瓊脂(zhi)糖凝(ning)膠蛋(dan)白(bai)分(fen)離層析(xi)過(guo)濾蛋(dan)白(bai)質純化介質 NiNTABead6FF蛋(dan)白(bai)純化采(cai)用(yong)用(yong)交(jiao)聯(lian)的6%瓊脂(zhi)糖凝(ning)膠為(wei)基質，配體(ti)與(yu)Ni NTA Beads相同。Ni NTA Beads 6FF除(chu)了(le)可以(yi)耐受(shou)苛(ke)刻(ke)的(de)試(shi)劑(ji)條件(jian)外，因(yin)其耐(nai)壓(ya)的(de)基質，可以(yi)耐受(shou)高(gao)達0.3 MPa的壓(ya)力，更(geng)穩定，因(yin)此(ci)該(gai)產(chan)品更(geng)適(shi)合用(yong)於工(gong)業(ye)大(da)規(gui)模蛋(dan)白(bai)的純化，可以(yi)在相對較(jiao)高(gao)的(de)流速下，實現對目的蛋白(bai)的純化。

瓊脂(zhi)糖凝(ning)膠蛋(dan)白(bai)分(fen)離層析(xi)過(guo)濾蛋(dan)白(bai)質純化介質 NiNTABead6FF蛋(dan)白(bai)純化

   交(jiao)聯(lian)的6%瓊脂(zhi)糖凝(ning)膠為(wei)基質，配體(ti)與(yu)Ni NTA Beads相同。Ni NTA Beads 6FF除(chu)了(le)可以(yi)耐受(shou)苛(ke)刻(ke)的(de)試(shi)劑(ji)條件(jian)外，因(yin)其耐(nai)壓(ya)的(de)基質，可以(yi)耐受(shou)高(gao)達0.3 MPa的壓(ya)力，更(geng)穩定，因(yin)此(ci)該(gai)產(chan)品更(geng)適(shi)合用(yong)於工(gong)業(ye)大(da)規(gui)模蛋(dan)白(bai)的純化，可以(yi)在相對較(jiao)高(gao)的(de)流速下，實現對目的蛋白(bai)的純化。

2.純化流程

2.1 緩沖(chong)液(ye)的(de)準(zhun)備(bei)

可使(shi)用(yong)下列推薦(jian)緩沖(chong)液(ye)，也(ye)可根(gen)據(ju)自(zi)己(ji)的(de)使用(yong)習慣配(pei)置不同的(de)緩沖(chong)液(ye)體(ti)系(xi)，基本原(yuan)理(li)就(jiu)是低(di)咪(mi)唑上(shang)樣，高(gao)咪唑(zuo)洗(xi)脫(tuo)，或(huo)者(zhe)高 pH上(shang)樣，低(di)pH 洗脫(tuo)。緩沖(chong)液(ye)在使用(yong)前(qian)最好(hao)用(yong)0.22 um 或(huo)者(zhe)0.45 um 濾膜過(guo)濾。因(yin)為 Ni NTA Beads 6FF 可以(yi)用(yong)於可溶(rong)蛋(dan)白(bai)和(he)包(bao)涵體蛋白(bai)的純化，兩(liang)種方(fang)法所需(xu)緩沖(chong)液(ye)不同。具(ju)體(ti)配(pei)置(zhi)方(fang)法見(jian)表(biao)3、表4和(he)表(biao)5。

2.2 樣品準(zhun)備(bei)

2.2.1 細(xi)菌或酵母(mu)表(biao)達(da)的蛋白(bai)

1）挑取單菌(jun)落到培養基中，根據(ju)載(zai)體使(shi)用(yong)說(shuo)明(ming)，加入(ru)相(xiang)應(ying)濃度(du)的誘(you)導劑(ji)誘導相應(ying)的(de)時間(jian)。

