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實(shi)驗室(shi)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)的儀器(qi)和(he)實(shi)驗室(shi)耗(hao)材有(you)哪些(xie)?
更新(xin)時(shi)間(jian):2022-03-25
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用於(yu)動物細胞(bao)培(pei)養(yang)的實(shi)驗室(shi)儀器(qi)設(she)備和(he)實(shi)驗室(shi)耗(hao)材有(you)很多(duo)種,進(jin)行動(dong)物細胞(bao)培(pei)養(yang)所需(xu)的(de)基(ji)本(ben)設(she)備如下(xia):
設(she)備 | 有益(yi)設(she)備 | 有用的(de)附加(jia)設(she)備 |
振蕩培(pei)養(yang)箱 | 生物安全櫃(gui) | 低(di)溫冷凍(dong)櫃(gui) |
顯微鏡 | 細胞(bao)計(ji)數(shu)儀 | 玻璃器(qi)皿(min)清(qing)洗(xi)機 |
滅(mie)菌(jun)器(qi) | 真空(kong)泵 | 菌(jun)落櫃(gui)臺 |
清(qing)洗(xi)儀器(qi) | 二氧化(hua)碳(tan)培(pei)養(yang)箱 | 共(gong)聚(ju)焦顯微鏡 |
殺菌(jun)幹(gan)燥(zao)箱 | 制(zhi)備和(he)質(zhi)量(liang)控(kong)制 | 熒(ying)光激(ji)活(huo)細胞(bao)分(fen)選儀 |
離心機 | 溫度記錄 | |
純(chun)水(shui)機 | 細(xi)胞(bao)生物反應器(qi) | |
液氮(dan)罐 | 移(yi)液器(qi)和(he)自(zi)動移(yi)液器(qi) | |
水(shui)浴(yu)鍋(guo) |
1. 無菌(jun)工(gong)作區(qu)/細胞(bao)培(pei)養(yang)罩(zhao)(即層(ceng)流罩(zhao)或(huo)生物安全櫃(gui))
2. 培養(yang)箱(推薦(jian)使(shi)用潮(chao)濕的(de)二氧化(hua)碳(tan)培(pei)養(yang)箱)
3. 水(shui)浴(yu)
4. 離(li)心機
5. 冰(bing)箱和(he)冰(bing)櫃(gui) (–20°C)
6. 細胞(bao)計(ji)數(shu)器(qi)(例如自(zi)動細胞(bao)計(ji)數(shu)器(qi)或血細胞(bao)計(ji)數(shu)器(qi))
7. 倒置(zhi)顯微鏡
8. 液(ye)氮(dan) (N 2 ) 冷凍(dong)箱或低(di)溫儲存容(rong)器(qi)
9. 滅菌(jun)器(qi)(即高(gao)壓(ya)滅菌(jun)器(qi))

§ 為了(le)保(bao)持清(qing)潔(jie)的細胞(bao)培(pei)養(yang)工(gong)作,如(ru)果可能(neng),有必(bi)要準(zhun)備壹個(ge)單(dan)獨(du)的房(fang)間(jian)或空間(jian)。
§ 這(zhe)個(ge)房(fang)間(jian)應該(gai)是(shi)密閉的(de),另(ling)外(wai)需要配(pei)備壹個(ge)氣流櫃(gui),已(yi)提(ti)供(gong)潔(jie)凈(jing)的(de)空(kong)氣,壹些(xie)實(shi)驗室(shi)還(hai)會采用HEPA空(kong)氣過濾(lv)器(qi)。實驗室(shi)必(bi)須(xu)是為潔(jie)培養(yang)工(gong)作二設(she)計,嚴(yan)格(ge)限制在細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)實驗室(shi)內(nei)或附近培(pei)養(yang)原代動(dong)物組織和(he)微生物。
