如(ru)何選擇(ze)合適(shi)的(de)細胞(bao)雕(diao)亡(wang)試(shi)劑盒(he)

   細胞(bao)調(tiao)亡(wang)是細胞主(zhu)動死(si)亡(wang)的(de)過(guo)程(cheng)，並(bing)出現(xian)壹系列(lie)特征(zheng)變化(hua)。包括核(he)固(gu)縮、核(he)碎(sui)裂、雕(diao)亡(wang)小體(ti)形成(cheng)，以(yi)及DNA特征(zheng)性片段化(hua)、新的(de)基因表(biao)達(da)和特定的(de)生物(wu)大分子(zi)合成(cheng)等。
 
 流式(shi)細(xi)胞儀可以(yi)對(dui)不同(tong)細胞(bao)雕(diao)亡(wang)的(de)過(guo)程(cheng)進(jin)行(xing)定(ding)性(xing)和定(ding)量檢(jian)測，通(tong)過(guo)檢(jian)測細(xi)胞(bao)膜完(wan)整(zheng)性來(lai)反(fan)應細(xi)胞(bao)雕(diao)亡(wang)是常用的(de)流式(shi)檢(jian)測細(xi)胞(bao)雕(diao)亡(wang)常用方法(fa)之壹。
 
其(qi)原理是：①用Annexin V檢(jian)測早期(qi)雕(diao)亡(wang)細(xi)胞(bao)：Annexin V可(ke)以結(jie)合細(xi)胞膜上(shang)的(de)磷酯酰絲(si)氨酸(suan)，磷酯酰絲(si)氨酸(suan)位於(yu)正常細胞膜內側(ce)，不(bu)會(hui)被檢(jian)測到(dao)，雕(diao)亡(wang)時(shi)外翻(fan)到細(xi)胞膜外(wai)表(biao)面，可以(yi)被(bei)檢(jian)測到(dao)。
②用(yong)PI或者7AAD檢(jian)測晚(wan)期(qi)雕(diao)亡(wang)細(xi)胞(bao)：早期(qi)雕(diao)亡(wang)的(de)細胞(bao)，未喪失細(xi)胞膜(mo)選擇(ze)通(tong)透(tou)性(xing)，PI/7AAD無法(fa)進入(ru)，晚(wan)期(qi)雕(diao)亡(wang)的(de)細胞(bao)，失去細(xi)胞(bao)膜選擇(ze)通(tong)透(tou)性(xing)，PI/7AAD可(ke)以(yi)對(dui)細胞核(he)進行(xing)染色。但(dan)由(you)於Annexin V本(ben)身(shen)沒(mei)有(you)熒(ying)光(guang)，因此需要(yao)偶聯(lian)熒(ying)光(guang)基團(tuan)，以便(bian)被(bei)流(liu)式(shi)細(xi)胞儀檢(jian)測，通(tong)常會(hui)偶聯(lian)FITC、eGFP、AF488、APC等(deng)基團(tuan)。

細胞(bao)雕(diao)亡(wang)檢(jian)測試(shi)劑盒(he)壹般會(hui)將偶聯(lian)不(bu)同(tong)熒(ying)光(guang)基團(tuan)的(de)Annexin V與(yu)PI和7AAD任(ren)意組(zu)合。細(xi)胞雕(diao)亡(wang)檢(jian)測試(shi)劑盒(he)的(de)選擇(ze)應該(gai)遵(zun)循以(yi)下(xia)原則：
  如(ru)果細(xi)胞沒有(you)自發(fa)熒(ying)光(guang)，可以選擇(ze)常用的(de)紅(hong)綠(lv)組(zu)合的(de)試劑盒(he)，比(bi)如(ru)Annexin V-FITC/PI或者(zhe)Annexin V-eGFP/PI。這(zhe)類試劑盒(he)由(you)於只(zhi)需要(yao)488 nm激光器(qi)，並且(qie)熒(ying)光(guang)光譜重(zhong)疊較小，對(dui)實驗(yan)人員的(de)技術要求(qiu)相(xiang)對(dui)較低，所以應用(yong)非(fei)常廣(guang)泛。
 
   如(ru)果細(xi)胞本(ben)身(shen)需(xu)要(yao)檢(jian)測綠(lv)色熒(ying)光(guang)，則應該(gai)避(bi)開(kai)FITC、eGFP等(deng)綠(lv)色熒(ying)光(guang)，可以選擇(ze)Annexin V-APC/PI或者(zhe)Annexin V-APC/7AAD組(zu)合的(de)試劑盒(he)。由(you)於APC和PI的(de)熒(ying)光(guang)光譜有(you)較(jiao)大重疊，因此對(dui)檢(jian)測儀(yi)器(qi)和技(ji)術人員有較(jiao)高要求(qiu)，初學者通(tong)常需要仔(zai)細(xi)詢(xun)問相關技術人員方可(ke)開(kai)展(zhan)實(shi)驗(yan)。
   如(ru)果細(xi)胞本(ben)身(shen)需(xu)要(yao)檢(jian)測紅(hong)色熒(ying)光(guang)，則應確(que)認紅(hong)色熒(ying)光(guang)的(de)激發(fa)光(guang)和發(fa)射(she)光波長，如(ru)果與(yu)PI和7AAD的(de)激發(fa)光(guang)和發(fa)射(she)光均(jun)相似(si)，則不(bu)能(neng)用(yong)這類試劑盒(he)檢(jian)測該(gai)細(xi)胞的(de)雕(diao)亡(wang)。如(ru)果激(ji)發(fa)光(guang)或(huo)者(zhe)發(fa)射(she)光與(yu)PI或(huo)者(zhe)7AAD有(you)較(jiao)大差(cha)異(yi)，則(ze)要具體(ti)情(qing)況(kuang)具體(ti)分析(xi)，以熒(ying)光(guang)光譜重(zhong)疊小為(wei)原則進行試(shi)劑盒(he)的(de)選擇(ze)。
      蘇(su)州(zhou)阿爾(er)法(fa)生物(wu)提(ti)供碧(bi)雲(yun)天細胞雕(diao)亡(wang)檢(jian)測試(shi)劑盒(he)、CCK8細(xi)胞活力檢(jian)測試(shi)劑盒(he)、天根(gen)質(zhi)粒(li)提(ti)取試(shi)劑盒(he)、天根(gen)DNA提(ti)取試(shi)劑盒(he)等(deng)實驗(yan)試劑以(yi)及熒(ying)光(guang)定量PCR儀、化(hua)學(xue)發(fa)光(guang)檢(jian)測儀(yi)、多(duo)功(gong)能(neng)酶(mei)標儀、電(dian)泳(yong)儀(yi)、凝(ning)膠(jiao)成(cheng)像(xiang)儀(yi)等(deng)實(shi)驗(yan)室(shi)設備(bei)。