大腸(chang)桿(gan)菌(jun)分(fen)離(li)用什麽(me)培(pei)養(yang)基(ji)

培(pei)養(yang)基(ji)作為(wei)細胞(bao)的(de)“食物"，是細胞(bao)培(pei)養(yang)和(he)發酵的(de)基(ji)礎(chu)，大腸(chang)桿(gan)菌(jun)在不同(tong)的培(pei)養(yang)基(ji)中(zhong)培(pei)養(yang)可能(neng)會表(biao)現(xian)出不同(tong)的性(xing)狀(zhuang)，而利(li)用這些性(xing)狀(zhuang)的(de)不同(tong)，可將部分(fen)菌(jun)種進(jin)行(xing)區(qu)分(fen)或分(fen)離(li)，此外(wai)，根(gen)據目標(biao)菌(jun)種選擇(ze)合(he)適(shi)的(de)培(pei)養(yang)基(ji)可以低成本(ben)、穩定(ding)的高(gao)表(biao)達(da)。

大腸(chang)桿(gan)菌(jun)分(fen)離(li)培(pei)養(yang)基(ji)常見的主要(yao)有(you)以下幾(ji)種：

大腸(chang)桿(gan)菌(jun)分(fen)離(li)培(pei)養(yang)基(ji)：主要(yao)根(gen)據不同(tong)的大腸(chang)桿(gan)菌(jun)在培(pei)養(yang)基(ji)中(zhong)的(de)生(sheng)產(chan)速(su)度(du)，代謝產(chan)物，對培(pei)養(yang)基(ji)中(zhong)特(te)定(ding)組分(fen)的(de)需(xu)求(qiu)利(li)用情況不同(tong)等(deng)實(shi)現對不同(tong)種類(lei)的(de)菌(jun)種進(jin)行(xing)分(fen)離(li)或篩選。

LB固(gu)體培(pei)養(yang)基(ji)：是壹(yi)種主(zhu)要(yao)組(zu)分(fen)為(wei)酵母提取物、胰化(hua)蛋(dan)白腖(dong)、NaCl瓊(qiong)脂的非選擇(ze)性(xing)固(gu)體培(pei)養(yang)基(ji)，通常(chang)用於細菌(jun)的培(pei)養(yang)。LB中(zhong)加(jia)入(ru)的瓊(qiong)脂使(shi)培(pei)養(yang)基(ji)形成固(gu)體凝膠(jiao)狀(zhuang)態，細菌(jun)在其(qi)表(biao)面(mian)生(sheng)長(chang)。向LB固(gu)體凝膠(jiao)中(zhong)添加(jia)特定(ding)的抗(kang)生素(su)（如氨芐青黴(mei)素(su)、卡(ka)那黴(mei)素(su)等(deng)），可以選擇(ze)性(xing)培(pei)養(yang)對(dui)該抗(kang)生(sheng)素(su)耐(nai)受的菌(jun)株並將非耐(nai)受的菌(jun)株去除(chu)，菌(jun)體對(dui)抗(kang)生素(su)耐(nai)受的原因(yin)是由菌(jun)體質(zhi)粒(li)中(zhong)含有(you)抗生素(su)抗藥基(ji)因(yin)所賦予的(de)。如(ru)：在制(zhi)備(bei)大腸(chang)桿(gan)菌(jun)DH5α感(gan)受態細胞(bao)的(de)過(guo)程(cheng)中(zhong)，添加(jia)氨芐青黴(mei)素(su)的LB培(pei)養(yang)基(ji)可作為(wei)篩選含氨(an)芐青黴(mei)素(su)基(ji)因(yin)質(zhi)粒(li)的大腸(chang)桿(gan)菌(jun)。