2）表達(da)結(jie)束後，將(jiang)培養液(ye)轉(zhuan)移到離心(xin)杯(bei)中，7，000 rpm（7，500×g），離心 15min 收(shou)集(ji)菌(jun)體，然(ran)後按照菌(jun)體∶Lysis Buffer=1∶10（W/V）加入(ru)Lysis Buffer，加入(ru)終(zhong)濃度(du)為1mM的(de) PMSF。加入(ru)溶(rong)菌(jun)酶(mei)（工(gong)作濃度(du)為0.2-0.4 mg/ml，如(ru)果(guo)表(biao)達(da)的宿主細(xi)胞內含(han)pLysS 或 pLysE，可以(yi)不加溶(rong)菌(jun)酶(mei)），（同(tong)時也(ye)可加入(ru)其(qi)他(ta)蛋(dan)白(bai)酶(mei)抑(yi)制劑(ji)，但(dan)不能影響目的蛋白(bai)與樹(shu)脂(zhi)的結合(he)）。

3）將(jiang)菌(jun)體(ti)沈(chen)澱(dian)懸(xuan)浮(fu)起(qi)來(lai)，（如(ru)果(guo)菌(jun)液(ye)濃度(du)高，也(ye)可考(kao)慮加入(ru)10 ug/ml RNase A和(he)5 ug/ml DNase I），混勻，放置(zhi)於冰上，然(ran)後冰上超(chao)聲

破碎(sui)細(xi)胞，至菌液(ye)基本保持(chi)澄(cheng)清。

4）將(jiang)澄(cheng)清的破碎(sui)液轉(zhuan)移(yi)至(zhi)離心管中，10.000 rpm（15.000×g），4℃離心20-30 min。取上清(qing)，置於冰上備(bei)用(yong)或(huo)-20℃C保存。

2.2.2 酵母(mu)、昆(kun)蟲和(he)哺(bu)乳細(xi)胞分(fen)泌表達(da)可溶(rong)性(xing)蛋(dan)白(bai)

1）將(jiang)細(xi)胞培養液(ye)轉(zhuan)移至離心(xin)杯(bei)，5，000 rpm（3，800×g），離心(xin)10 min，收集菌體得上(shang)清(qing)，如(ru)上清(qing)中不含(han) EDTA、組氨酸和(he)還原劑等(deng)物質(zhi)，即(ji)可直(zhi)接加入(ru)柱子使(shi)用(yong);如(ru)含(han)有(you) EDTA、組氨酸和(he)還原劑等(deng)物質(zhi)，需(xu)用(yong)Lysis Buffer 透(tou)析(xi)才(cai)能(neng)加入(ru)柱子。

2）對於大量(liang)體積的上清，需加入(ru)硫酸銨(an)沈澱(dian)濃縮後，蛋白(bai)還需用(yong)Lysis Buffer 透(tou)析(xi)後才能加入(ru)柱子。

2.2.3 包(bao)涵體蛋白(bai)純化（變(bian)性條(tiao)件）

1）將(jiang)培養液(ye)轉(zhuan)移到離心(xin)杯(bei)中，7，000 rpm（7，500×g），離心 15min 收(shou)集(ji)菌(jun)體，去(qu)掉(diao)上(shang)清(qing)。

2）按照(zhao)菌體∶Lysis buffer（不含(han) 8M 尿素(su)）=1∶10（W/V）將(jiang)菌(jun)體(ti)懸(xuan)浮(fu)起(qi)來(lai)混勻，冰浴超(chao)聲破碎(sui)。

3）將(jiang)破(po)碎(sui)液(ye)轉移至離心(xin)管(guan)中，10，000 rpm（15.000×g），4°C離心20-30 min。去(qu)掉(diao)上(shang)清，步驟(zhou)2和(he)3可以(yi)重復(fu)壹(yi)次(ci)。

4）按照(zhao)菌體(ti)∶Lysis buffer（含(han)8M 尿素(su)）=1∶10（W/V）將(jiang)包(bao)涵體懸(xuan)浮(fu)起(qi)來(lai)。

