病(bing)毒實(shi)驗(yan)原理和慢病毒包裝(zhuang)系(xi)統(tong)介紹(shao)

  慢病毒是(shi)壹(yi)種(zhong)有(you)包膜(mo)的RNA病(bing)毒，直(zhi)徑(jing)為80-120nm，呈(cheng)二(er)十(shi)面(mian)體對稱(cheng)結構(gou)、球(qiu)形。病(bing)毒顆粒最外(wai)層(ceng)是(shi)包(bao)膜(mo)(包膜(mo)蛋白決定了(le)感染細胞的類(lei)型)，再往裏依次為(wei)基(ji)質(zhi)蛋白和衣(yi)殼，最裏面(mian)是(shi)兩(liang)條(tiao)相(xiang)同的(de)正股(gu)RNA鏈(lian)和酶(逆轉錄(lu)酶、整合酶和蛋白酶)。
 
慢病毒實(shi)驗(yan)原理
慢病毒（Lentivirus）是(shi)逆轉錄(lu)病(bing)毒(du)的(de)壹(yi)種(zhong)，基(ji)因(yin)組為(wei)雙(shuang)鏈RNA。但區別於壹(yi)般(ban)的逆轉錄(lu)病(bing)毒(du)，慢病毒具(ju)有(you)更廣(guang)的宿(xiu)主範圍(wei)，對分裂細胞和非(fei)分(fen)裂細胞均具(ju)有(you)感染能力。
重(zhong)組慢病毒載體(ti)是(shi)以(yi)HIV-1（人類(lei)免(mian)疫(yi)缺陷I 型病毒(du)）為基(ji)礎(chu)發展起來(lai)的工(gong)具(ju)載體(ti)，其毒(du)性基(ji)因(yin)已(yi)經(jing)被(bei)剔(ti)除(chu)並(bing)被(bei)外(wai)源目的(de)基(ji)因(yin)所取(qu)代(dai)，屬於(yu)假(jia)型病毒(du)。（壹(yi)次(ci)性感染能力而(er)無復制(zhi)產生新病毒(du)能力）
 
將(jiang)靶基(ji)因(yin)隨(sui)機(ji)整(zheng)合到(dao)宿主(zhu)的(de)基(ji)因(yin)組中(zhong)，並(bing)且能夠在(zai)細胞系中(zhong)穩(wen)定表達(da)若幹代(dai)，可(ke)以(yi)進(jin)行(xing)穩轉細胞株的篩(shai)選。被廣(guang)泛(fan)應(ying)用於各(ge)種(zhong)細(xi)胞系基(ji)因(yin)敲(qiao)除、基(ji)因(yin)過表達(da)、RNA幹擾(rao)。
 
 
包(bao)裝(zhuang)系(xi)統
慢病毒載體(ti)包(bao)含了(le)包(bao)裝、轉染、穩定整(zheng)合所需要(yao)的遺(yi)傳(chuan)信息。
慢病毒包裝(zhuang)質(zhi)粒(li)可(ke)提供(gong)轉錄(lu)並(bing)包(bao)裝(zhuang)RNA到(dao)重組的(de)假(jia)病(bing)毒載體所需要(yao)的輔助(zhu)蛋白。
1. 外(wai)殼糖(tang)蛋(dan)白 識別並(bing)感染宿主細胞
2. 結構(gou)蛋白(bai) 病毒(du)復制(zhi)所需要(yao)的酶
慢病毒特點(dian)
1. 慢病毒有(you)廣泛(fan)的(de)宿(xiu)主(zhu)範圍(wei)，能夠有(you)效地(di)感染分裂細胞、非分(fen)裂細胞，特別適(shi)合於(yu)壹(yi)些(xie)難(nan)轉染的細胞（如原代(dai)細胞、幹細胞、不(bu)分化的細胞）和對腺病(bing)毒(du)感染具(ju)有(you)較強(qiang)免疫(yi)反(fan)應的(de)細(xi)胞（如樹突(tu)狀細胞、單核(he)細(xi)胞和間(jian)充質(zhi)幹細胞）等，能大大提高(gao)目的(de)基(ji)因(yin)轉導(dao)效率，而且目的(de)基(ji)因(yin)整(zheng)合到(dao)宿主(zhu)細(xi)胞基(ji)因(yin)組的(de)幾(ji)率大大增(zeng)加(jia)。
 
2. 慢病毒能將外(wai)源基(ji)因(yin)有(you)效地(di)整合入(ru)宿(xiu)主染色體(ti)上(shang)，介導(dao)目的(de)基(ji)因(yin)穩(wen)定、長(chang)期的表達(da)。因(yin)此，可(ke)以(yi)利用慢病毒建(jian)立穩定細(xi)胞株。
 
3. 適(shi)用範圍(wei)更(geng)廣，不(bu)僅能用於體外(wai)實(shi)驗(yan)，還能用於活體動物(wu)模型，尤其(qi)是(shi)動物(wu)成(cheng)瘤(liu)實(shi)驗(yan)。


 
慢病毒包裝(zhuang)系(xi)統(tong)采(cai)用的包裝系(xi)統(tong)是(shi)2代(dai)包裝(zhuang)系(xi)統(tong)，即三質(zhi)粒系(xi)統(tong)，該(gai)系(xi)統包括1個包(bao)裝質粒(psPAX2)、1 個包(bao)膜質粒(pMD2G)、1個目的(de)基(ji)因(yin)質(zhi)粒(li)和(he)1株包裝(zhuang)細(xi)胞(293T cell)。
 
