生化試(shi)劑-CD4細胞(bao)分(fen)選磁(ci)珠可用於對(dui)細胞(bao)進(jin)行(xing)磁(ci)性標(biao)記(ji)。標記(ji)後，將(jiang)細胞(bao)懸液加載(zai)到(dao)分(fen)選柱上(shang)，該柱放置(zhi)在(zai)含分(fen)選器(qi)的(de)磁(ci)場中。 磁(ci)性標(biao)記(ji)的CD4+細(xi)胞(bao)被(bei)保(bao)留在(zai)柱內。 · 高(gao)磁(ci)珠結(jie)合力， 簡(jian)便、快捷，高(gao)純度、高(gao)得率、高(gao)活率

產(chan)品(pin)信息(xi) 

生化試(shi)劑-CD4細胞(bao)分(fen)選磁(ci)珠 可用於對(dui)細胞(bao)進(jin)行(xing)磁(ci)性標(biao)記(ji)。標記(ji)後，將(jiang)細胞(bao)懸液加載(zai)到(dao)分(fen)選柱上(shang)，該柱放置(zhi)在(zai)含分(fen)選器(qi)的(de)磁(ci)場中。 磁(ci)性標(biao)記(ji)的CD4+細(xi)胞(bao)被(bei)保(bao)留在(zai)柱內。未(wei)標記(ji)的細(xi)胞(bao)貫(guan)穿其(qi)中而(er)被(bei)去(qu)除(chu)。將(jiang)分選柱從磁(ci)場中移(yi)除(chu)之後，洗(xi)脫磁(ci)性標(biao)記(ji)的CD4+細(xi)胞(bao)作為陽性選擇(ze)的(de)細胞(bao)。

 · 高(gao)磁(ci)珠結(jie)合力 

·  簡(jian)便、快捷

 ·  高(gao)純度、高(gao)得率、高(gao)活率

使(shi)用方(fang)法(fa)

試劑和(he)儀(yi)器要(yao)求

1.緩(huan)沖液: （pH7.2 PBS、0.5% BSA、2 mM EDTA，2-8C)。

2.分選柱和(he)分(fen)選器(qi)

3.(可選)用於流(liu)式(shi)細(xi)胞(bao)術(shu)分(fen)析的熒光偶聯(lian)CD4抗(kang)體(ti)。

4.(可選)PI(碘化丙(bing)啶(ding))或7-AAD 用於流(liu)式(shi)細(xi)胞(bao)術(shu)排(pai)除(chu)死亡(wang)細(xi)胞(bao)。

5.(可選)預(yu)分(fen)離過(guo)濾器用於去(qu)除(chu)細(xi)胞(bao)團(tuan)塊。

操(cao)作步驟(zhou)

壹、樣(yang)本準(zhun)備

當處(chu)理抗(kang)凝(ning)的外周(zhou)血(xue)液時，應通(tong)過(guo)密(mi)度(du)梯(ti)度(du)離(li)心法(fa)分離外周(zhou)血(xue)單(dan)核(he)細(xi)胞(bao)(PBMC)。

在(zai)處理組織時，用標準(zhun)的制備方(fang)法(fa)制備單細(xi)胞(bao)懸浮液。

二(er)、磁(ci)珠標記(ji)

1.細胞(bao)計(ji)數。

2.300g 離(li)心10min，去(qu)除(chu)上(shang)清。

3.每(mei) 10⁷細胞(bao)，用80μL緩沖(chong)液重(zhong)懸。

4.每 10⁷細(xi)胞(bao)，用20μLCD4磁(ci)珠混(hun)勻(yun)。

5.(2-8)℃冰箱(xiang)避(bi)光孵(fu)育15min(如(ru)果是在(zai)冰上(shang)孵(fu)育，需(xu)要(yao)增加孵(fu)育時(shi)間(jian);如果是常(chang)溫(wen)孵(fu)育，會增加非特(te)異(yi)結(jie)合)。

6.(可選)加(jia)入染色抗(kang)體(ti)，在(zai)2-8℃避光孵(fu)育5分(fen)鐘(zhong)。

7.每10⁷細(xi)胞(bao)，加(jia)入1-2mL緩沖液洗(xi)滌，300g離(li)心(xin)10min，棄上(shang)清。

8.用 500μL 緩沖(chong)液重(zhong)懸細胞(bao)。

三(san)、磁(ci)性分(fen)選

1.將(jiang)分選柱放置(zhi)在(zai)分選器(qi)的(de)磁(ci)場中。

2.將(jiang)分選柱中加入適量(liang)緩沖(chong)液，充分濕(shi)潤(run)分(fen)選柱（xM: 500μL；xL: 3 mL）

3.將(jiang)細胞(bao)懸液加到(dao)分(fen)選柱中。

4.結(jie)合磁(ci)珠的細(xi)胞(bao)會被(bei)吸(xi)附到(dao)分(fen)選柱上(shang)，沒有(you)結(jie)合的細胞(bao)會順(shun)著(zhe)液體(ti)流(liu)下(xia)來。加適量(liang)的緩(huan)沖液，待(dai)液體(ti)全部(bu)流盡(jin)，再(zai)加入適量(liang)緩沖(chong)液，壹共(gong)洗(xi)3次。收(shou)集總流出(chu)物(wu)。這是未(wei)標記(ji)的細(xi)胞(bao)。（xM: 3X500μL；xL: 3x3mL）

5.將(jiang)分選柱從分(fen)選器(qi)中取出(chu)，並(bing)將(jiang)其(qi)放在(zai)合適的收(shou)集管(guan)上(shang)。

6.加適(shi)量(liang)的緩(huan)沖液到(dao)分(fen)選柱中，迅速(su)用塞(sai)子推(tui)下，得到(dao)就是目的(de)細(xi)胞(bao)。（xM: 1mL；xL: 5 mL）

7.(可選)為了(le)提(ti)高(gao)標(biao)記細(xi)胞(bao)的(de)純度，洗(xi)脫部(bu)分可以在(zai)第(di)二(er)個xM或xL柱上(shang)富集。使(shi)用新的(de)分選柱重(zhong)復(fu)步驟(zhou)1至(zhi)6中描(miao)述的(de)磁(ci)選過(guo)程(cheng)。

保(bao)存方(fang)法(fa)

在(zai)2-8℃條件下避光保(bao)存，請勿(wu)冷凍(dong)。有(you)效期(qi)見試劑外標(biao)簽。

相(xiang)關(guan)產(chan)品(pin)

生化試(shi)劑-CD4細胞(bao)分(fen)選磁(ci)珠 搭(da)配(pei)我(wo)司SophMag^®手動磁(ci)分選套裝(zhuang)，效果更佳(jia)。