§ 實驗室(shi)外(wai)套(tao)應放在實(shi)驗室(shi)入(ru)口處,不(bu)得(de)在(zai)實(shi)驗室(shi)外(wai)使(shi)用。
§ 生物安全櫃(gui)既可以提(ti)供(gong)無菌(jun)的(de)條件,而且還可以控制傳(chuan)染(ran)性的(de)飛(fei)濺物或氣溶(rong)膠(jiao)。
§ 為滿(man)足多(duo)樣化(hua)的研究(jiu)需(xu)要,生物安全櫃(gui)壹般(ban)有(you)I、II、III三(san)類(lei)。
§ I 類(lei)層(ceng)安(an)全櫃(gui)為實(shi)驗室(shi)工(gong)作人(ren)員(yuan)和(he)環境(jing)提(ti)供(gong)了(le)基(ji)本(ben)水(shui)平(ping)的(de)保(bao)護(hu),但它(ta)們不(bu)能(neng)保(bao)護(hu)培養(yang)物免受汙(wu)染(ran)。 它(ta)們在設(she)計和(he)氣流特(te)性(xing)方面與化(hua)學通風櫃(gui)基(ji)本(ben)相(xiang)同(tong)。
§ 對於(yu)涉(she)及(ji) BSL-1、2 和(he) 3 材(cai)料(liao)的工(gong)作或(huo)者(zhe)細胞(bao)培(pei)養(yang)時(shi)為了(le)處理有(you)害(hai)物質(zhi)(例如,靈長類動物培養(yang)物、病毒(du)感染培養(yang)物、放射性(xing)同位(wei)素(su)、致(zhi)癌(ai)或有(you)毒(du)試劑),應使(shi)用 II 類(lei)生物安全櫃(gui)。
§ 清(qing)潔(jie)工(gong)作臺:垂直(zhi)層(ceng)流或水(shui)平(ping)層(ceng)流潔(jie)凈(jing)工(gong)作臺是將(jiang)經過 HEPA 過濾(lv)的(de)空(kong)氣從(cong)機櫃(gui)後部(bu)穿過工(gong)作臺表面(mian)有(you)助於(yu)保(bao)護(hu)樣品而不(bu)是(shi)工(gong)作人(ren)員(yuan)。
§ 為了(le)在 30-40 0 C下(xia)為細(xi)胞(bao)生長提(ti)供(gong)合(he)適的溫度環境(jing),需要壹個(ge)培(pei)養(yang)箱。
§ 根據(ju)培(pei)養(yang)的細(xi)胞(bao)類(lei)型,孵育(yu)溫度會有所不(bu)同(tong)。
§ CO2 振蕩培(pei)養(yang)箱時(shi)壹種可以自(zi)動進行(xing)控(kong)溫、濕度和(he)氣體調(tiao)節(jie)的培(pei)養(yang)箱,可以使(shi)培(pei)養(yang)基(ji)中(zhong),CO2 的濃(nong)度與碳(tan)酸(suan)氫(qing)鈉(na)保(bao)持平衡(heng)。細胞(bao)培(pei)養(yang)時(shi),壹般(ban)保(bao)持培養(yang)箱中保(bao)持 2-5% CO2 氣體含(han)量(liang)。
§ 冰箱和(he)冰(bing)櫃(gui)對於(yu)在 2–8°C 下(xia)儲存液(ye)體(ti)培養(yang)基(ji)以(yi)及(ji)在(zai) –5°C 到(dao) –20°C 下(xia)儲存酶(mei)和(he)某(mou)些(xie)培(pei)養(yang)基(ji)成分都非(fei)常重(zhong)要。
§ 要儲存培(pei)養(yang)基(ji)和(he)緩(huan)沖(chong)液(ye),需(xu)要冰(bing)箱或冷(leng)藏室(shi)。
§ 需(xu)要低(di)溫冰箱來保(bao)存(cun)預(yu)先(xian)分(fen)裝的血清(qing)、營養(yang)物質(zhi)和(he)抗生素(su)。
§ 低(di)溫儲存
§ 隨(sui)著(zhe)傳(chuan)代(dai)次(ci)數(shu)的增(zeng)加(jia),連續(xu)培(pei)養(yang)的細(xi)胞(bao)系遺(yi)傳(chuan)不(bu)穩定(ding)的(de)可能(neng)性很大,因(yin)此(ci),有(you)必(bi)要制(zhi)備細(xi)胞(bao)的(de)工(gong)作原液並(bing)保(bao)存(cun)在低(di)溫儲存中(zhong)。
