天根(gen) 動(dong)物(wu)組(zu)織總(zong)RNA提取(qu)試劑(ji)盒(he) DP431針對動(dong)物(wu)組(zu)織配(pei)置，操(cao)作(zuo)更簡單(dan)、流程(cheng)更優化(hua)。
配有(you)DNaseⅠ，可有效去(qu)除(chu)DNA 汙染(ran)。
RNA純(chun)度更高，無雜(za)質殘留，特別適合於(yu)對(dui)純(chun)度要(yao)求(qiu)很(hen)高(gao)的下遊(you)實(shi)驗。
操(cao)作(zuo)安(an)全(quan)可靠，無需(xu)酚/ 氯仿(fang)抽提，無需(xu)氯(lv)化銫(se)梯度離(li)心，無需(xu)氯(lv)化鋰(li)或乙(yi)醇沈澱。

天根(gen) 動(dong)物(wu)組(zu)織總(zong)RNA提取(qu)試劑(ji)盒(he) DP431

RNAprep pure Tissue Kit 采用(yong)離(li)心吸附柱和*的緩沖系(xi)統(tong)，可從動(dong)物(wu)組(zu)織中(zhong)快(kuai)速(su)提(ti)取(qu)總(zong)RNA，可同時(shi)處(chu)理(li)大量(liang)不同(tong)樣(yang)品(pin)。30-40 分鐘內即(ji)可完成(cheng)反應(ying)，提(ti)取(qu)的總(zong)RNA純(chun)度高(gao)，沒(mei)有蛋(dan)白質和其他雜(za)質汙染。

天(tian)根(gen) 動(dong)物(wu)組(zu)織總(zong)RNA提取(qu)試劑(ji)盒(he) DP431

產(chan)品(pin)特點：

針對動(dong)物(wu)組(zu)織配(pei)置，操(cao)作(zuo)更簡單(dan)、流程(cheng)更優化(hua)。

配有(you)DNaseⅠ，可有效去(qu)除(chu)DNA 汙染(ran)。

RNA純(chun)度更高，無雜(za)質殘留，特別適合於(yu)對(dui)純(chun)度要(yao)求(qiu)很(hen)高(gao)的下遊(you)實(shi)驗。

操(cao)作(zuo)安(an)全(quan)可靠，無需(xu)酚/ 氯仿(fang)抽提，無需(xu)氯(lv)化銫(se)梯度離(li)心，無需(xu)氯(lv)化鋰(li)或乙(yi)醇沈澱。 

下(xia)遊(you)應(ying)用(yong)：

RT-PCR

Northern blot、Dot blot

Real-time RT-PCR

芯片(pian)分(fen)析

polyA 篩選、體(ti)外(wai)翻(fan)譯(yi)、RNase 保護分(fen)析和分子(zi)克隆(long)

提(ti)示(shi)

樣本(ben)保存推(tui)薦(jian)使用(yong)RNAstore 樣(yang)本(ben)保存液(ye)(DP408)

進(jin)行組(zu)織樣(yang)本的保存。

預(yu)防RNase汙(wu)染(ran)，應(ying)註(zhu)意(yi)以(yi)下(xia)幾(ji)方面(mian) 

1. 經常(chang)更換新(xin)手套(tao)。因(yin)為(wei)皮(pi)膚經常(chang)帶有細(xi)菌，可能導(dao)致RNase汙(wu)染(ran)。

2.  使用(yong)無RNase的塑(su)料(liao)制(zhi)品(pin)和槍頭(tou)避免交(jiao)叉汙染(ran)。

3.  RNA在(zai)裂(lie)解液(ye)RL中(zhong)時(shi)不會被(bei)RNase降解。但提取(qu)後(hou)繼(ji)續(xu)處(chu)理(li)過程(cheng)中(zhong)應(ying)使用(yong)不(bu)含(han)RNase的塑(su)料(liao)和玻(bo)璃器(qi)皿(min)。

4. 玻(bo)璃器(qi)皿(min)可在150℃烘烤(kao)4 h，塑(su)料(liao)器(qi)皿(min)可在0.5 M NaOH中(zhong)浸泡(pao)10min，然(ran)後(hou)用(yong)水*清(qing)洗(xi)，再滅菌，即(ji)可去除(chu)RNase。

