多(duo)克(ke)隆抗體及抗體制(zhi)備(bei)流(liu)程

      抗體，又(you)名(ming)免(mian)疫球蛋白(bai) (Ig)，是壹(yi)種由(you) B 細胞產生(sheng)的大型(xing) Y 形糖(tang)蛋白(bai)，可在(zai)免疫(yi)防禦中起主(zhu)要(yao)作(zuo)用(yong)。抗體與(yu)病(bing)原(yuan)體(ti)的特(te)定分(fen)子（即(ji)抗原(yuan)）發(fa)生(sheng)特(te)異性(xing)結(jie)合(he)。
    抗體以(yi)壹(yi)個或(huo)者多(duo)個 Y 形(xing)單體(ti)存在(zai)，每個 Y 形(xing)單體(ti)由 4 條多(duo)肽(tai)鏈組(zu)成(cheng)。每個 Y 形(xing)單體(ti)包含(han)兩(liang)條相同的(de)重(zhong)鏈（H）和兩(liang)條相同的(de)輕(qing)鏈（L），重(zhong)鏈和(he)輕(qing)鏈的(de)序(xu)列和(he)長度不同。Y 形(xing)單體(ti)的頂部(bu)包含(han)可變區（V），也稱抗原(yuan)結(jie)合(he)片(pian)段(duan)（F(ab)）區。該(gai)區可與(yu)給定抗原(yuan)上(shang)的表位特(te)異性(xing)緊(jin)密(mi)結(jie)合(he)。

   抗體的(de)基本(ben)結(jie)構(gou)包含(han)恒定區（C）和可結晶片(pian)段(duan)（Fc）區。這(zhe)壹(yi)區域(yu)對(dui)抗體的(de)免(mian)疫(yi)應答功(gong)能(neng)非常重要(yao)。此(ci)外(wai)，將熒光(guang)染料和(he)酶(mei)經共價(jia)鍵(jian)連(lian)接到(dao)抗體的(de) Fc 部(bu)位(wei)，可實(shi)現(xian)實(shi)驗的可視(shi)化。
Y形(xing)抗體通(tong)過(guo)彈性(xing)的(de)鉸(jiao)鏈區連(lian)接到(dao)中(zhong)部(bu)。抗原(yuan)結(jie)合(he)發(fa)生(sheng)在(zai)由免(mian)疫球蛋白(bai)重鏈（H）和輕(qing)鏈（L）組(zu)成(cheng)的(de)可變區（V）。抗體的(de)基本(ben)結(jie)構(gou)由(you)恒定區（C）組(zu)成(cheng)。根(gen)據多肽(tai)序(xu)列的(de)微(wei)小差(cha)異，抗體的(de)輕(qing)鏈都(dou)可分(fen)為 kappa (κ) 型(xing)或 lambda (λ) 型(xing)。重鏈(lian)結構(gou)決(jue)定了各個抗體的(de)總(zong)類(lei)。

   哺(bu)乳動(dong)物(wu)體(ti)內的抗體分(fen)為 5 種同種型(xing)：IgG、IgM、IgA、IgD 和 IgE。各個同種型(xing)都(dou)有相應的(de)結構。這(zhe)些同種型(xing)因(yin) Y 形結(jie)構(gou)的(de)數量和(he)重鏈(lian)種類(lei)而(er)異。它們的(de)生(sheng)物學特(te)性(xing)、功(gong)能(neng)區域(yu)以(yi)及結(jie)合(he)不同抗原(yuan)的(de)能力有所不同。 

     由(you)多(duo)種抗原(yuan)決(jue)定簇刺激機(ji)體，相應地就產生(sheng)各種各樣的單克(ke)隆抗體，這(zhe)些單克(ke)隆抗體混雜在(zai)壹(yi)起(qi)就稱為多(duo)克(ke)隆抗體，機(ji)體內所產生(sheng)的抗體就是多克隆抗體。除(chu)了(le)抗原(yuan)決(jue)定簇的多樣性(xing)以(yi)外(wai)，同樣(yang)壹(yi)種抗原(yuan)決(jue)定簇，也可刺激(ji)機(ji)體產生(sheng)IgG、IgM、IgA、IgE和IgD等五(wu)類(lei)抗體。與(yu)單克(ke)隆抗體相比，大(da)量多(duo)克隆抗體的(de)生(sheng)產相對(dui)快(kuai)速且成本(ben)低廉(lian)。它(ta)們是非特(te)異性(xing)的(de)，因(yin)為它(ta)們能(neng)夠(gou)識(shi)別任(ren)何(he)壹(yi)種抗原(yuan)上(shang)的多(duo)個表位。

（二）優勢和(he)局(ju)限(xian)性(xing)