蘇州阿(e)爾法生物(wu)提供(gong)細胞培養(yang)試(shi)劑(ji)、細(xi)胞培養(yang)設(she)備(bei)、細(xi)胞培養(yang)耗材、細胞株、基(ji)因(yin)編輯(ji)細(xi)胞株、所提供(gong)的CRISPR-Cas9表達(da)病毒(du)具(ju)有(you)以(yi)下(xia)特(te)點(dian)：
1、病毒(du)產(chan)品(pin)現(xian)貨(huo)提供(gong)；
2、可(ke)以(yi)滿(man)足不(bu)同細(xi)胞的穩(wen)轉的需(xu)求；
3、攜(xie)帶抗(kang)性用於穩轉構建(jian)；
4、表達(da)穩定適(shi)合用於基(ji)因(yin)敲(qiao)除；
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慢病毒是(shi)壹(yi)種(zhong)有(you)包膜(mo)的RNA病(bing)毒，直(zhi)徑(jing)為80-120nm，呈(cheng)二(er)十(shi)面(mian)體對稱(cheng)結構(gou)、球(qiu)形。病(bing)毒顆粒最外(wai)層(ceng)是(shi)包(bao)膜(mo)(包膜(mo)蛋白決定了(le)感染細胞的類(lei)型)，再往裏依次為(wei)基(ji)質(zhi)蛋白和衣(yi)殼，最裏面(mian)是(shi)兩(liang)條(tiao)相(xiang)同的(de)正股(gu)RNA鏈(lian)和酶(逆轉錄(lu)酶、整合酶和蛋白酶)。
 
 
慢病毒實(shi)驗(yan)原理
慢病毒（Lentivirus）是(shi)逆轉錄(lu)病(bing)毒(du)的(de)壹(yi)種(zhong)，基(ji)因(yin)組為(wei)雙(shuang)鏈RNA。但區別於壹(yi)般(ban)的逆轉錄(lu)病(bing)毒(du)，慢病毒具(ju)有(you)更廣(guang)的宿(xiu)主範圍(wei)，對分裂細胞和非(fei)分(fen)裂細胞均具(ju)有(you)感染能力。
重(zhong)組慢病毒載體(ti)是(shi)以(yi)HIV-1（人類(lei)免(mian)疫(yi)缺陷I 型病毒(du)）為基(ji)礎(chu)發展起來(lai)的工(gong)具(ju)載體(ti)，其毒(du)性基(ji)因(yin)已(yi)經(jing)被(bei)剔(ti)除(chu)並(bing)被(bei)外(wai)源目的(de)基(ji)因(yin)所取(qu)代(dai)，屬於(yu)假(jia)型病毒(du)。（壹(yi)次(ci)性感染能力而(er)無復制(zhi)產生新病毒(du)能力）
 
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包(bao)裝(zhuang)系(xi)統
慢病毒載體(ti)包(bao)含了(le)包(bao)裝、轉染、穩定整(zheng)合所需要(yao)的遺(yi)傳(chuan)信息。
慢病毒包裝(zhuang)質(zhi)粒(li)可(ke)提供(gong)轉錄(lu)並(bing)包(bao)裝(zhuang)RNA到(dao)重組的(de)假(jia)病(bing)毒載體所需要(yao)的輔助(zhu)蛋白。
1. 外(wai)殼糖(tang)蛋(dan)白 識別並(bing)感染宿主細胞
2. 結構(gou)蛋白(bai) 病毒(du)復制(zhi)所需要(yao)的酶
慢病毒特點(dian)
1. 慢病毒有(you)廣泛(fan)的(de)宿(xiu)主(zhu)範圍(wei)，能夠有(you)效地(di)感染分裂細胞、非分(fen)裂細胞，特別適(shi)合於(yu)壹(yi)些(xie)難(nan)轉染的細胞（如原代(dai)細胞、幹細胞、不(bu)分化的細胞）和對腺病(bing)毒(du)感染具(ju)有(you)較強(qiang)免疫(yi)反(fan)應的(de)細(xi)胞（如樹突(tu)狀細胞、單核(he)細(xi)胞和間(jian)充質(zhi)幹細胞）等，能大大提高(gao)目的(de)基(ji)因(yin)轉導(dao)效率，而且目的(de)基(ji)因(yin)整(zheng)合到(dao)宿主(zhu)細(xi)胞基(ji)因(yin)組的(de)幾(ji)率大大增(zeng)加(jia)。
 
2. 慢病毒能將外(wai)源基(ji)因(yin)有(you)效地(di)整合入(ru)宿(xiu)主染色體(ti)上(shang)，介導(dao)目的(de)基(ji)因(yin)穩(wen)定、長(chang)期的表達(da)。因(yin)此，可(ke)以(yi)利用慢病毒建(jian)立穩定細(xi)胞株。
 
3. 適(shi)用範圍(wei)更(geng)廣，不(bu)僅能用於體外(wai)實(shi)驗(yan)，還能用於活體動物(wu)模型，尤其(qi)是(shi)動物(wu)成(cheng)瘤(liu)實(shi)驗(yan)。


 
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1、病毒(du)產(chan)品(pin)現(xian)貨(huo)提供(gong)；
2、可(ke)以(yi)滿(man)足不(bu)同細(xi)胞的穩(wen)轉的需(xu)求；
3、攜(xie)帶抗(kang)性用於穩轉構建(jian)；

4、表達(da)穩定適(shi)合用於基(ji)因(yin)敲(qiao)除；

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