5）變(bian)性條(tiao)件下進(jin)行(xing)His 標(biao)簽(qian)蛋(dan)白(bai)純化，具(ju)體(ti)緩沖(chong)液(ye)配(pei)方(fang)見(jian)表(biao)4、表 5。

2.3 Ni NTA Beads 6FF的(de)裝(zhuang)填

2.3.1重力柱的裝(zhuang)填

1）取合適(shi)規格(ge)的(de)重力層析(xi)柱，裝(zhuang)入下墊片，加入(ru)適(shi)量(liang)純水潤洗柱管和(he)墊(dian)片，關閉下出口。

2）將(jiang) Ni NTA Beads 6FF 混合(he)均勻，用(yong)槍(qiang)頭(tou)吸(xi)取適量(liang)漿(jiang)液加入(ru)至(zhi)重力柱中（介質實(shi)際體(ti)積占懸(xuan)液的壹(yi)半(ban)），打(da)開(kai)下出口流幹保護液。

3）加入(ru)適(shi)量(liang)純水沖(chong)洗(xi)介質，待(dai)柱管中液體重力流幹後，關閉下出口。

4）裝(zhuang)入潤洗後的上墊(dian)片，確保墊片與填(tian)料之前沒有(you)空(kong)隙(xi)，且保持(chi)水(shui)平。

5）裝(zhuang)填好(hao)的(de)重力柱可以(yi)直接加入(ru)平衡(heng)液(ye)進(jin)行(xing)平衡(heng)，暫(zan)不使用(yong)時(shi)則(ze)加入(ru)保護液，4-30℃保存。

2.3.2 中壓(ya)層(ceng)析(xi)柱的裝(zhuang)填

Ni NTA Beads 6FF被廣(guang)泛(fan)應用(yong)於工(gong)業(ye)純化，因(yin)此(ci)，涉(she)及(ji)到各種中壓(ya)色(se)譜(pu)層(ceng)析(xi)柱的填(tian)裝(zhuang)，下面(mian)介紹(shao) Ni NTABeads6EF填裝(zhuang)層析(xi)柱的方(fang)法。裝(zhuang)柱前根(gen)據(ju)層(ceng)析(xi)柱直徑計算柱子底(di)面(mian)積，根據(ju)所需(xu)裝(zhuang)柱高度(du)計算所需(xu)介質體(ti)積，公式(shi)如(ru)下;  V=1.1502²h

• V∶所需(xu)介質體(ti)積 ml

• 1.15∶壓(ya)縮(suo)系(xi)數

• r∶柱管半(ban)徑 cm 

• h∶裝(zhuang)填高度(du) cm

瓊脂(zhi)糖凝(ning)膠蛋(dan)白(bai)分(fen)離層析(xi)過(guo)濾蛋(dan)白(bai)質純化介質 NiNTABead6FF蛋(dan)白(bai)純化 使(shi)用(yong)時(shi)的(de)註(zhu)意(yi)事項(xiang)：

註(zhu)意(yi)∶所取懸(xuan)液體積應為介質體(ti)積的兩倍，因(yin)為介質體(ti)積只占(zhan)懸(xuan)液總(zong)體(ti)積的壹(yi)半(ban)，另壹(yi)半(ban)為(wei)保護液。

1）用(yong)去(qu)離(li)子水(shui)沖(chong)洗(xi)層(ceng)析(xi)柱底篩板與接(jie)頭，確保柱底篩板上無(wu)氣(qi)泡，關閉柱底出口，並(bing)在柱底部(bu)留(liu)出1-2 cm 的去離子水(shui)。

2）將(jiang)介質懸(xuan)浮(fu)起(qi)來(lai)，小心(xin)的(de)將(jiang)漿(jiang)液連續地倒(dao)入層(ceng)析(xi)柱中。用(yong)玻璃棒沿著柱壁倒(dao)入(ru)漿(jiang)液可減(jian)少(shao)氣(qi)泡的產(chan)生。

