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流(liu)式(shi)細(xi)胞技(ji)術(shu)的應用(yong)
更(geng)新時間:2022-12-09
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流(liu)式(shi)細(xi)胞術(FCM)是壹種基於激(ji)光的技(ji)術(shu),用(yong)於生(sheng)物顆(ke)粒(li)的(de)多參數分析(xi)。隨(sui)著技(ji)術(shu)的發展,FCM已進(jin)入許多使用(yong)領域。FCM也用(yong)於免疫(yi)表(biao)型研(yan)究。因(yin)此,它(ta)可以(yi)用(yong)於確(que)定細(xi)胞亞(ya)群、譜系(xi)、細(xi)胞分化(hua)和(he)激活階(jie)段(duan)以(yi)及克隆性(xing)。隨(sui)著FCM分析(xi)的(de)發展,B細(xi)胞發育(yu)和(he)分化(hua)的(de)各個階(jie)段(duan)已變(bian)得可識(shi)別(bie)。此(ci)外(wai),FCM已經(jing)開始(shi)識別(bie)和(he)表(biao)征(zheng)幾個不(bu)同(tong)B細(xi)胞亞(ya)群和(he)相關(guan)診(zhen)所(suo)中(zhong)的(de)表(biao)達(da)譜。
流(liu)式(shi)細(xi)胞術分析(xi)血小(xiao)板(ban)功能有(you)較多優勢(shi)。它可以(yi)血小(xiao)板(ban)直接(jie)在(zai)全血的(de)生(sheng)理(li)環(huan)境(jing)中進(jin)行分析(xi)(包(bao)括紅(hong)細(xi)胞和(he)白(bai)細(xi)胞,兩(liang)者都影響(xiang)血小(xiao)板(ban)活化(hua))。樣本(ben)的簡(jian)化(hua)操(cao)作(zuo)可防(fang)止(zhi)人(ren)為的體(ti)外(wai)活化(hua)和(he)血小(xiao)板(ban)亞(ya)群的潛在損失。流(liu)式(shi)細(xi)胞術方法(fa)主(zhu)要(yao)用(yong)於檢(jian)測血小(xiao)板(ban)表(biao)面膜(mo)的(de)特(te)異(yi)性激活依(yi)賴(lai)性修(xiu)飾(shi)譜。此(ci)外(wai),隨(sui)著針(zhen)對新(xin)功能表(biao)位(wei)的新單克(ke)隆(long)抗體的(de)開(kai)發,它(ta)們比較容(rong)易地(di)並(bing)入分析(xi)中(zhong)。全血流(liu)式(shi)細(xi)胞術可檢(jian)測到僅有(you)1%部(bu)分活化(hua)血小(xiao)板(ban)的亞(ya)群,只(zhi)需(xu)微(wei)量(~5µL)血液(ye),使用(yong)流(liu)失細(xi)胞儀還可以(yi)準(zhun)確(que)分析(xi)嚴重血小(xiao)板(ban)減少(shao)癥者(zhe)的(de)血小(xiao)板(ban)。如果(guo)抗體試(shi)劑可用(yong),血小(xiao)板(ban)的流(liu)式(shi)細(xi)胞術評(ping)估(gu)同樣適(shi)用(yong)於動物研(yan)究。此外(wai),非物(wu)種特(te)異(yi)性(xing)的非(fei)抗體試(shi)劑(例(li)如(ru),自體配(pei)體(ti)[FITC纖維蛋白(bai)原(yuan)]、鈣(gai)指示(shi)劑、F-actin探(tan)針(zhen)[phalloidin]、核苷(gan)酸染(ran)料(liao)[噻(sai)唑(zuo)橙(cheng)]、活性(xing)染(ran)料(liao)和(he)膜(mo)聯蛋白(bai)V)等也常(chang)用(yong)在動物研(yan)究中。
