外泌(mi)體(ti)衍(yan)生(sheng)物(wu)的應用(yong)
近(jin)期市場研(yan)究報(bao)告預測(ce)到(dao)2030年(nian)全球(qiu)外(wai)泌體(ti)研(yan)究市場規模和(he)份額需求(qiu)將(jiang)達(da)到(dao) 18.96億(yi)美元,說(shuo)明外(wai)泌體(ti)具(ju)有(you)巨(ju)大的市場潛力(li)和(he)行業認(ren)可度(du)。 由(you)於外泌體(ti)的體(ti)積(ji)較小(xiao) 壹(yi)般為(wei)(30–100 nm) ,所以(yi)外(wai)泌(mi)體(ti)的準(zhun)確定量(liang)和(he)表(biao)征(zheng)在(zai)技(ji)術(shu)上是(shi)具有(you)挑戰(zhan)性(xing)的人(ren)。目(mu)前,已(yi)經開發並(bing)應(ying)用(yong)了(le)許多技(ji)術(shu)來克(ke)服這些(xie)挑戰(zhan)。納米粒(li)子(zi)跟(gen)蹤分析 (NanoSight) 技(ji)術(shu)就(jiu)是(shi)用(yong)於外(wai)泌(mi)體(ti)大小(xiao)和定量(liang)主(zhu)要方法之(zhi)壹(yi)。比如:Nanocoulter Ⅰ納米粒(li)度(du)儀(yi)采用(yong)了(le)新(xin)壹(yi)代(dai)電(dian)學(xue)原(yuan)理 可以同時進(jin)行(xing)納米粒(li)子(zi)或外泌(mi)體(ti)的單顆粒(li)檢(jian)測(ce),顆粒(li)粒(li)徑大小(xiao)測(ce)量(liang)、濃(nong)度(du)測(ce)定、 zeta電(dian)位(wei)標(biao)定、形(xing)態(tai)多維度(du)檢(jian)測(ce)等廣(guang)泛(fan)用(yong)於外(wai)泌(mi)體(ti)的分離和純化(hua)過(guo)程中。
外(wai)泌(mi)體(ti)的物理表(biao)征(zheng)方法
常(chang)用(yong)的外泌體(ti)物(wu)理(li)表(biao)征(zheng)方法是(shi)基於(yu)顯微鏡的方法,例(li)如透射電(dian)子(zi)顯微鏡、掃描(miao)電(dian)子(zi)顯微鏡、低溫(wen)電(dian)子(zi)顯微鏡和原子(zi)力(li)顯微鏡 ;動態(tai)光(guang)散射 ;納(na)米(mi)粒(li)子(zi)跟(gen)蹤分析;可調(tiao)電(dian)阻(zu)脈(mai)沖傳感;和單個 EV 分析等。
用(yong)於分析外泌體(ti)濃(nong)度(du)、定(ding)量(liang)和(he)概(gai)況的分子(zi)生(sheng)物方法主(zhu)要包(bao)括:實時(shi)定量(liang)PCR、數字(zi) PCR技(ji)術(shu)(基於(yu)芯片的 dPCR、液滴數字(zi) PCR、ddPCR)、蛋(dan)白(bai)質免(mian)疫(yi)印(yin)跡、全基因(yin)組測(ce)序( next-generation sequencing)、exome-targeted sequencing(下壹(yi)代(dai)測(ce)序)、微陣列(lie)圖(tu)譜技(ji)術(shu)和ELISA技(ji)術(shu)等。
外(wai)泌(mi)體(ti)衍(yan)生(sheng)物(wu) miRNA 的重要應用(yong)