伊(yi)紅(hong)美藍固(gu)體培(pei)養(yang)基(ji)（EMB）：是壹(yi)種主(zhu)要(yao)組(zu)分(fen)為(wei)蛋(dan)白腖(dong)，乳糖(tang)。磷(lin)酸氫(qing)二鈉(na)鈉(na)，瓊(qiong)脂伊(yi)紅(hong)，美蘭(lan)的用於大腸(chang)桿(gan)菌(jun)和產(chan)氣(qi)腸(chang)桿(gan)菌(jun)的分(fen)離(li)和鑒(jian)別的(de)培(pei)養(yang)基(ji)，也(ye)適用於大腸(chang)菌(jun)群的分(fen)離(li)培(pei)養(yang)，為(wei)弱(ruo)選擇(ze)性(xing)培(pei)養(yang)基(ji)。各成分(fen)的(de)作用為：蛋(dan)白腖(dong)提供(gong)碳(tan)源(yuan)和氮源(yuan)；乳糖提供(gong)碳(tan)源(yuan)；磷(lin)酸氫(qing)二鉀是緩(huan)沖(chong)劑；瓊(qiong)脂是凝固(gu)劑；伊(yi)紅(hong)（Eosin Y）為(wei)酸(suan)性(xing)染料(liao)：美蘭(lan)（eosin-methylene blue）為堿性染(ran)料(liao)，二者(zhe)在(zai)培(pei)養(yang)基(ji)中(zhong)作為(wei)指示劑。當大腸(chang)桿(gan)菌(jun)分(fen)解乳(ru)糖產(chan)酸(suan)時，細菌(jun)帶(dai)正(zheng)電(dian)，被伊(yi)紅(hong)染(ran)上(shang)紅(hong)色(se)，再與美蘭(lan)結合(he)而形成紫黑(hei)色(se)菌(jun)落，帶(dai)有(you)金(jin)屬光澤；若(ruo)是(shi)產(chan)氣(qi)腸(chang)桿(gan)菌(jun)形成棕(zong)色(se)菌(jun)落，並很(hen)少(shao)有(you)金(jin)屬光澤；若(ruo)是(shi)不能(neng)分(fen)解乳(ru)糖的細菌(jun)，如沙門氏(shi)菌(jun)和誌賀(he)氏(shi)菌(jun)，則(ze)形(xing)成無(wu)色(se)或琥(hu)珀(po)色(se)半(ban)透明(ming)菌(jun)落；白色(se)念(nian)珠(zhu)菌(jun)形成蛛(zhu)絲狀或羽毛狀(zhuang)菌(jun)落，凝固(gu)酶陽(yang)性葡萄球(qiu)菌(jun)形成無(wu)色(se)針(zhen)尖大小的菌(jun)落。

麥康(kang)凱(kai)固(gu)體培(pei)養(yang)基(ji)（MAC）：是壹(yi)種主(zhu)要(yao)用來檢(jian)驗分(fen)離(li)腸(chang)道菌(jun)的培(pei)養(yang)基(ji)，在藥典中(zhong)規定(ding)可以用於大腸(chang)桿(gan)菌(jun)的檢測(ce)，在(zai)食品標(biao)準中(zhong)可用於腸(chang)道致(zhi)病菌(jun)的分(fen)離(li)。培(pei)養(yang)基(ji)中(zhong)膽(dan)鹽(yan)及(ji)結(jie)晶(jing)紫對(dui)大多數革蘭(lan)氏陽(yang)性菌(jun)有很(hen)強(qiang)的(de)抑(yi)制(zhi)作用，大腸(chang)桿(gan)菌(jun)因(yin)為可以發酵乳(ru)糖(tang)產(chan)酸(suan)，在(zai)培(pei)養(yang)基(ji)上菌(jun)落呈(cheng)現為(wei)桃紅(hong)色(se)，並且菌(jun)落周圍通常有明顯(xian)的(de)沈(chen)澱環，大腸(chang)菌(jun)群同樣(yang)能(neng)發酵乳(ru)糖(tang)產(chan)酸(suan)，菌(jun)落也(ye)呈(cheng)桃紅(hong)色(se)。致(zhi)病性(xing)的(de)腸(chang)道菌(jun)（如誌賀(he)氏(shi)菌(jun)、沙門氏菌(jun)、變形桿(gan)菌(jun)等(deng)）因(yin)不發酵乳(ru)糖(tang)，菌(jun)落呈(cheng)無(wu)色(se)。此培(pei)養(yang)基(ji)由於(yu)對大腸(chang)桿(gan)菌(jun)的專(zhuan)壹(yi)性(xing)較弱(ruo)（大腸(chang)菌(jun)群和大腸(chang)桿(gan)菌(jun)的菌(jun)落特征比(bi)較接近(jin)），若(ruo)樣(yang)品中(zhong)大腸(chang)菌(jun)群的含量(liang)比(bi)較高，分(fen)離(li)大腸(chang)桿(gan)菌(jun)的效果較差。