3）如(ru)果(guo)使(shi)用(yong)儲(chu)液(ye)器(qi)，應立(li)即(ji)在層析(xi)柱和(he)儲(chu)液器(qi)中加滿(man)水(shui)，將(jiang)進(jin)樣分(fen)配器(qi)放置(zhi)於漿(jiang)液表面(mian)，連接(jie)至泵(beng)上，避免(mian)在分(fen)配器(qi)或進(jin)樣管(guan)中產生氣(qi)泡。4）打(da)開(kai)層(ceng)析(xi)柱底部(bu)出口，開啟(qi)泵(beng)，使(shi)其(qi)在設定的(de)流速下進(jin)行(xing)。最初應讓(rang)緩沖(chong)液(ye)緩慢流過層(ceng)析(xi)柱，然後緩慢增加至(zhi)最終(zhong)流速，這(zhe)樣可避(bi)免(mian)液壓(ya)對所形(xing)成(cheng)柱床的沖(chong)擊(ji)，也(ye)可以(yi)避免(mian)柱床形(xing)成(cheng)的(de)不均勻。如(ru)果(guo)達(da)不到推薦(jian)的(de)壓(ya)力或流速，可以(yi)用(yong)妳所使(shi)用(yong)泵(beng)的(de)最大流速，這(zhe)樣也(ye)可以(yi)得到壹(yi)個很(hen)好(hao)的(de)裝(zhuang)填效果(guo)。（註(zhu)意(yi)∶在隨(sui)後的色譜(pu)程序(xu)中，不要超(chao)過最大裝(zhuang)柱流速的(de)75%）當柱床高度(du)穩定後，在最後的裝(zhuang)柱流速下至少再上(shang)3倍(bei)柱床體積的去離子水(shui)。標(biao)上(shang)柱床高度(du)。5）關閉泵(beng)，關閉層(ceng)析(xi)柱出口。

6）如(ru)果(guo)使(shi)用(yong)儲(chu)液(ye)器(qi)，去除(chu)儲(chu)液(ye)器(qi)，將(jiang)分(fen)配器(qi)置於層析(xi)柱中。

7）將(jiang)分(fen)配器(qi)推向柱子至(zhi)標(biao)記(ji)的(de)柱床高度(du)處。允許裝(zhuang)柱液進(jin)入(ru)分(fen)配器(qi)，鎖緊分(fen)配器(qi)接頭(tou)。8）將(jiang)裝(zhuang)填好(hao)的(de)層(ceng)析(xi)柱連接(jie)至(zhi)泵或色(se)譜系(xi)統(tong)中，開始(shi)平衡(heng)。如(ru)果(guo)需(xu)要(yao)可以(yi)重新(xin)調整(zheng)分(fen)配器(qi)。

2.4 樣品純化流程2.4.1 孵育法純化

1）根(gen)據(ju)純化的(de)樣品量，取適量(liang) Ni NTA Beads 6FF 加入(ru)離(li)心(xin)管(guan)中，1000 rpm 離心 1min，吸(xi)棄(qi)上(shang)清;也(ye)可加入(ru)重力柱中，流幹保護液。2）向離心管(guan)中加入(ru)5倍(bei)介質體(ti)積的Lysis Buffer 清洗介質，1000 rpm離(li)心1min，吸(xi)棄上清(qing);如(ru)使用(yong)重力柱，則(ze)直(zhi)接在重力柱中清洗，直(zhi)接(jie)重力流幹 Lysis Buffer;重復(fu)兩(liang)次(ci)以上(shang)。

