基於(yu)聚(ju)合物的(de)脂(zhi)質(zhi)體轉染試劑是(shi)什(shen)麽

細胞(bao)轉(zhuan)染是(shi)在體外 和 體(ti)內將(jiang)外源核(he)酸(suan)引(yin)入(ru)細胞(bao)的(de)過(guo)程(cheng) 。為了(le)進行轉(zhuan)染，使(shi)用脂(zhi)質(zhi)體、膠(jiao)束(shu)和其(qi)他類(lei)似化合物形式(shi)的脂(zhi)質(zhi)。這(zhe)些結(jie)構與細(xi)胞(bao)質(zhi)膜融(rong)合並(bing)將(jiang)貨物分(fen)子輸送(song)到細胞(bao)內部(bu)。脂(zhi)質(zhi)體轉染試劑通(tong)常(chang)適(shi)用(yong)於(yu)將生物活(huo)性物質(zhi)引入(ru)許(xu)多(duo)類(lei)型(xing)的(de)真(zhen)核(he)細(xi)胞(bao)，例(li)如蛋(dan)白(bai)質、DNA、RNA、肽和核(he)糖(tang)體。

基於(yu)聚(ju)合物的(de)轉染試劑

陽離子的脂(zhi)質(zhi)轉染試劑（帶負(fu)電(dian)荷的(de) DNA 與帶正電(dian)荷的(de)脂(zhi)質(zhi)體結(jie)合的(de)試劑）比如(ru)：Lipofectamine 2000 轉染試劑、Lipofectamine 3000轉染試劑等這(zhe)些轉染試劑簡(jian)單易(yi)用(yong)，在許(xu)多(duo)細(xi)胞(bao)系(xi)中都被廣(guang)泛(fan)使(shi)用。但(dan)是(shi)脂(zhi)質(zhi)體轉染試劑在基於(yu)血(xue)清的培養基中(zhong)或在細(xi)胞(bao)培養中使(shi)用抗生素(su)時通(tong)常(chang)轉(zhuan)染效(xiao)率(lv)較(jiao)低(di)。  而(er)聚合物轉(zhuan)染試劑是(shi)基於(yu)脂(zhi)質(zhi)轉染試劑上(shang)的優(you)化(hua)，當(dang)以(yi)合適(shi)濃度使(shi)用時，這(zhe)些試劑表現出低(di)毒(du)性。所以基於(yu)聚(ju)合物的(de)轉染越(yue)來(lai)越(yue)受(shou)歡迎(ying)，因為它(ta)們的化(hua)學多(duo)功(gong)能(neng)性使(shi)其(qi)易(yi)於(yu)生產(chan)和修飾具有(you)多(duo)種(zhong)功(gong)能(neng)的不同聚合物結(jie)構。基於(yu)聚(ju)合物的(de)轉染試劑可(ke)用於轉(zhuan)染懸浮(fu)培養物、原(yuan)代細(xi)胞(bao)、多(duo)種(zhong)真(zhen)核(he)細(xi)胞(bao)系(xi)和貼(tie)壁細(xi)胞(bao)。

隨著(zhe)對(dui)新(xin)的(de)基於(yu)聚(ju)合物的(de)轉染方法(fa)的(de)不斷(duan)的(de)研(yan)究和(he)開發。細胞(bao)轉(zhuan)染技術也(ye)不斷(duan)面(mian)臨著(zhe)新(xin)的(de)要(yao)求和挑戰，尤其(qi)是(shi)體內轉(zhuan)染采(cai)用脂(zhi)質(zhi)體轉染試劑的方(fang)法(fa)轉(zhuan)染可(ke)能(neng)會引(yin)起體內的(de)炎(yan)癥(zheng)反應。基於(yu)聚(ju)合物的(de)新(xin)的(de)轉染方法(fa)為轉(zhuan)染各(ge)種細胞(bao)類(lei)型(xing)和(he)加(jia)速未(wei)來(lai)研(yan)究提(ti)供(gong)了(le)新(xin)的(de)可(ke)能(neng)性。這(zhe)是(shi)壹(yi)種(zhong)基於(yu)陽離子兩親嵌段(duan)共(gong)聚(ju)物的(de)基因傳(chuan)遞方(fang)法(fa)，可(ke)以有(you)效(xiao)地(di)減少不良反應並(bing)成(cheng)功(gong)修(xiu)飾出生後(hou)的(de) CNS 細胞(bao)。

陽離子聚合物轉(zhuan)染試劑的技(ji)術原理(li)

常(chang)用(yong)的(de)陽離子聚合物是(shi)組蛋(dan)白(bai)、聚-L-賴氨酸、聚酰(xian)胺(an)胺(an)樹(shu)枝狀(zhuang)大分子和魚(yu)精蛋(dan)白(bai)。在結(jie)構上(shang)，陽離子聚合物分(fen)子可(ke)以是(shi)線(xian)性的(de)或高度支(zhi)化的。基於(yu)陽離子聚合物的(de)轉染試劑主要(yao)通(tong)過(guo)濃縮(suo) DNA 來(lai)提高轉染效(xiao)率(lv)。外源 DNA 與(yu)陽離子聚合物分(fen)子形成(cheng)復(fu)合物，導(dao)致(zhi)宿(xiu)主細胞(bao)通(tong)過(guo)內吞(tun)作(zuo)用(yong)攝(she)取 DNA/聚(ju)合物復(fu)合物。 陽離子聚合物的(de)轉染試劑具有(you)生物相容(rong)性，可(ke)增強穩定(ding)性並(bing)促進(jin)被吞(tun)沒的遺(yi)傳(chuan)物質(zhi)從內體(ti)中成(cheng)功(gong)釋(shi)放。

這(zhe)些新(xin)的(de)基於(yu)聚(ju)合物的(de)轉染試劑由(you)可(ke)生物降(jiang)解(jie)和微(wei)疏水的聚合物組(zu)成(cheng)，主(zhu)要(yao)作(zuo)用(yong)是(shi)將外源遺傳(chuan)物質(zhi)轉移(yi)到培養細胞(bao)中(zhong)。有(you)些(xie)聚(ju)乙(yi)烯(xi)亞胺類的轉(zhuan)染試劑還可(ke)用於幫(bang)助(zhu) 質粒(li) 在(zai)無(wu)血清培養基中(zhong)的(de)吸(xi)收。

基於(yu)聚(ju)合物的(de)轉染試劑的優(you)化

基於(yu)聚(ju)合物的(de)轉染試劑也(ye)會引(yin)起細胞(bao)毒(du)性，因此需要(yao)針對(dui)特定細胞(bao)類(lei)型(xing)的(de)轉(zhuan)染進行優(you)化。早(zao)期(qi)的陽離子聚合物實(shi)驗表明，短(duan)側(ce)鏈聚(ju)合物的(de)轉染能(neng)力較(jiao)差，但(dan)在核(he)內轉(zhuan)錄(lu)方面(mian)表現更好，並(bing)與核(he)酸(suan)形成(cheng)穩(wen)定的低(di)電(dian)荷小(xiao)復合物。另(ling)壹(yi)方(fang)面，長鏈聚(ju)合物表現出較(jiao)好的(de)轉染效(xiao)率(lv)，但(dan)形成(cheng)的(de)具有(you)高正電荷的(de)不太穩(wen)定(ding)的復(fu)合物。近(jin)期(qi)實(shi)驗表明，富(fu)含(han)咪(mi)唑的陽離子聚合物顯示出(chu)較(jiao)高的轉染效(xiao)率(lv)和更低(di)的(de)毒(du)性。