克(ke)隆(long)抗體(ti)的(de)特(te)點和應用

    單(dan)克(ke)隆(long)抗體(ti)是由單(dan)壹(yi)B細胞(bao)克(ke)隆(long)產(chan)生的(de)高(gao)度(du)均(jun)壹(yi)、僅(jin)針(zhen)對(dui)某(mou)壹(yi)特(te)定(ding)抗原表(biao)位的(de)抗體(ti)。通常采用雜交(jiao)瘤(liu)技(ji)術來(lai)制備，雜交(jiao)瘤(liu)（hybridoma）抗體(ti)技(ji)術是在細胞(bao)融合(he)技(ji)術的(de)基(ji)礎上，將(jiang)具有分(fen)泌(mi)特(te)異性(xing)抗體(ti)能(neng)力(li)的(de)致(zhi)敏(min)B細胞(bao)和具有無(wu)限(xian)繁(fan)殖能(neng)力(li)的(de)骨(gu)髓瘤(liu)細胞(bao)融合(he)為B細胞(bao)雜交(jiao)瘤(liu)。

    1975年分子(zi)生物學家(jia)G.J.F.克(ke)勒(le)和C.米爾斯坦(tan)在自然雜交(jiao)技(ji)術的(de)基(ji)礎上，創(chuang)建立(li)雜交(jiao)瘤(liu)技(ji)術，他們把(ba)可在體(ti)外培養(yang)和大(da)量(liang)增(zeng)殖(zhi)的(de)小(xiao)鼠(shu)骨髓瘤(liu)細胞(bao)與(yu)經(jing)抗原免(mian)疫(yi)後(hou)的(de)純(chun)系(xi)小鼠(shu)B細胞(bao)融合(he)，成(cheng)為雜交(jiao)細胞(bao)系(xi)，既(ji)具有瘤(liu)細胞(bao)易(yi)於在體(ti)外無(wu)限(xian)增(zeng)殖的(de)特(te)性，又具有抗體(ti)形成(cheng)細胞(bao)的(de)合(he)成(cheng)和分泌特(te)異性(xing)抗體(ti)的(de)特(te)點。將(jiang)這種(zhong)雜交(jiao)瘤(liu)作單(dan)個細胞(bao)培養(yang)，可形成(cheng)單(dan)細胞(bao)系(xi)，即單(dan)克(ke)隆(long)。利(li)用培養(yang)或小(xiao)鼠(shu)腹(fu)腔(qiang)接種(zhong)的(de)方(fang)法(fa)，便能(neng)得(de)到(dao)大(da)量(liang)的(de)、高(gao)濃度的(de)、非(fei)常(chang)均(jun)壹(yi)的(de)抗體(ti)，其(qi)結構、氨基(ji)酸(suan)順序(xu)、特(te)異性(xing)等(deng)都(dou)是壹(yi)致的(de)，而(er)且(qie)在培養(yang)過程(cheng)中，只要(yao)沒有(you)變(bian)異(yi)，不同(tong)時(shi)間所分泌(mi)的(de)抗體(ti)都(dou)能(neng)保(bao)持同樣的(de)結構與機能(neng)。這種(zhong)單(dan)克(ke)隆(long)抗體(ti)是用其(qi)他方(fang)法(fa)所不能(neng)得(de)到(dao)的(de)。

單(dan)克(ke)隆(long)抗體(ti)的(de)優(you)勢(shi)和局限(xian)性(xing)

1．單(dan)克(ke)隆(long)抗體(ti)的(de)優(you)點

(1)雜交(jiao)瘤(liu)可以(yi)在體(ti)外存活並傳代(dai)，只要(yao)不發(fa)生細胞(bao)株(zhu)的(de)基(ji)因突變(bian)，就(jiu)可以不斷(duan)地(di)生產高(gao)特(te)異性(xing)、高(gao)均(jun)壹(yi)性的(de)抗體(ti)。

(2)可(ke)以(yi)用相對(dui)不純(chun)的(de)抗原，獲(huo)得(de)大(da)量(liang)高(gao)度(du)特(te)異的(de)、均(jun)壹(yi)的(de)抗體(ti)。

(3)由於可能(neng)得(de)到(dao)均(jun)壹(yi)性抗體(ti)，所以適(shi)用於以標(biao)記(ji)抗體(ti)為(wei)特(te)點的(de)免(mian)疫(yi)學分(fen)析(xi)方(fang)法(fa)，如(ru)IRMA和ELISA等。

(4)由於單(dan)克(ke)隆(long)抗體(ti)的(de)高(gao)特(te)異性(xing)和單(dan)壹(yi)生物學功(gong)能(neng)，可(ke)用於體(ti)內(nei)的(de)放射免(mian)疫(yi)顯(xian)像(xiang)和免(mian)疫(yi)導向(xiang)治療(liao)。

2．單(dan)克(ke)隆(long)抗體(ti)的(de)局(ju)限(xian)性(xing)

(1)單(dan)克(ke)隆(long)抗體(ti)固(gu)有(you)的(de)親和性和局限(xian)的(de)生物活性限(xian)制(zhi)了(le)它(ta)的(de)應用範圍(wei)。由於單(dan)克(ke)隆(long)抗體(ti)不能(neng)進(jin)行沈澱和凝集(ji)反應，所以很(hen)多(duo)檢(jian)測(ce)方(fang)法(fa)不能(neng)用單(dan)克(ke)隆(long)抗體(ti)完(wan)成(cheng)。