大腸(chang)桿(gan)菌(jun)顯色(se)固(gu)體培(pei)養(yang)基(ji)（TBX）：利(li)用酶底物法(fa)原(yuan)理(li)，對於(yu)大腸(chang)桿(gan)菌(jun)的分(fen)離(li)和計(ji)數(shu)有(you)高度的(de)特異(yi)性，大腸(chang)桿(gan)菌(jun)*的β-葡萄糖醛(quan)酸苷(gan)酶(mei)可分(fen)解培(pei)養(yang)基(ji)中(zhong)的(de)底物，使(shi)菌(jun)落呈(cheng)藍綠色(se)，而大腸(chang)菌(jun)群和其(qi)他(ta)大多數雜菌(jun)通常呈(cheng)無(wu)色(se)或其(qi)他(ta)顏(yan)色(se)，革蘭(lan)氏陽(yang)性菌(jun)大多數不生(sheng)長。在(zai)幹(gan)擾菌(jun)較多的(de)情(qing)況(kuang)下(xia)，顯(xian)色(se)培(pei)養(yang)基(ji)的分(fen)離(li)率遠(yuan)高(gao)於(yu)其(qi)它(ta)培(pei)養(yang)基(ji)。但是(shi)該培(pei)養(yang)基(ji)價(jia)格(ge)較高，有(you)極(ji)少(shao)數(shu)大腸(chang)桿(gan)菌(jun)不產(chan)生(sheng)β-葡(pu)萄糖醛(quan)酸苷(gan)酶(mei)（如腸(chang)出血(xue)性大腸(chang)埃希(xi)氏(shi)菌(jun)O157菌(jun)），因(yin)此不能(neng)顯色(se)。此培(pei)養(yang)基(ji)適用於食品、水(shui)、環境(jing)等(deng)檢測(ce)。

哥倫比(bi)亞MUG固(gu)體培(pei)養(yang)基(ji)：利(li)用大腸(chang)桿(gan)菌(jun)可利(li)用β-葡萄糖醛(quan)酸苷(gan)酶(mei)特異(yi)性分(fen)解MUG，在(zai)紫外(wai)燈(deng)照射下發出熒(ying)光(guang)，該培(pei)養(yang)基(ji)特異(yi)性較強(qiang)，極(ji)少(shao)數(shu)不產(chan)生(sheng)β-葡(pu)萄糖醛(quan)酸苷(gan)酶(mei)的大腸(chang)桿(gan)菌(jun)不能(neng)發出熒(ying)光(guang)。此培(pei)養(yang)基(ji)沒有選擇(ze)性(xing)，多(duo)數(shu)雜菌(jun)均能(neng)生長，通常用於含菌(jun)量較少(shao)的(de)水(shui)中(zhong)的(de)大腸(chang)桿(gan)菌(jun)計數。

VRBA-MUG固(gu)體培(pei)養(yang)基(ji)：在VRBA基(ji)礎(chu)上添加(jia)了MUG，相(xiang)比(bi)較於哥倫比(bi)亞MUG固(gu)體培(pei)養(yang)基(ji)，該培(pei)養(yang)基(ji)具有(you)選擇(ze)性(xing)，能(neng)夠抑(yi)制(zhi)革(ge)蘭(lan)氏陽(yang)性菌(jun)的生長，大腸(chang)桿(gan)菌(jun)和大腸(chang)菌(jun)群可在(zai)此培(pei)養(yang)基(ji)中(zhong)生(sheng)長(chang)呈(cheng)紫紅(hong)色(se)菌(jun)落，周圍有沈澱環，因(yin)為添加(jia)了MUG，在(zai)紫外(wai)燈(deng)下(xia)照射時，大腸(chang)桿(gan)菌(jun)菌(jun)落可發出熒(ying)光(guang)，而大腸(chang)菌(jun)群則(ze)沒有熒(ying)光(guang)。此培(pei)養(yang)基(ji)壹般用於食品中(zhong)大腸(chang)桿(gan)菌(jun)的檢驗和(he)計數(shu)。
   

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