由於缺乏(fa)用(yong)於開(kai)始(shi)結(jie)晶(jing)(冷凍(dong))的成(cheng)核(he)中心(顆(ke)粒(li)物質(zhi))。如果您(nin)只(zhi)是用(yong)手指(zhi)輕(qing)彈(dan)管(guan)子(zi),它(ta)們通常幾乎會立(li)即(ji)凝固。解凍(dong)後有(you)壹(yi)些沈(chen)澱(dian)是(shi)很(hen)常見的。沈(chen)澱(dian)物(wu),可(ke)能是(shi)由於某(mou)些血清蛋白的變(bian)性,可(ke)以通過短(duan)暫的離(li)心(xin)來(lai)清除,這(zhe)通常不會(hui)影(ying)響血清的質(zhi)量(liang)。
胎(tai)牛血清的處理(li)方法(fa)主(zhu)要(yao)有(you)以(yi)下幾種:
1.熱滅活(huo)
FBS 的常見處理(li)方法(fa)是(shi)熱滅(mie)活,其(qi)中將(jiang) FBS 在(zai) 56°C 的水浴中加熱(re) 30 分(fen)鐘(zhong),偶(ou)爾(er)搖晃。目(mu)的是(shi)滅活(huo) FBS中存在(zai)的補(bu)體(ti)系統的任(ren)何成(cheng)分(fen),以及(ji)其他(ta)潛在(zai)的未(wei)知(zhi)細(xi)胞(bao)生長(chang)抑制(zhi)劑(ji)。以(yi)前熱滅(mie)活(huo)也(ye)是為了(le)去(qu)除支(zhi)原(yuan)體(ti)汙染,這不再(zai)是(shi)壹(yi)個問(wen)題,因為(wei)現(xian)在(zai)所(suo)有(you)的血清產品都通過小到足以去(qu)除支(zhi)原(yuan)體(ti)的孔徑(jing)進(jin)行(xing)過濾。必須(xu)註(zhu)意的是(shi),熱滅(mie)活也(ye)可(ke)能產生不良(liang)影(ying)響,例(li)如降低培養細(xi)胞(bao)附著(zhe)在(zai)表(biao)面上的能力(li)。熱滅(mie)活過程必須(xu)小心(xin)進(jin)行(xing),因為(wei)溫(wen)度過高(gao)或長(chang)時間(jian)加熱(re)會使生長(chang)因子(zi)失(shi)活,並產生沈(chen)澱(dian)物(wu)。
2.活(huo)性炭處理(li)
活性炭可(ke)以與親脂(zhi)性分(fen)子(zi)結(jie)合,因此(ci)已(yi)用於從(cong) FBS 中去(qu)除激(ji)素(su),例如雄激(ji)素、雌二(er)醇(chun)、孕(yun)酮(tong)、皮(pi)質(zhi)醇(chun)、睪(gao)酮(tong)、三碘(dian)甲狀(zhuang)腺原(yuan)氨(an)酸(suan) (T3) 和(he)甲(jia)狀(zhuang)腺素(su) (T4)。這些血清脂(zhi)質(zhi)激(ji)素(su)傾(qing)向於幹(gan)擾(rao)免疫(yi)測(ce)定系統和(he)胰(yi)島(dao)素(su)測(ce)定方法。
3.透析
透析可(ke)以從 FBS 中去(qu)除所(suo)有(you)分(fen)子(zi)量(liang)小於 10,000 MW 的分(fen)子(zi)。這(zhe)包括極性和(he)非(fei)極性分(fen)子(zi)。去(qu)除激(ji)素(su)、細(xi)胞(bao)因子(zi)、葡(pu)萄糖(tang)、氨(an)基(ji)酸(suan)和(he)許(xu)多(duo)其他(ta)物質(zhi)。透(tou)析還(hai)可(ke)以去(qu)除 FBS 中的抗(kang)生素(su)和(he)其(qi)他(ta)外源(yuan)性分(fen)子(zi)。
4.伽馬輻照
伽馬輻照可(ke)以是 FBS 滅(mie)菌過程的壹(yi)部分(fen)。FBS 通常通過 0.1 um 過濾器(qi)多(duo)次(ci)過濾,以消(xiao)除微生物(wu)。伽馬射(she)線照(zhao)射可(ke)以滅活(huo)牛類中常見的病(bing)毒(du)。然而(er),壹(yi)些病毒(du)種類,例如細(xi)小(xiao)病(bing)毒(du),對(dui)伽馬射(she)線照(zhao)射具有(you)抗(kang)性。
5.低 IgG
盡管(guan) FBS 的 IgG 含(han)量(liang)較低,但對(dui)於某(mou)些特(te)定應用來(lai)說(shuo),即(ji)使這個(ge)水平也(ye)可(ke)能過高(gao)。通過捕獲色(se)譜法(fa)可(ke)以進(jin)壹(yi)步顯著降(jiang)低 IgG 水平。具(ju)有(you)低 IgG 的 FBS 用(yong)於抗(kang)體(ti)生產、重組蛋白合(he)成(cheng)和(he)其(qi)他(ta)應用。
FBS主(zhu)要(yao)產自(zi)於哪(na)裏?
胎(tai)牛血清的產地主(zhu)要(yao)集中於美(mei)、澳大利亞、新(xin)西(xi)蘭、加拿大,以及南(nan)美(mei)洲(zhou)和(he)中美(mei)洲(zhou)等(deng)地(di)區,血清產品的生產和(he)收(shou)集(ji)均受指機構(gou)管理(li)。FBS通常被標(biao)記(ji)為(wei) USDA 級(ji)或歐洲(zhou)級(ji)。
蘇州阿爾(er)法(fa)生物(wu)13年(nian)專(zhuan)註(zhu)於生物(wu)實(shi)驗(yan)室儀器(qi)及(ji)生物(wu)試(shi)劑耗材(cai)的供(gong)應,阿爾(er)法(fa)試劑主要(yao)包括:胎(tai)牛血清 ,新生牛血清,培養基(ji),抗(kang)體(ti),天根(gen)質(zhi)粒(li)小提試(shi)劑盒(he),基因組(zu)提(ti)取試劑(ji)盒,純(chun)化試(shi)劑盒,壹(yi)抗(kang)、二抗(kang)等。
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