Prepacked Desalting Column葡(pu)聚(ju)糖凝膠(jiao)過(guo)濾層(ceng)析(xi)填(tian)料(liao)蛋白(bai)純(chun)化脫(tuo)鹽柱 適用於(yu)分子(zi)量大於(yu)5000Da的(de)蛋白(bai)或(huo)其他(ta)大分子(zi)樣品(pin)的(de)脫(tuo)鹽、緩沖液置換(huan)或(huo)小分子(zi)的去除(chu)。Prepacked Desalting Column葡聚(ju)糖凝膠(jiao)過(guo)濾層(ceng)析(xi)填(tian)料(liao)蛋白(bai)純(chun)化 脫(tuo)鹽柱 裝有8.3 ml Smartdex G-25中(zhong)。

Prepacked Desalting Column 葡(pu)聚(ju)糖凝膠(jiao)過(guo)濾層(ceng)析(xi)填(tian)料(liao)蛋白(bai)純(chun)化脫(tuo)鹽柱簡介

Prepacked Desalting Column適(shi)用於(yu)分子(zi)量大於(yu)5000Da的(de)蛋白(bai)或(huo)其他(ta)大分子(zi)樣品(pin)的(de)脫(tuo)鹽、緩沖液置換(huan)或(huo)小分子(zi)的去除(chu)。

Prepacked Desalting Column 葡(pu)聚(ju)糖凝膠(jiao)過(guo)濾層(ceng)析(xi)填(tian)料(liao)蛋白(bai)純(chun)化脫(tuo)鹽柱裝有8.3 ml Smartdex G-25中(zhong)。Smartdex G-25系列介質(zhi)是(shi)以(yi)葡聚(ju)糖為基(ji)質(zhi)的(de)凝膠過(guo)濾層(ceng)析(xi)介質(zhi)，其工作(zuo)原(yuan)理主要是(shi)利(li)用具(ju)有網狀(zhuang)結(jie)構的葡(pu)聚(ju)糖凝膠(jiao)的(de)分子(zi)篩(shai)作用(yong)，根據(ju)被(bei)分離(li)物質(zhi)的分子(zi)大小(xiao)不(bu)同(tong)來(lai)進(jin) 行分離(li)。

表(biao) 1. Prepacked Desalting Column 產(chan)品(pin)性(xing)能(neng)

2. 使(shi)用說(shuo)明

2.1緩沖液的準(zhun)備

所用(yong)水和緩沖液在使(shi)用之前建議(yi)用0.22 pm或(huo)0.45 pm濾膜(mo)過(guo)濾。 平(ping)衡液為蛋白(bai)脫(tuo)鹽後，用(yong)於(yu)保(bao)護(hu)蛋白(bai)的(de)溶液(ye)，根據(ju)客(ke)戶(hu)需(xu)求自(zi)行選擇。

2.2樣品(pin)準(zhun)備

樣品(pin)在(zai)上(shang)樣(yang)前建議(yi)離(li)心或(huo)用0.22 pm或(huo)0.45|jiti濾膜(mo)過(guo)濾，減少(shao)雜(za)質，防(fang)止堵塞柱子(zi)。

2.3樣品(pin)脫(tuo)鹽

圖1.使(shi)用Prepacked Desalting Column脫(tuo)鹽流程(cheng)示意(yi)圖(tu)

1） 脫(tuo)鹽柱準(zhun)備

將Prepacked Desalting Column垂直置於(yu)重力(li)柱支架上(shang)，或(huo)用鐵架臺(tai)固定(ding)，先後(hou)打開(kai)上(shang)蓋、下蓋，依(yi)靠(kao)重力(li)流(liu)幹保(bao)護(hu)液(ye)。

2） 平(ping)衡

加入4 ml平衡液（自(zi)主選擇合(he)適(shi)溶(rong)液(ye)）對(dui)預裝介質(zhi)進行平衡，重復5次，最(zui)終(zhong)使(shi)用平(ping)衡液體(ti)積(ji)約3倍介質(zhi)體(ti)積(ji)。

3） 上(shang)樣(yang)

加入樣品(pin)，樣(yang)品(pin)上(shang)樣(yang)體(ti)積(ji)範圍(wei)1.0-2.5 ml,最(zui)大不(bu)超(chao)過(guo)2.5 ml,上(shang)樣(yang)體(ti)積(ji)不(bu)足(zu)時(shi)用(yong)平(ping)衡液稀(xi)釋(shi)樣品(pin)至1.0 mlo

4） 洗(xi)脫(tuo)

待(dai)樣(yang)品(pin)進(jin)入填料(liao)後(hou)，繼(ji)續(xu)加入平衡液進(jin)行洗脫(tuo)，分管收(shou)集洗脫(tuo)液，從加入樣品(pin)開(kai)始(shi)，先收(shou)集前端2.0 ml,然後再(zai)按照固(gu)定(ding)體(ti)積(ji)（建議(yi)0.5-1 ml/管）收(shou)集樣品(pin)，檢(jian)測(ce)每(mei)管蛋白(bai)濃(nong)度和(he)鹽濃(nong)度，計算回(hui)收(shou)率(lv)和(he)脫(tuo)鹽效(xiao)率(lv)。平(ping)衡液至少(shao)添(tian)加至蛋白(bai)洗(xi)脫(tuo)*再停止。

5） 再平衡

加入4 ml平衡液對(dui)介質(zhi)進行再平衡，重復至少(shao)5次(ci)，將殘(can)留(liu)的鹽沖洗幹凈(jing)，方可進(jin)行下壹次脫(tuo)鹽。同壹(yi)個(ge)柱子(zi)不(bu)建議(yi)用於(yu)不(bu)同(tong)樣(yang)品(pin)的(de)脫(tuo)鹽。

3. 清(qing)洗及(ji)保(bao)存(cun)

如果(guo)柱子(zi)的流速或(huo)者脫(tuo)鹽效(xiao)果(guo)變(bian)差，為除去殘(can)留(liu)的雜(za)質，如(ru)變性蛋白(bai)或(huo)脂質(zhi)等，有時(shi)需(xu)要對(dui)脫(tuo)鹽柱進行在位清(qing)洗。常(chang)用的清(qing)洗液(ye)為0.1-0.2 M NaOH或(huo)非(fei)離(li)子(zi)型(xing)去垢劑(ji)。

1） 加入壹倍的柱體(ti)積(ji)0.1-0.2 M NaOH,依(yi)靠(kao)重力(li)清(qing)洗介質(zhi)。

2） 加入足夠(gou)量的去離(li)子(zi)水，沖洗介質(zhi)，直至pH值至中(zhong)性。

3） 加入至少(shao)三(san)倍柱體(ti)積(ji)20%乙醇(chun)溶液(ye)沖洗介質(zhi)，然後蓋好上(shang)蓋和下塞，在(zai)介質(zhi)上(shang)端(duan)保(bao)留(liu)至少(shao)1cm高(gao)的20%乙(yi)醇(chun)保(bao)護(hu)液(ye)，置(zhi)於(yu)2-8°C保(bao)存(cun)。 註：不(bu)建議(yi)介質(zhi)多次重復再生(sheng)和(he)使(shi)用。

4 .Prepacked Desalting Column 葡(pu)聚(ju)糖凝膠(jiao)過(guo)濾層(ceng)析(xi)填(tian)料(liao)蛋白(bai)純(chun)化脫(tuo)鹽柱 訂購(gou)信息(xi)

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