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更新(xin)時間(jian):2023-03-08
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發酵工(gong)程(cheng)培(pei)養基(ji)主(zhu)要使(shi)用發(fa)酵培(pei)養基(ji):
發(fa)酵(jiao)培(pei)養基(ji)是(shi)指(zhi)為了在(zai)生(sheng)產(chan)中(zhong)更加利(li)於菌種代(dai)謝(xie)產(chan)物(wu)的(de)生成而(er)設(she)計(ji)的培(pei)養基(ji),這類培(pei)養基(ji)常見的主(zhu)要有(you)以(yi)下幾(ji)種:
SOB(Super Optimal Broth)培(pei)養基(ji):是(shi)壹(yi)種富(fu)營(ying)養培(pei)養基(ji),其(qi)配方為:2% 胰蛋(dan)白腖(dong),0.5% 酵(jiao)母(mu)提取物(wu),10mM NaCl,2.5mM KCl,10mM MgCl2,10mM MgSO4。與LB培(pei)養基(ji)相(xiang)比(bi),SOB培(pei)養基(ji)中(zhong)含(han)有兩倍(bei)多的(de)蛋(dan)白腖(dong),富(fu)含(han)更多(duo)的(de)氨基(ji)酸(suan)及多(duo)肽。此外,SOB培(pei)養基(ji)中(zhong)含(han)有鎂(mei)離(li)子,鎂(mei)離(li)子是(shi)高(gao)密(mi)度培(pei)養必須的(de)離(li)子。利(li)用(yong)SOB培(pei)養基(ji)培(pei)養大(da)腸桿菌在(zai)普通條件(250rpm)下(xia)搖(yao)瓶培(pei)養,菌濃(nong)可達(da)到(dao)OD600 3-5左(zuo)右,如(ru)果(guo)提高(gao)轉(zhuan)速(su)到(dao)350rpm,OD600最(zui)高(gao)能夠(gou)達(da)到(dao)10-15。此外,大腸桿菌在(zai)SOB培(pei)養基(ji)中(zhong)具(ju)有更高(gao)的轉(zhuan)化效率,因(yin)此SOB培(pei)養基(ji)常被用(yong)來制(zhi)備(bei)感受(shou)態(tai)細(xi)胞。
SOC(Super Optimal broth with Catabolite repression)培(pei)養基(ji):在(zai)SOB的(de)基(ji)礎(chu)上添(tian)加終(zhong)濃(nong)度20Mm的葡(pu)萄糖即(ji)為SOC培(pei)養基(ji),其(qi)配方為:2% 胰蛋(dan)白腖(dong),0.5% 酵(jiao)母(mu)提取物(wu),10mM NaCl,2.5mM KCl,10mM MgCl2,10mM MgSO4,20mM葡(pu)萄糖。培(pei)養基(ji)中(zhong)的(de)葡(pu)萄糖充(chong)當(dang)分(fen)解代(dai)謝(xie)抑(yi)制(zhi)物(wu)。壹(yi)般來說,大(da)腸桿菌傾向於以(yi)葡(pu)萄糖作為碳源(yuan),培(pei)養基(ji)中(zhong)由(you)於葡(pu)萄糖的(de)存(cun)在(zai),其(qi)它(ta)碳源(yuan)的分(fen)解就會(hui)被(bei)抑(yi)制(zhi)。由於葡(pu)萄糖的(de)存(cun)在(zai),乳(ru)糖不(bu)會(hui)被(bei)代(dai)謝(xie),乳(ru)糖操(cao)縱子(zi)被(bei)抑(yi)制(zhi),外源(yuan)基(ji)因(yin)不(bu)會(hui)發(fa)生表(biao)達(da),減少(shao)了(le)外源(yuan)基(ji)因(yin)表(biao)達(da)給(gei)細(xi)胞生(sheng)長(chang)帶來的壓(ya)力。因(yin)此,利(li)用(yong)SOC培(pei)養基(ji)進行轉(zhuan)化反應時,熱(re)激(ji)後(hou)細胞生(sheng)長(chang)的速率會(hui)比(bi)LB培(pei)養基(ji)中(zhong)高(gao)出(chu)很多。
2x YT (Yeast extract and Tryptone)培(pei)養基(ji):是(shi)壹(yi)種比(bi)LB培(pei)養基(ji)營(ying)養更為豐富(fu)的培(pei)養基(ji),配方為:1.6% 胰蛋(dan)白腖(dong),1% 酵(jiao)母(mu)提取物(wu),0.5% NaCl。與LB培(pei)養基(ji)成(cheng)分(fen)相(xiang)比(bi),2x YT培(pei)養基(ji)中(zhong)包(bao)含(han)有更多(duo)的(de)的酵母(mu)提取物(wu)和(he)胰蛋(dan)白腖(dong),營(ying)養更加豐(feng)富,細胞可(ke)以(yi)生長(chang)更長(chang)的時間(jian),菌體(ti)濃(nong)度更高(gao)。2x YT培(pei)養基(ji)主(zhu)要用(yong)來進行大腸桿菌以(yi)及像(xiang)是(shi)M13這樣(yang)的細菌噬(shi)菌體(ti)的(de)培(pei)養。
