蛋白(bai)酶K的(de)應用(yong)

   近年來(lai)，隨(sui)著(zhe)對(dui)蛋(dan)白(bai)酶K研(yan)究(jiu)的(de)深(shen)入，該酶的(de)應用(yong)範圍(wei)不(bu)僅(jin)在(zai)醫(yi)療診(zhen)斷(duan)及科研(yan)領域(yu)得到(dao)了(le)十(shi)分(fen)廣(guang)泛的應用(yong)，該酶還(hai)作(zuo)為(wei)替(ti)代其(qi)它(ta)作(zuo)用(yong)範圍(wei)較窄的蛋白(bai)酶，主(zhu)要(yao)應用(yong)於造(zao)紙(zhi)、工(gong)業(ye)制革、飼料生產(chan)、食品加(jia)工(gong)等(deng)行(xing)業中。此(ci)外，該酶還(hai)可(ke)以替代傳(chuan)統的(de)通過化學(xue)方(fang)法(fa)處理原材(cai)料(liao)的方(fang)法(fa)，減少(shao)汙(wu)染。
  在(zai)各(ge)行(xing)各業(ye)中，蛋(dan)白(bai)酶K的(de)主(zhu)要(yao)用(yong)途有：
①在(zai)分(fen)離(li)DNA和(he)RNA的(de)過程(cheng)中，用(yong)於核(he)酸(suan)酶的(de)蛋(dan)白(bai)水(shui)解失活。
蛋白酶K能(neng)降(jiang)解與(yu)核(he)酸(suan)結合(he)的(de)蛋(dan)白質，促(cu)進(jin)蛋(dan)白(bai)與(yu)核(he)酸(suan)的分(fen)離(li)，因(yin)此(ci)該酶在(zai)提(ti)取(qu)高(gao)分(fen)子(zi)量的核(he)酸(suan)時具有很大(da)的優(you)勢。蛋白(bai)酶K還(hai)常被(bei)用(yong)於RNA提(ti)取(qu)過程(cheng)中抑制(zhi)和(he)降(jiang)解RNase，防(fang)止提(ti)取(qu)的(de)RNA被(bei)降(jiang)解。RNA的(de)質量對(dui)於(yu)cDNA合(he)成(cheng)、Northem印(yin)跡(ji)及雜(za)交(jiao)分(fen)析及體(ti)外(wai)翻(fan)譯(yi)等(deng)實(shi)驗(yan)的成(cheng)敗(bai)至關重要(yao)。但是(shi)RNA極不(bu)穩定、易於被(bei)環(huan)境中廣(guang)泛存在(zai)的(de)RNase降解，而利用(yong)蛋白(bai)酶K可(ke)創(chuang)造(zao)壹(yi)個不(bu)含(han)RNase的環(huan)境、以防(fang)止在(zai)提(ti)取(qu)RNA時被(bei)RNase汙(wu)染，因此(ci)該酶的(de)使用(yong)是成(cheng)功提(ti)取(qu)RNA的(de)關鍵(jian)。在(zai)核(he)酸(suan)提(ti)取(qu)實(shi)驗(yan)中蛋(dan)白(bai)酶K的(de)工(gong)作(zuo)濃度(du)大(da)約是(shi)0.05-0.2mg/mL，壹(yi)般情(qing)況下(xia)，提(ti)取(qu)壹(yi)個樣本(ben)的(de)核(he)酸(suan)大(da)約需(xu)要(yao)0.1mg的蛋(dan)白(bai)酶K ，而在(zai)實(shi)際(ji)使用(yong)過程(cheng)中，為(wei)了(le)增(zeng)加(jia)核(he)酸(suan)提(ti)取(qu)效(xiao)率，通常會(hui)將(jiang)蛋白酶K進(jin)行(xing)加(jia)量使用(yong)。核(he)酸(suan)檢測(ce)量劇增(zeng)，造(zao)成(cheng)對(dui)蛋(dan)白(bai)酶K需(xu)求(qiu)激增(zeng)，蛋(dan)白(bai)酶K原(yuan)有的供需平(ping)衡被(bei)迅(xun)速(su)打(da)破(po)，導致蛋(dan)白(bai)酶K壹(yi)夜之(zhi)間(jian)成為(wei)了(le)緊缺(que)的(de)防(fang)疫(yi)物(wu)資。