miRNA 的靈敏生物標(biao)誌(zhi)物(wu)測(ce)定法主(zhu)要用(yong)於檢(jian)測(ce)早(zao)期階段(duan) (0-1) 腫瘤(liu)的存在(zai)。除(chu)了(le)基於(yu)組織(zhi)活檢(jian)的當前研(yan)究外,循環(huan) miRNA 的研(yan)究是(shi)生物標(biao)誌(zhi)物(wu)研(yan)究中壹(yi)個新(xin)的擴(kuo)展(zhan)領(ling)域(yu),因(yin)為(wei)它們(men)具(ju)有(you)所有(you)特征(zheng)(miRNA 分析、診(zhen)斷、預後(hou)、治療(liao)反(fan)應(ying)和預測(ce)性(xing)生(sheng)物(wu)標(biao)誌(zhi)物(wu)),可在(zai)液體(ti)活(huo)檢(jian)(生物(wu)體(ti)液)中檢(jian)測(ce)到(dao), 並(bing)且(qie)不需要對病人(ren)進(jin)行(xing)健(jian)康和腫瘤(liu)活(huo)檢(jian)。血液樣(yang)本(ben)等體(ti)液分析檢(jian)測(ce)使(shi)醫(yi)生和研(yan)究人(ren)員(yuan)能(neng)夠(gou)及早(zao)了(le)解(jie)癌(ai)癥的發展(zhan)狀況。
miRNA 被(bei)稱為(wei)基因(yin)表(biao)達(da)的基本(ben)調(tiao)節(jie)因(yin)子(zi),尤其(qi)是(shi)在(zai)癌(ai)癥中,並(bing)且(qie)在(zai)腫瘤(liu)發(fa)生、轉移和對(dui)各種(zhong)療(liao)法的耐(nai)藥(yao)性(xing)中發(fa)揮重要作(zuo)用(yong)。據(ju)報(bao)道(dao),哺(bu)乳動(dong)物(wu)細(xi)胞(bao)每個細(xi)胞(bao)含有(you)大約(yue) 100,000 個(ge)內源性(xing) miRNA 分子(zi)。據(ju)估計(ji),單個外(wai)泌體(ti)最多(duo)可攜帶約(yue) 500 個(ge) miRNA 拷(kao)貝(bei)。正(zheng)常(chang)人(ren)血(xue)液中的外泌體(ti)量(liang)在(zai)癌(ai)癥患(huan)者中約(yue)為(wei) 10 9個外(wai)泌(mi)體(ti) /ml 。
miRNA 是(shi)壹(yi)類主(zhu)要的小分子(zi)、單鏈(lian)、非(fei)編(bian)碼(ma) RNA 分子(zi),其(qi)成熟(shu)形(xing)式(shi)的長(chang)度(du)在(zai) 20 到(dao) 22 個(ge)核苷酸 (NT) 之(zhi)間(jian),在(zai)幾乎所有(you)生物途徑中發(fa)揮重要作(zuo)用(yong),包(bao)括細(xi)胞(bao)生長(chang)、增(zeng)殖(zhi)、分化(hua)、免(mian)疫(yi)反(fan)應(ying),細(xi)胞(bao)雕(diao)亡,代(dai)謝和腫瘤(liu)發(fa)生。
外(wai)泌體(ti)在(zai)體(ti)液中的主要作(zuo)用(yong)是(shi)可以保護 miRNA ,防止(zhi)其(qi)生(sheng)物(wu)分子(zi)在(zai)非生(sheng)理(li)條(tiao)件(jian)下(xia)(多(duo)次凍融(rong)循(xun)環、長(chang)期儲存和 pH)降解(jie)。據(ju)報(bao)道(dao),外(wai)泌(mi)體(ti)來(lai)源的 miRNA 在(zai) -20 ° C下可保持穩(wen)定(ding)長(chang)達(da)5年(nian),並(bing)且(qie)對(dui)凍(dong)融循(xun)環具(ju)有(you)抵(di)抗(kang)力(li). 這(zhe)也使(shi)外(wai)泌體(ti)成(cheng)為(wei)癌(ai)癥和(he)其(qi)他(ta)疾(ji)病的潛在(zai)生物(wu)標(biao)誌(zhi)物(wu)。