3）加入(ru)樣品，封閉(bi)離心(xin)管(guan)或重力柱管，4℃振(zhen)蕩(dang)孵育2-4 h或者37℃孵育 30 min-2 h。

4）孵育結束後，1000 rpm 離心1min，吸(xi)棄上(shang)清，或(huo)過濾收(shou)集介質，上(shang)清保留作為流穿(chuan)，用(yong)於電泳(yong)鑒(jian)定。

5）用(yong)5倍(bei)介質體(ti)積的Wash Buffer清洗介質，1000 rpm離(li)心1 min 或(huo)重力柱管過(guo)濾，去(qu)除(chu)上(shang)清(qing)（註(zhu)意(yi)不要吸(xi)到介質），重復(fu)3-5次(ci)，中間(jian)建(jian)議更(geng)換(huan)新(xin)離心(xin)管。必(bi)要(yao)時可以(yi)調整咪(mi)唑的(de)濃度(du)進(jin)行(xing)洗雜。

6）加入(ru)3-5倍(bei)柱體積的Elution Buffer 進(jin)行(xing)洗脫，室溫(wen)孵育 10-15min，1000 rpm離心1 min 或(huo)重力柱管收(shou)集(ji)洗脫液(ye)，可重復(fu) 2-3次(ci)。

2.4.2 重力柱法純化

1）將(jiang)裝(zhuang)填好(hao)的(de) Ni NTA Beads 6FF 重力柱用(yong)5倍(bei)柱體積 Lysis Buffer進(jin)行(xing)平衡(heng)，使(shi)填料處於與目的蛋白(bai)相同(tong)的(de)緩沖(chong)液(ye)體(ti)系(xi)下，重復(fu) 2-3次(ci)。2）將(jiang)樣品加到(dao)平衡(heng)好(hao)的(de)重力柱中，樣品保留時間(jian)至少(shao)2 min，保證樣品和(he)介質充(chong)分(fen)接觸，收(shou)集(ji)流出液，可以(yi)反復(fu)上(shang)樣增(zeng)加結(jie)合(he)效率(lv)。

3）用(yong) 10-15倍(bei)柱體積的 Wash Buffer 進(jin)行(xing)洗雜，去(qu)除(chu)非特(te)異性(xing)吸附(fu)的(de)雜蛋(dan)白(bai)，收集(ji)洗(xi)雜液(ye)。必(bi)要(yao)時可以(yi)調整咪(mi)唑的(de)濃度(du)進(jin)行(xing)洗雜。

4）使(shi)用(yong)5-10倍(bei)柱體積的 Elution Buffer洗脫，分(fen)段收集(ji)，每(mei)壹(yi)個柱體積收集壹(yi)管(guan)，分(fen)別檢測(ce)，既(ji)可以(yi)保證所有(you)結合的(de)目的蛋白(bai)被洗(xi)脫(tuo)，又可以(yi)得到高(gao)純度(du)和(he)高(gao)濃度(du)的蛋(dan)白(bai)。

2.4.3 中壓(ya)層(ceng)析(xi)柱法純化

Ni NTA Beads 6FF裝(zhuang)填好(hao)後，可以(yi)用(yong)各種常規(gui)的中低壓(ya)色(se)譜(pu)系(xi)統(tong)。

1）將(jiang)泵(beng)管(guan)道中註滿(man)去(qu)離(li)子水(shui)。去掉上塞(sai)子，將(jiang)層(ceng)析(xi)柱連接(jie)至(zhi)色譜系(xi)統(tong)中，打(da)開(kai)下出口，將(jiang)預(yu)裝(zhuang)柱接到(dao)色(se)譜系統(tong)中，並(bing)旋緊(jin)。