(2)單(dan)克(ke)隆(long)抗體(ti)的(de)反應強(qiang)度(du)不如(ru)多克(ke)隆(long)抗體(ti)。

(3)制(zhi)備技(ji)術復(fu)雜，而(er)且費時(shi)費工(gong)，所以單(dan)克(ke)隆(long)抗體(ti)的(de)價(jia)格(ge)也較高(gao) 。

單(dan)克(ke)隆(long)抗體(ti)的(de)應用

1．檢驗(yan)醫學診斷(duan)試劑

作為檢(jian)驗(yan)醫學實(shi)驗(yan)室的(de)診斷(duan)試劑，單(dan)克(ke)隆(long)抗體(ti)以(yi)其(qi)特(te)異性(xing)強(qiang)、純(chun)度(du)高(gao)、均(jun)壹(yi)性好等(deng)優(you)點，廣泛(fan)應用於酶聯免(mian)疫(yi)吸附試驗、放射免(mian)疫(yi)分(fen)析(xi)、免(mian)疫(yi)組化(hua)和流式(shi)細胞(bao)儀等技(ji)術。並且單(dan)克(ke)隆(long)抗體(ti)的(de)應用，很(hen)大(da)程(cheng)度(du)上(shang)促(cu)進了(le)商(shang)品(pin)化(hua)試劑盒的(de)發(fa)展(zhan)。

2．蛋(dan)白質(zhi)的(de)提(ti)純(chun)

單(dan)克(ke)隆(long)抗體(ti)是親和層(ceng)析(xi)中重(zhong)要的(de)配(pei)體(ti)。將(jiang)單(dan)克(ke)隆(long)抗體(ti)吸附在壹(yi)個惰(duo)性(xing)的(de)固(gu)相基(ji)質(zhi)（如(ru)Speharose 2B、4B、6B等）上(shang)，並制備成(cheng)層(ceng)析(xi)柱(zhu)。當(dang)樣品流經(jing)層(ceng)析(xi)柱(zhu)時(shi)，待分(fen)離的(de)抗原可與(yu)固(gu)相的(de)單(dan)克(ke)隆(long)抗體(ti)發(fa)生特(te)異性(xing)結合(he)，其(qi)余(yu)成(cheng)分不能(neng)與(yu)之(zhi)結合(he)。將(jiang)層(ceng)析(xi)柱(zhu)充(chong)分(fen)洗脫(tuo)後，改(gai)變(bian)洗脫(tuo)液的(de)離(li)子(zi)強(qiang)度(du)或(huo)pH，欲分(fen)離(li)的(de)抗原與抗體(ti)解離，收集(ji)洗脫(tuo)液便可得(de)到(dao)欲純(chun)化(hua)的(de)抗原。

3． 腫(zhong)瘤(liu)的(de)導向(xiang)治療(liao)和放射免(mian)疫(yi)顯(xian)像(xiang)技(ji)術

將(jiang)針(zhen)對(dui)某(mou)壹(yi)腫(zhong)瘤(liu)抗原的(de)單(dan)克(ke)隆(long)抗體(ti)與(yu)化(hua)療(liao)藥(yao)物(wu)或(huo)放療物質連(lian)接，利用單(dan)克(ke)隆(long)抗體(ti)的(de)導向(xiang)作用，將(jiang)藥物或(huo)放療物質攜(xie)帶(dai)至靶(ba)器(qi)官(guan)，直(zhi)接殺(sha)傷靶細胞(bao)，稱為(wei)腫(zhong)瘤(liu)導向(xiang)治療(liao)。另外，將(jiang)放射性標(biao)記(ji)物(wu)與單(dan)克(ke)隆(long)抗體(ti)連(lian)接，註入患者(zhe)體(ti)內(nei)可(ke)進(jin)行(xing)放射免(mian)疫(yi)顯(xian)像(xiang)，協(xie)助(zhu)腫(zhong)瘤(liu)的(de)診斷(duan)。單(dan)克(ke)隆(long)抗體(ti)主(zhu)要(yao)為(wei)鼠(shu)源性抗體(ti)，異(yi)種(zhong)動物(wu)血清(qing)可(ke)引(yin)起(qi)人體(ti)過(guo)敏(min)反應。因此，制(zhi)備人-人單(dan)克(ke)隆(long)抗體(ti)或(huo)人源化(hua)抗體(ti)更(geng)為重(zhong)要，但此方(fang)面仍未取得(de)明(ming)顯進展(zhan)。
      蘇(su)州阿(e)爾法(fa)生物多種(zhong)單(dan)克(ke)隆(long)抗體(ti)、多(duo)克(ke)隆(long)抗體(ti)、壹(yi)抗、二抗、抗體(ti)蛋(dan)白(bai)、熒(ying)光染料(liao)等(deng)生物試劑、抗體(ti)試劑應用於細胞(bao)學、免(mian)疫(yi)蛋(dan)白(bai)質(zhi)組化(hua)、分(fen)子(zi)生物學。