技術(shu)文章(zhang)
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2022-615
轉(zhuan)染試劑(ji)在(zai)細(xi)胞轉(zhuan)染、細(xi)胞識(shi)別、抗(kang)體蛋白(bai)研發等(deng)領域廣泛(fan)使用(yong),通常(chang)可(ke)以直接(jie)購(gou)買(mai)或(huo)者(zhe)過(guo)實驗(yan)室中DIY配制。Lipofectamine、fugene、磷(lin)酸鈣(gai)、是(shi)較(jiao)為(wei)常(chang)見(jian)的轉(zhuan)染試劑(ji),其實目(mu)前(qian)市場(chang)上(shang)的轉(zhuan)染試劑(ji)盒針對(dui)某(mou)些(xie)轉(zhuan)染進行(xing)了(le)優(you)化,使用(yong)起來(lai)較(jiao)為(wei)方(fang)便(bian)。比(bi)如(ru):細(xi)胞類型(xing)來(lai)自於(yu)Lonza系列(lie)的Amaxa人(ren)單(dan)核細(xi)胞核因(yin)子(zi)試劑(ji)盒、Invitrogen的Silencer(R)siRNATransfectionIIKit等(deng)試劑(ji)盒在(zai)細(xi)胞轉(zhuan)染方面都有著(zhe)較(jiao)好(hao)的效(xiao)果。壹(yi)、針對(dui)siRNA遞(di)送優(you)化的常(chang)用(yong)轉(zhuan)染試劑(ji)市...
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GFP抗(kang)體應用(yong)中的常(chang)見(jian)問題(ti)有(you)哪(na)些(xie)?標簽(qian):抗(kang)體蛋(dan)白(bai)質(zhi)結(jie)構科學科普(pu)GFP抗(kang)體(ti)GFP適(shi)合於(yu)蛋白(bai)質(zhi)標記(ji),這(zhe)是(shi)該抗體(ti)的(de)天然優(you)勢。雖然它非常(chang)適(shi)合實時(shi)成(cheng)像(xiang),例(li)如,作為(wei)TP53MITE-seq屏(ping)幕(mu)的(de)報告(gao)器(qi),其他應用(yong)導致(zhi)GFP熒光(guang)猝滅(mie),這使得(de)有必(bi)要使用(yong)抗GFP抗(kang)體。組(zu)織(zhi)樣本(ben)的(de)冷凍保存(cun)、組(zu)織(zhi)學制(zhi)備(bei)和(he)固(gu)定(ding)劑(ji)的使用(yong)通常(chang)會(hui)導致(zhi)GFP熒光(guang)*或(huo)部(bu)分喪(sang)失,因(yin)此需要使用(yong)抗GFP抗(kang)體來(lai)獲得(de)可靠(kao)的結(jie)果。通過(guo)蛋(dan)白(bai)質(zhi)印(yin)跡(ji)檢測(ce)GFP標記(ji)的(de)蛋白(bai)質(zhi)和(he)通(tong)過(guo)免疫沈澱(dian)研(yan)究(jiu)蛋(dan)白(bai)質(zhi)-蛋(dan)白(bai)質(zhi)相互作(zuo)用(yong)也需(xu)要使用(yong)GFP抗體(ti)。抗GFP抗(kang)體可(ke)...
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看完(wan)本篇妳(ni)或(huo)許(xu)會(hui)對(dui)振蕩培養(yang)箱(xiang)有更多的(de)了解振蕩培養(yang)箱(xiang)是(shi)壹(yi)種(zhong)廣泛(fan)應用(yong)於(yu)微生(sheng)物(wu)培養(yang)、懸浮(fu)細(xi)胞培養(yang)、以(yi)及(ji)分(fen)子(zi)生物(wu)學實驗(yan)具有加熱和(he)制(zhi)冷(leng)雙(shuang)向(xiang)調溫(wen)系(xi)統,溫度(du)可(ke)控(kong)的培養(yang)箱(xiang)和(he)振蕩器(qi)相結(jie)合的生(sheng)化儀器(qi);振蕩培養(yang)箱(xiang)主要集(ji)恒溫(wen)培養(yang)箱(xiang)與(yu)振蕩器(qi)於(yu)壹(yi)體,節約(yue)空(kong)間占地(di)小(xiao),功(gong)能多投(tou)資(zi)少(shao);振蕩培養(yang)箱(xiang)外(wai)殼為(wei)ABS工(gong)程(cheng)塑(su)料(liao)制作(zuo)、腔體(ti)全(quan)鏡面不銹鋼(gang)組件(jian),不生銹;傾(qing)斜(xie)式(shi)人(ren)性化的控(kong)制面板,大(da)屏(ping)幕(mu)背(bei)光(guang)液(ye)晶顯(xian)示屏(ping),更具良好(hao)的視覺效(xiao)果;該設(she)備(bei)設(she)有(you)運行(xing)參(can)數(shu)記(ji)憶(yi)功(gong)能,避免繁瑣(suo)操(cao)作(zuo)並(bing)密碼(ma)鎖(suo)定(ding),杜絕人(ren)為(wei)誤(wu)操(cao)作(zuo);振蕩培養(yang)箱(xiang)廠家(jia)的振蕩培養(yang)箱(xiang)設(she)...