2）用(yong) 3-5倍(bei)柱體積的去離子水(shui)沖(chong)洗(xi)出儲存緩沖(chong)液(ye)。

3）使(shi)用(yong)至(zhi)少(shao)5倍(bei)柱床體積的 Lysis Buffer 平衡(heng)色(se)譜柱。

4）利用(yong)泵(beng)或(huo)樣品環上(shang)樣。註(zhu);樣品的粘(zhan)度(du)增加使(shi)得(de)即(ji)使上(shang)樣體(ti)積很(hen)少(shao)，也會導致層析(xi)柱很(hen)大(da)的反壓(ya)。上(shang)樣量(liang)不要超(chao)過柱子的(de)結合能力。大量(liang)的樣品體積也可能(neng)造成很(hen)大(da)的反壓(ya)，使(shi)得(de)進(jin)樣器(qi)更(geng)難使用(yong)。

5）用(yong)Wash Buffer 沖(chong)洗(xi)柱子，直(zhi)到紫外吸收達(da)到壹(yi)個穩定的(de)基線（壹(yi)般至少10-15個柱體積）。

註∶在樣品和(he)結(jie)合緩沖(chong)液(ye)中加入(ru)咪(mi)唑(zuo)可以(yi)提高樣品純度(du)。

6）用(yong)Elution Buffer采(cai)用(yong)壹(yi)步法或線性梯(ti)度(du)洗脫(tuo)。

壹(yi)步洗脫(tuo)中，通常5倍柱體積洗脫液就(jiu)足夠(gou)了(le)。梯度(du)洗脫(tuo)可以(yi)用(yong)壹(yi)個小的(de)梯(ti)度(du)，例如(ru)20 倍柱體積或更(geng)多(duo)，來(lai)分(fen)離不同結(jie)合強(qiang)度(du)的蛋(dan)白(bai)質。

上(shang)述(shu)步驟(zhou)介質洗(xi)脫結(jie)束後，先用(yong) Lysis Buffer 沖(chong)洗(xi)3倍(bei)柱體積，然後用(yong)純水沖(chong)洗(xi)5倍(bei)柱體積，再用(yong)20%乙(yi)醇(chun)沖(chong)洗(xi)2個柱體積，然後將(jiang)介質置(zhi)於2-8℃保存。

2.5 SDS-PAGE 檢測(ce)

將(jiang)使(shi)用(yong)純化產(chan)品得到(dao)的樣品（包(bao)括流出組分(fen)、洗雜組(zu)分(fen)和(he)洗(xi)脫組分(fen)）以及(ji)原始(shi)樣品使用(yong) SDS-PAGE檢測(ce)純化效果(guo)。

3.在位清(qing)洗(xi)

當填料使用(yong)過(guo)程中發(fa)現(xian)反壓(ya)過(guo)高(gao)或(huo)者(zhe)填料上面(mian)出現明顯的汙(wu)染時(shi)，需(xu)要進(jin)行(xing)在位清(qing)洗(xi)操作（Cleaning-in-Place，CIP）。建(jian)議按照下面(mian)操作去除(chu)填(tian)料上殘留的(de)汙(wu)染物，如(ru)沈澱(dian)蛋白(bai)、疏(shu)水(shui)蛋白(bai)和(he)脂(zhi)蛋白(bai)等。去(qu)除(chu)強(qiang)疏(shu)水(shui)結合(he)的蛋白(bai)，脂(zhi)蛋白(bai)和(he)脂(zhi)類(lei)

通過使用(yong) 30%異(yi)丙(bing)醇(chun)清(qing)洗 5-10個柱體積，接觸時(shi)間(jian)為 15-20 min 可以(yi)去除(chu)此(ci)類(lei)汙(wu)染物。然(ran)後，再使用(yong) 10倍(bei)柱體積的去離子水(shui)清洗。也可