miRNA 與(yu)包(bao)括癌(ai)癥在(zai)內的許多疾(ji)病的發病機(ji)制有(you)關,並(bing)且(qie)還被(bei)證明(ming)被(bei)遠(yuan)端(duan)或附近(jin)的受體(ti)細(xi)胞(bao)吸收作(zuo)為(wei)外泌(mi)體(ti)中的貨物,作(zuo)為(wei)細(xi)胞(bao)間(jian)通訊的壹(yi)種方法,可能(neng)會(hui)影響(xiang)發(fa)病機(ji)制 。所以(yi),外(wai)泌體(ti)可以被(bei)看作(zuo)是(shi) miRNA 轉移至目(mu)標(biao)受體(ti)細(xi)胞(bao)的載體(ti)。外(wai)泌(mi)體(ti)保護 miRNA 免於降解(jie),使(shi)它們(men)比(bi)遊(you)離(li) miRNA 更穩(wen)定,並(bing)能(neng)被(bei)特定(ding)受(shou)體(ti)細(xi)胞(bao)有(you)效整合(he)。因此(ci),在(zai)外泌(mi)體(ti)攜帶的貨物中,miRNA 可以提(ti)供(gong)有(you)關它們(men)來(lai)源的細(xi)胞(bao)類型、靶(ba)標(biao)和細(xi)胞(bao)狀態(tai)的身(shen)份信(xin)息。
越(yue)來(lai)越(yue)多(duo)的證據(ju)表(biao)明,腫瘤(liu)細(xi)胞(bao)來源的外泌體(ti)已(yi)成為(wei)通過傳(chuan)遞癌(ai) miRNA 促(cu)進(jin)腫瘤(liu)細(xi)胞(bao)增殖(zhi)、侵(qin)襲(xi)、血管(guan)生(sheng)成、遠(yuan)處轉移和腫瘤(liu)微(wei)環境(jing)重塑的主要候選者(zhe)。血(xue)管(guan)生(sheng)成對於惡(e)性(xing)腫瘤(liu)的生長(chang)和(he)轉移至關重要,因為(wei)新血(xue)管(guan)可以提(ti)供(gong)額外(wai)的氧氣和營(ying)養物(wu)質(zhi),還可以清除(chu)廢(fei)物(wu) 。 比(bi)如:癌(ai)細(xi)胞(bao)釋(shi)放(fang)外(wai)泌體(ti)exo-miR-21、exo-miR-23;外(wai)-miR-29;exo -miR-103 和(he) exo-miR-210可以促(cu)進(jin)增(zeng)殖(zhi)、血(xue)管(guan)生(sheng)成和腫瘤(liu)轉移。
如今,雖然(ran)已(yi)在(zai)各種(zhong)細(xi)胞(bao)類型釋(shi)放(fang)的外泌體(ti)中找(zhao)到(dao) 2838 種(zhong) miRNA。但(dan)是(shi)還是(shi)需要進(jin)壹(yi)步的研(yan)究來更好(hao)地了(le)解(jie)外泌(mi)體(ti) miRNA 作(zuo)為(wei)生物(wu)標(biao)誌(zhi)物(wu)在(zai)癌(ai)癥中的作(zuo)用(yong)。
增強(qiang)的外泌體(ti)純(chun)化(hua)有(you)利於下遊(you)分析,包(bao)括更準(zhun)確的囊泡定量(liang)和(he)表(biao)征(zheng)。蘇州阿爾法生(sheng)物(wu)提(ti)供(gong)了(le)熒光(guang)顯微鏡、納米粒(li)度(du)儀(yi) 、酶(mei)標(biao)儀等實(shi)驗(yan)室儀(yi)器廣泛(fan)用(yong)外泌(mi)體(ti)分離、外泌體(ti)純(chun)化(hua)、外(wai)泌體(ti)物(wu)理(li)等外(wai)泌(mi)體(ti)研(yan)究。我們(men)為(wei)您(nin)提(ti)供(gong)壹(yi)站(zhan)式(shi)采(cai)購服務(wu)方案,同時也(ye)相(xiang)信(xin)我們(men)的服務(wu)會(hui)讓(rang)您(nin)的項目事半功(gong)倍(bei)。