1.多(duo)克(ke)隆抗體的(de)優(you)勢

（1）可以(yi)幫(bang)助增加(jia) WB 信(xin)號(hao)，因(yin)為抗體將與(yu)多個表位結(jie)合(he)。

（2）由(you)於(yu)識(shi)別多(duo)個表位，多(duo)克(ke)隆抗體可以(yi)在(zai) IP/ChIP 檢測(ce)中提(ti)供(gong)更(geng)好的結果。

（3）更(geng)能(neng)容忍抗原(yuan)的(de)微小(xiao)變化，例(li)如(ru)多(duo)態(tai)性(xing)、糖(tang)基化異質性(xing)或(huo)輕(qing)微變(bian)性(xing)。

（4）當(dang)抗原(yuan)的(de)性(xing)質(zhi)未(wei)知(zhi)時(shi)很(hen)有(you)用(yong)

（5）生(sheng)產成本(ben)低，時(shi)間短(duan)

2.多克(ke)隆抗體的(de)缺(que)點(dian)

（1）更(geng)容易出現批次(ci)間的差(cha)異。

（2）多個表位使(shi)得檢(jian)查(zha)免疫原(yuan)序(xu)列是否(fou)存在(zai)任(ren)何(he)潛(qian)在(zai)的交叉反(fan)應(ying)變得很(hen)重(zhong)要(yao)。

（三(san)）應用(yong)

壹(yi)種良好的多克隆抗血(xue)清(qing)含有抗某種抗原(yuan)不同表位的(de)多(duo)種抗體。由(you)於(yu)多(duo)克隆抗血(xue)清(qing)通常包含(han)抗某壹(yi)抗原(yuan)的(de)不同表位的(de)抗體，包括變性(xing)—抗性(xing)的(de)表位，所(suo)以(yi)，在(zai)深(shen)固(gu)定的樣(yang)本(ben)中(zhong)也會發(fa)揮(hui)效應(ying)，在(zai)石蠟(la)包埋(mai)組(zu)織(zhi)切(qie)片(pian)的(de)染色中(zhong)，多克(ke)隆抗體常選用(yong)。根(gen)據實(shi)驗的不同需(xu)要，多(duo)克隆抗體應(ying)用(yong)於(yu)相應抗原(yuan)的(de)標記(ji)。此(ci)外(wai)，在(zai)農業(ye)生(sheng)產中，多(duo)克(ke)隆抗體被(bei)用於農藥(yao)殘留(liu)現(xian)場監測；在(zai)臨(lin)床應(ying)用中，多(duo)克(ke)隆抗體主(zhu)要(yao)用(yong)於(yu)病(bing)原(yuan)物(wu)的檢(jian)測、疾(ji)病(bing)的(de)診斷及治(zhi)療，如作為(wei)蛋白(bai)類(lei)免(mian)疫抑制(zhi)劑(ji)用(yong)於(yu)移植反(fan)應(ying)和自(zi)身免(mian)疫病(bing)的(de)治(zhi)療。

三(san)、單克(ke)隆抗體與(yu)多克(ke)隆抗體制(zhi)備(bei)流(liu)程的(de)比(bi)較

   經過特(te)定抗原(yuan)處(chu)理過(guo)的B淋(lin)巴(ba)細胞與(yu)骨髓(sui)瘤(liu)細胞通(tong)過細胞融(rong)合(he)的(de)方(fang)法得到(dao)雜(za)交瘤(liu)細胞，經HAT培養(yang)基篩(shai)選、ELISA檢(jian)測(ce)效價(jia)後(hou)就得到(dao)陽性(xing)克(ke)隆株，最(zui)後(hou)進(jin)行(xing)細胞培(pei)養或將細胞註入(ru)到(dao)動物（壹(yi)般為balb/c小(xiao)鼠）腹(fu)腔(qiang)中用(yong)腹水(shui)培(pei)養，收(shou)集(ji)上(shang)清/腹(fu)水(shui)純(chun)化後(hou)就能(neng)得到(dao)單克(ke)隆抗體。而(er)制(zhi)備(bei)多克(ke)隆抗體就沒(mei)有單克(ke)隆抗體繁(fan)瑣(suo)，只(zhi)需(xu)將抗原(yuan)（純(chun)度越(yue)高(gao)越(yue)好）直(zhi)接註入(ru)到(dao)動物體內進(jin)行(xing)免(mian)疫，經過3至(zhi)4次(ci)免(mian)疫，ELISA測(ce)其效價(jia)合(he)格後(hou)，收集(ji)血(xue)液(ye)離心得到(dao)上(shang)清，純(chun)化後(hou)即(ji)能得到(dao)多(duo)克隆抗體。
    

     蘇州(zhou)阿(e)爾(er)法生(sheng)物供(gong)應單抗、雙(shuang)抗、多抗、壹(yi)抗、二抗等抗體蛋(dan)白(bai)及蛋(dan)白(bai)免疫(yi)學相關(guan)的生(sheng)物試(shi)劑和(he)儀器設(she)備(bei)。