TB(Terrific Broth)培(pei)養基(ji):是(shi)壹(yi)種添(tian)加了(le)磷酸(suan)鹽的復(fu)合型(xing)培(pei)養基(ji),配方如(ru)下(xia):2 % 胰蛋(dan)白腖(dong),2.4%酵(jiao)母(mu)提取物(wu),72mM K2HPO4,17mM KH2PO4,0.4% glycerol。與LB培(pei)養基(ji)相(xiang)比(bi),TB培(pei)養基(ji)中(zhong)除(chu)了多出(chu)20%的(de)胰蛋(dan)白腖(dong)和(he)380 %的(de)酵(jiao)母(mu)提取物(wu)以(yi)外,還(hai)多了 0.4%的甘(gan)油(you)作為額(e)外(wai)的碳(tan)源(yuan)。這些(xie)元素能夠(gou)支(zhi)持(chi)大(da)腸桿菌在(zai)正常的搖(yao)瓶培(pei)養條件下(xia)達(da)到(dao)更高(gao)的菌體(ti)密(mi)度,其(qi)OD600可(ke)達(da)5–8。該培(pei)養基(ji)通(tong)常用於蛋(dan)白質表(biao)達(da)和(he)質粒提(ti)取。
SB (Super Broth)培(pei)養基(ji):其(qi)配方為:3.2% 胰蛋(dan)白腖(dong),2% 酵(jiao)母(mu)提取物(wu),0.5% NaCl。與LB培(pei)養基(ji)相(xiang)比(bi),SB培(pei)養基(ji)成(cheng)分(fen)中(zhong)多(duo)出(chu)了(le)220%的(de)胰蛋(dan)白腖(dong)和(he)380%的(de)酵(jiao)母(mu)提取物(wu)。該(gai)培(pei)養基(ji)的(de)蛋(dan)白腖(dong)和(he)酵(jiao)母(mu)提取物(wu)中(zhong)包(bao)含(han)的主(zhu)要營(ying)養元素遠(yuan)遠(yuan)超(chao)過細胞生(sheng)長(chang)達(da)到(dao)飽(bao)和(he)時所(suo)需的(de)量。該(gai)培(pei)養基(ji)主(zhu)要用(yong)於質粒以(yi)及蛋(dan)白質的(de)提(ti)取。
M9培(pei)養培(pei)養基(ji):低(di)鹽(yan)(M9)培(pei)養基(ji)含(han)有必需(xu)鹽和(he)氮(dan),傳(chuan)統(tong)上由葡(pu)萄糖、氨基(ji)酸(suan)和(he)維(wei)生(sheng)素(su)作為補(bu)充(chong)物(wu)。M9培(pei)養基(ji)適(shi)用(yong)於大腸桿菌菌株(zhu)的(de)非選(xuan)擇性(xing)培(pei)養,用(yong)於克隆(long)、生(sheng)產DNA、質粒DNA和(he)重(zhong)組(zu)蛋(dan)白。如(ru)果(guo)添(tian)加適(shi)當(dang)的(de)抗(kang)生(sheng)素,它也適(shi)用(yong)於選擇(ze)性(xing)培(pei)養帶有抗(kang)生(sheng)素抗(kang)性(xing)的(de)菌株(zhu)。
GYT培(pei)養基(ji):是(shi)壹(yi)種可(ke)以(yi)用於各種細(xi)菌培(pei)養的(de)培(pei)養基(ji),是(shi)分(fen)子(zi)生(sheng)物(wu)學常規(gui)試(shi)劑(ji),主(zhu)要由(you)胰蛋(dan)白陳(chen)、酵母(mu)提取物(wu)、甘(gan)油(you)等(deng)組(zu)成(cheng)。
MBL培(pei)養基(ji):是(shi)壹(yi)種以(yi)葡(pu)萄糖、蛋(dan)白腖(dong)、酵(jiao)母(mu)粉、KH2PO4、KHPO4、(NH4)2HPO4、MgSO4為主(zhu)要成(cheng)分(fen)的(de)發(fa)酵(jiao)培(pei)養基(ji)。
更多(duo)關(guan)於細胞培(pei)養基(ji)、細(xi)菌培(pei)養基(ji)、微生物(wu)培(pei)養基(ji)、培(pei)養基(ji)購買(mai)可(ke)以(yi)進入(ru)蘇州阿爾法生(sheng)物(wu)實(shi)驗(yan)器材(cai)有(you)限公司(si)進行了解。
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