②在(zai)生(sheng)活和(he)工(gong)業(ye)用(yong)水中滅(mie)活病(bing)毒(du)。
病(bing)毒(du)外(wai)層結(jie)構壹(yi)般以(yi)衣(yi)殼蛋(dan)白(bai)為(wei)主(zhu)，因(yin)此(ci)蛋白(bai)酶K可(ke)以對(dui)病(bing)毒(du)表(biao)面(mian)的蛋白(bai)進(jin)行(xing)破壞(huai)，進(jin)而造(zao)成(cheng)病(bing)毒(du)因(yin)結(jie)構不(bu)完整(zheng)不(bu)再具有攻(gong)擊(ji)宿主(zhu)細胞的(de)能(neng)力。有研究結(jie)構表(biao)明，在(zai)蛋(dan)白酶K濃(nong)度(du)為(wei)67.51ug/mL條件(jian)下(xia)對(dui)純(chun)水(shui)和(he)生(sheng)活汙(wu)水中病(bing)毒(du)處(chu)理lh，其(qi)對(dui)病(bing)毒(du)的(de)滅(mie)活率分(fen)別(bie)達(da)到(dao)了(le)99.4％和(he)49.4％，而處(chu)理3h時，其(qi)病(bing)毒(du)滅(mie)活率分(fen)別(bie)為(wei)>99.9％和(he)81.8％。用(yong)含(han)蛋白(bai)酶K的(de)消毒劑對(dui)病(bing)毒(du)滅(mie)活的優(you)點是消毒劑為(wei)蛋(dan)白質，無(wu)汙(wu)染，不(bu)產(chan)生(sheng)有害(hai)消毒產(chan)物(wu)，是壹(yi)種(zhong)高(gao)效且環(huan)保的消毒方(fang)法(fa)。
③在(zai)肉類嫩化中的(de)應用(yong)
蛋白(bai)酶K能(neng)分(fen)解肉中肌(ji)纖(xian)維(wei)與結締組(zu)織的蛋白質(zhi)，甚(shen)至(zhi)可(ke)以分(fen)解彈性(xing)蛋(dan)白及膠(jiao)原(yuan)蛋(dan)白，使肉類的各(ge)組(zu)織結構發生(sheng)改(gai)變(bian)，如(ru)肉中部分(fen)肽(tai)鍵(jian)斷(duan)裂(lie)，吸(xi)水膨(peng)脹，質(zhi)地變(bian)嫩，增強(qiang)肉的(de)口(kou)感(gan)。
④在(zai)其(qi)它(ta)生物(wu)行(xing)業中的(de)應用(yong)，主(zhu)要(yao)包括：
1）用(yong)於去(qu)除內(nei)毒(du)素(su)結(jie)合(he)的(de)陽(yang)離子蛋(dan)白(bai)，如溶(rong)菌酶和(he)核(he)糖核(he)酸(suan)酶A。
2）可(ke)用(yong)於分(fen)離(li)肝(gan)、酵母和(he)綠(lv)豆(dou)線粒(li)體(ti)
3）用(yong)於測(ce)定酶在(zai)細胞膜(mo)上的定位
4）用(yong)於石(shi)蠟(la)包埋組(zu)織切(qie)片的處(chu)理，暴(bao)露(lu)用(yong)於抗體(ti)標(biao)記的(de)抗原(yuan)結(jie)合(he)位(wei)點。
5）用(yong)於可(ke)傳(chuan)播(bo)海(hai)綿(mian)狀(zhuang)腦(nao)病(bing)(TSE)研(yan)究(jiu)中朊病(bing)毒(du)腦(nao)組(zu)織樣本(ben)蛋(dan)白的消化。
   蘇州(zhou)阿(e)爾(er)法(fa)生物(wu)14年(nian)專(zhuan)註於實(shi)驗(yan)室儀(yi)器設(she)備、生(sheng)物試(shi)劑(ji)、實(shi)驗(yan)耗(hao)材(cai)供應，提(ti)供的生(sheng)物試(shi)劑(ji)包(bao)括天(tian)根(gen)試(shi)劑(ji)盒、碧雲(yun)天(tian)試(shi)劑(ji)、轉(zhuan)染(ran)試(shi)劑(ji)、elisa試(shi)劑(ji)等(deng)應用(yong)於細胞生(sheng)物(wu)學、分(fen)子(zi)生(sheng)物(wu)學(xue)、免疫組(zu)化(hua)學等(deng)。