流(liu)式(shi)細(xi)胞術其實(shi)是壹個平臺,可在(zai)此平臺上執行數十(shi)種(zhong)非(fei)常(chang)不(bu)同(tong)、高度專(zhuan)業化(hua)的(de)分析(xi),並(bing)提供同(tong)時執行許多這些(xie)分析(xi)的(de)能(neng)力。正是這(zhe)種分析(xi)的(de)多因(yin)素性(xing)質(zhi)使FACS成為當(dang)今免疫(yi)生(sheng)物學(xue)的(de)常(chang)用(yong)工具(ju)。FACS分析(xi)得(de)出(chu)的(de)數據(ju)具(ju)有(you)較高的信息密度,這對於闡(chan)明極其復雜(za)的(de)免疫(yi)系(xi)統(tong)是可行(xing)的。20世紀(ji)以(yi)來,FACS技(ji)術(shu)壹直在(zai)快(kuai)速(su)發展。這壹演變(bian)包括不(bu)斷(duan)將(jiang)應用(yong)程序(xu)註(zhu)入臨床(chuang)環(huan)境(jing)——事實(shi)上,事實(shi)上,幾乎(hu)每個現(xian)代醫院(yuan)都至少(shao)有(you)壹個這樣的(de)儀器,這(zhe)壹事實(shi)已經(jing)證明了FACS在診斷(duan)和(he)預後方(fang)面的作用(yong)。目前(qian)基礎(chu)研(yan)究實(shi)驗(yan)室(shi)正在開發的(de)化驗(yan),據(ju)推測將在未來(lai)十(shi)年成(cheng)為(wei)醫院(yuan)環(huan)境(jing)中的(de)常規化驗(yan)。
流(liu)式(shi)細(xi)胞術有(you)助(zhu)於AML亞(ya)類化(hua),而(er)無復(fu)發性(xing)細(xi)胞遺傳(chuan)學(xue)異(yi)常(chang)。例(li)如,根據WHO分類(FAB分類下(xia)的(de)AML M0),根據(ju)定義(yi),其(qi)通過(guo)細(xi)胞化學缺乏髓(sui)過氧化(hua)物酶反應性,依(yi)賴於FC建(jian)立(li)髓系(xi)。在急(ji)性粒單核(he)細(xi)胞白(bai)血病(bing)或急性(xing)單(dan)核細(xi)胞-單核細(xi)胞性白(bai)血病(bing)的偶(ou)發病(bing)例中(zhong),細(xi)胞化學顯(xian)示(shi)非特(te)異性(xing)酯酶(mei)活性(xing)很(hen)低(di),FC可以(yi)證實(shi)單核(he)細(xi)胞分化(hua)。FC鑒(jian)定(ding)白(bai)血病(bing)髓母(mu)細(xi)胞上的巨(ju)核(he)細(xi)胞相關抗原(yuan),如(ru)CD9、CD36、CD41和(he)CD61,為診(zhen)斷(duan)急(ji)性巨核(he)細(xi)胞白(bai)血病(bing)(FAB分類下(xia)的(de)AML M7)提供(gong)了重(zhong)要(yao)支(zhi)持,並(bing)有(you)助(zhu)於將(jiang)其與AML M0區(qu)分開(kai)來(lai)。
蘇州阿爾法生(sheng)物14年專(zhuan)註(zhu)於生(sheng)物實(shi)驗(yan)室(shi)儀器設(she)備(bei)的供(gong)應,所(suo)提(ti)供(gong)的(de)Luminex系列細(xi)胞分析(xi)儀主要(yao) 包(bao)括Amnis CellStream流(liu)式(shi)細(xi)胞儀,FlowSight多維全景(jing)流(liu)式(shi)細(xi)胞分析(xi)儀 ;Guava easyCyte微(wei)毛管(guan)細(xi)胞分析(xi)儀,Amnis ImageStream x Mk II量化(hua)成像(xiang)分析(xi)流(liu)式(shi)細(xi)胞儀以(yi)及Muse細(xi)胞分析(xi)儀等廣(guang)泛應用(yong)於細(xi)胞周期檢查(zha),抗體識(shi)別(bie),細(xi)胞雕亡檢(jian)測,細(xi)胞外(wai)泌體檢(jian)測,細(xi)胞結構研(yan)究,以(yi)及血小(xiao)板(ban)細(xi)胞分析(xi)等(deng)等(deng)細(xi)胞生(sheng)物學(xue)領(ling)域。
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