5. 配制(zhi)溶液應(ying)使用(yong)RNase-Free ddH2O。（將水加入到幹(gan)凈的玻(bo)璃瓶中(zhong)，加入DEPC至終(zhong)濃(nong)度0.1%( v/v)，混(hun)勻(yun)後(hou)放(fang)置(zhi)過夜(ye)，高(gao)壓滅菌。）使用(yong)前(qian)註(zhu)意(yi)事(shi)項1. 操(cao)作(zuo)前(qian)在RL中(zhong)加入β-巰基乙(yi)醇至終(zhong)濃(nong)度1%，如(ru)1 ml RL中(zhong)加入10 μl β-巰基乙(yi)醇。此(ci)裂(lie)解液(ye)最好現(xian)用(yong)現(xian)配。

6. 配(pei)好的RL 4℃可放(fang)置(zhi)壹個(ge)月，裂(lie)解液(ye)RL在儲存時(shi)可能會形(xing)成(cheng)沈澱，如(ru)果(guo)有(you)沈澱出(chu)現(xian)，請加熱溶(rong)解後(hou)使用(yong)。2. 第(di)壹(yi)次使用(yong)前(qian)應(ying)在(zai)漂洗液(ye)RW中(zhong)加入無水乙(yi)醇，加入量(liang)請參見瓶上(shang)標(biao)簽(qian)。

7. 以(yi)下(xia)操(cao)作(zuo)如(ru)非(fei)指(zhi)明，均在室(shi)溫(wen)下(xia)進(jin)行。DNase I儲存液的配制(zhi)將DNase I幹(gan)粉(fen)（1500 U）溶解在(zai)550 μl RNase-Free ddH2O中(zhong)，輕(qing)柔混(hun)勻(yun)，分(fen)裝(zhuang)後(hou)-20℃貯(zhu)存(cun)（可保存9個(ge)月）。

8. 註(zhu)意(yi)：從-20℃融(rong)化後(hou)的DNase I儲存液保存於(yu)4℃（可保存6周(zhou)），不要(yao)再(zai)次(ci)凍(dong)存(cun)。

RNA純(chun)度及濃度檢(jian)測(ce) 

完整性： RNA可用(yong)普(pu)通(tong)瓊脂(zhi)糖凝(ning)膠電(dian)泳 (電(dian)泳條件：膠濃(nong)度1.2%；0.5×TBE電(dian)泳(yong)緩沖 液(ye)；150V，15 min)檢(jian)測(ce)完整性。由於(yu)細(xi)胞(bao)中(zhong)70%-80%的RNA為(wei)rRNA，電(dian)泳(yong)後(hou)UV下(xia)應(ying)能(neng)看 到非(fei)常(chang)明(ming)顯的rRNA條帶。28S rRNA的量(liang)約(yue)為(wei)18S rRNA的兩(liang)倍，說明RNA的完整性較(jiao)好。

 純(chun)度：OD260/OD280比(bi)值是(shi)衡(heng)量(liang)蛋白(bai)質(zhi)汙染(ran)程(cheng)度的指(zhi)標(biao)。高質(zhi)量(liang)的RNA，OD260/OD280讀(du) 數在(zai)1.8-2.1之(zhi)間(jian)，比(bi)值為(wei)2.0是(shi)高(gao)質(zhi)量(liang)RNA的標(biao)誌

。OD260/OD280讀(du)數受(shou)測(ce)定所用(yong)溶(rong)液(ye)的pH值 影(ying)響(xiang)。同壹(yi)個(ge)RNA樣(yang)品(pin)，假定在10 mM Tris，pH7.5溶液中(zhong)測出(chu)的OD260/OD280讀(du)數1.8-2.1之(zhi) 間(jian)，在水溶液(ye)中(zhong)所測讀(du)數則(ze)可能在(zai)1.5-1.9之(zhi)間(jian)，但這並不表(biao)示(shi)RNA不純(chun)。

 濃度：取(qu)壹定量(liang)的 RNA 提取(qu)物(wu)，用(yong)RNase-Free ddH2O稀釋n 倍，用(yong)RNase-Free ddH2O將分(fen)光光度計(ji)調零(ling)，取(qu)稀釋液進(jin)行OD260, OD280測(ce)定，按照以(yi)下(xia)公(gong)式(shi)進(jin)行RNA濃(nong)度的 計(ji)算： 終(zhong)濃(nong)度（ng/μl）= (OD260)×(稀釋倍數n)×40

實(shi)驗例(li)

組(zu)織取(qu)樣量(liang)展示(shi)