以(yi)選(xuan)擇使(shi)用(yong)含(han)有(you)去汙(wu)劑的(de)酸(suan)性或堿(jian)性(xing)溶(rong)液(ye)，清(qing)洗(xi)填(tian)料2倍柱體積。例如(ru)，含(han)有(you)0.1-0.5% 非離(li)子去(qu)汙(wu)劑的(de)0.1M 醋酸溶(rong)液(ye)，接(jie)觸時(shi)間(jian)為 1-2 h。去(qu)汙(wu)劑處(chu)理(li)後，需要使(shi)用(yong)70%的(de)乙(yi)醇(chun)清(qing)洗(xi)5個柱體積，以*去除(chu)去(qu)汙(wu)劑。最後使用(yong)10倍(bei)柱體積的去離子水(shui)清洗。去除(chu)離(li)子作用(yong)結(jie)合(he)的(de)蛋(dan)白(bai)

使用(yong)1.5M NaCI溶(rong)液(ye)清(qing)洗(xi) 10-15 min。然(ran)後，再使用(yong)去(qu)離(li)子水(shui)清洗 10個柱體積。

4.填料再生

組氨酸標(biao)簽(qian)蛋(dan)白(bai)親和(he)純化填(tian)料所帶(dai)的(de)鎳離子不需要(yao)經(jing)常(chang)螯合(he)去(qu)除(chu)和(he)重新(xin)掛鎳(nie)離子。當填料使用(yong)過(guo)程中發(fa)現(xian)顏色(se)變(bian)淺，或(huo)者填(tian)料載(zai)量明(ming)顯變(bian)低時(shi)，需要(yao)進(jin)行(xing)對填料進(jin)行(xing)鎳離子剝(bo)離和(he)重新(xin)掛鎳(nie)離子，也(ye)就(jiu)是填(tian)料再生。將(jiang)填(tian)料裝(zhuang)填在合適(shi)的層(ceng)析(xi)柱內，按(an)照(zhao)下面(mian)操作流程進(jin)行(xing)鎳離子剝(bo)離和(he)重新(xin)掛鎳(nie)離子。

1）使(shi)用(yong)5倍(bei)柱體積去離子水(shui)清洗填料;

2）使用(yong)5倍(bei)柱體積 100 mM EDTA （pH 8.0）剝落鎳離子;3）使(shi)用(yong) 10倍(bei)柱體積去離子水(shui)清洗填料;

4）使用(yong)0.5M NaOH清(qing)洗(xi)5倍(bei)柱體積，停留 10-15min;5）使用(yong)去(qu)離(li)子水(shui)清洗填料，直至 pH中性;6）使用(yong)3-5倍(bei)柱體積 100 mM NiSO4再生掛鎳(nie);7）使用(yong)10倍(bei)柱體積去離子水(shui)清洗;

填料再生後，可以(yi)立(li)即(ji)使用(yong)，如(ru)不立(li)即(ji)使用(yong)，需(xu)要(yao)將(jiang)填(tian)料懸(xuan)浮(fu)於等體(ti)積的 20%乙(yi)醇(chun)中，置於4-30°℃ 保存。

      蘇州(zhou)阿爾(er)法生物提供(gong)的瓊脂(zhi)糖凝(ning)膠介質、葡(pu)聚糖(tang)凝(ning)膠介質等(deng)蛋白(bai)純化和(he)分(fen)離填料以及(ji)相關生物試(shi)劑(ji)。另外還提供(gong)、氨酸標(biao)簽(qian)蛋(dan)白(bai)親和(he)純化介質、GST-tag蛋(dan)白(bai)親和(he)純化介質、 MBP-tag蛋(dan)白(bai)親和(he)純化介質、Biotin-tag蛋(dan)白(bai)親和(he)純化介質、Strep-tagll標(biao)簽(qian)親和(he)純化介質、 標(biao)簽(qian)抗體(ti)親和(he)純化介質等(deng)標(biao)簽(qian)蛋(dan)白(bai)親和(he)層(ceng)析(xi)介質； 離(li)子交(jiao)換(huan)層析(xi)  、色(se)譜(pu)柱、離子交(jiao)換(huan)層析(xi)樹(shu)脂(zhi)、疏(shu)水(shui)層析(xi)介質、 磁(ci)性微球(qiu)等。