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由於(yu)T細(xi)胞具有多種(zhong)亞型(xing),所以(yi)研究膜(mo)結(jie)合T細(xi)胞受(shou)體(ti)的技術(shu)困難,但在(zai)某些(xie)情(qing)況下,您希望(wang)能夠(gou)做(zuo)到這(zhe)壹(yi)點,例(li)如分析(xi)哪(na)些(xie)免疫記(ji)憶(yi)已(yi)被(bei)誘導以測(ce)量(liang)個體對(dui)特(te)定(ding)抗原(yuan)的(de)反(fan)應程(cheng)度(du)。此時(shi),有多(duo)種(zhong)方法(fa)可以(yi)實現(xian),主要分為(wei)兩(liang)大(da)類:壹(yi)種(zhong)是(shi)通過(guo)測(ce)量(liang)特(te)征性反(fan)應(例(li)如細(xi)胞因子分泌)來(lai)檢測(ce)T細(xi)胞對(dui)刺激作出(chu)反(fan)應的(de)激活,另(ling)壹(yi)種(zhong)是(shi)通過(guo)細(xi)胞的特(te)異(yi)性來(lai)分析(xi)T細(xi)胞受(shou)體(ti)。下面總結(jie)了壹(yi)下T細(xi)胞分析(xi)的6種(zhong)方法(fa):1.限(xian)制(zhi)稀(xi)釋(shi)培養(yang)該技術(shu)涉及(ji)通(tong)過(guo)使用(yong)不同(tong)稀釋(shi)度(du)的(de)細(xi)胞來(lai)測量(liang)對(dui)特(te)定(ding)抗原(yuan)產生(sheng)反(fan)應的(de)T細(xi)胞的頻率(lv),然後(hou)測量(liang)無(wu)反(fan)應的(de)孔數(shu)。不(bu)用(yong)過(guo)多(duo)計(ji)算...
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標簽(qian):熒光(guang)素(su)細(xi)胞轉(zhuan)染熒光(guang)強(qiang)度(du)熒光(guang)檢測(ce)啟(qi)動子螢(ying)火蟲(chong)可以(yi)在(zai)螢(ying)光(guang)素(su)酶的(de)存(cun)在(zai)下將(jiang)螢(ying)光(guang)素(su)轉(zhuan)化為(wei)氧(yang)化螢(ying)光(guang)素(su)以發光(guang)。利(li)用(yong)熒光(guang)素(su)酶的(de)較(jiao)常(chang)見(jian)的科學測定(ding)是(shi)報告(gao)基因測定(ding),其中可以(yi)通(tong)過(guo)測(ce)量(liang)來(lai)自熒光(guang)素(su)酶反(fan)應的(de)光(guang)信號來(lai)跟(gen)蹤(zong)轉(zhuan)錄(lu)激活或(huo)抑(yi)制。建議(yi)使用(yong)雙熒光(guang)素(su)酶系(xi)統,其中發生(sheng)二(er)次生物(wu)發光(guang)反(fan)應。第(di)二(er)個信號由另壹(yi)個分子(zi)發出(chu)。最常(chang)見(jian)的是(shi)由也可(ke)以(yi)生物(wu)發光(guang)的(de)海腎(shen)基因編碼(壹(yi)些(xie)質(zhi)粒(li)已(yi)經(jing)包(bao)含海腎(shen)和(he)螢(ying)光(guang)素(su)酶基因,例(li)如Promega的pmirGLO)。這(zhe)允許(xu)您將熒光(guang)素(su)酶表(biao)達(da)標準(zhun)化為(wei)對(dui)照(zhao)並(bing)測量(liang)您的相對(dui)轉(zhuan)染效率(lv)。熒光(guang)素(su)酶檢測(ce)過(guo)程(cheng)中...
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