§ 需(xu)要註(zhu)意的是,細胞(bao)不(bu)應儲存在(zai) 20 o C 或(huo) -80 o C 的冰箱中,因(yin)為當(dang)它(ta)們不(bu)在(zai)這(zhe)些(xie)溫度下(xia)儲存時(shi),它(ta)們的活(huo)力(li)會降(jiang)低(di)。
§ 檢(jian)查(zha)細(xi)胞(bao)壹般(ban)使(shi)用倒(dao)置(zhi)顯微鏡即可。
§ 盡(jin)管染色(se)體分(fen)析或放射自(zi)顯影工(gong)作需(xu)要非(fei)常高(gao)質(zhi)量(liang)的(de)顯微鏡,但(dan)放大倍數(shu)為 X100 的(de)簡單的光學顯微鏡足以在(zai)血細胞(bao)計(ji)數(shu)器(qi)中進(jin)行常(chang)規(gui)細胞(bao)計(ji)數(shu)。
§ 多(duo)種組(zu)織培(pei)養(yang)塑料(liao)器(qi)皿(min),最常(chang)見的是經(jing)過特(te)殊(shu)處理的(de)聚(ju)苯(ben)乙(yi)烯。
§ 少量(liang)的(de)細胞(bao)培(pei)養(yang)壹般(ban)在(zai)25 cm2 或 75 cm2培(pei)養(yang)皿(min)或細胞(bao)培(pei)養(yang)瓶中(zhong)進(jin)行(xing),而後再轉(zhuan)移(yi)至搖(yao)瓶(ping)中,置(zhi)於(yu)二氧化(hua)碳(tan)培(pei)養(yang)箱中擴(kuo)培(pei),大規(gui)模細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)還需(xu)要借(jie)助生物反應器(qi)等設(she)備。
§ 玻璃器(qi)皿(min)如移(yi)液器(qi)應浸(jin)泡(pao)在(zai)合(he)適的清(qing)潔(jie)劑中,然後經過嚴(yan)格(ge)的洗滌程序(xu),在(zai)幹燥(zao)和(he)滅(mie)菌(jun)之前用蒸(zheng)餾(liu)水(shui)*浸(jin)泡(pao)。
§ 玻璃器(qi)皿(min)如移(yi)液管(guan)、錐形瓶、燒(shao)杯(bei)(用鋁箔(bo)覆(fu)蓋(gai))在 160°C 的(de)熱空(kong)氣烘(hong)箱中消(xiao)毒(du)壹小(xiao)時(shi)。
§ 所(suo)有其他(ta)設(she)備,如自(zi)動移(yi)液器(qi)吸(xi)頭和(he)瓶(ping)子(zi)(蓋(gai)子(zi)松(song)散(san)連接)均通(tong)過 121 °C 高壓滅(mie)菌(jun) 20 分(fen)鐘進行滅(mie)菌(jun)。
§ 為了(le)準備(bei)培(pei)養(yang)基(ji)和(he)沖(chong)洗(xi)玻璃器(qi)皿(min),需要雙(shuang)蒸(zheng)或(huo)反(fan)滲(shen)透水(shui)供(gong)應。
§ 應定(ding)期檢(jian)查(zha)雙(shuang)蒸(zheng)水(shui)的(de) pH 值(zhi),因(yin)為在(zai)某(mou)些(xie)情(qing)況下(xia)可能(neng)會有所不(bu)同(tong)。
§ 使(shi)用的(de)水(shui)質(zhi)量(liang)的(de)變(bian)化可能(neng)會導(dao)致(zhi)結果的變(bian)化,因(yin)此(ci)有(you)必(bi)要使(shi)用單(dan)壹來(lai)源的(de)水(shui)。
§ 通(tong)過高壓滅(mie)菌(jun)將(jiang)水(shui)在(zai) 121 °C 下(xia)滅(mie)菌(jun) 20 分(fen)鐘。
§ 不(bu)能(neng)高壓(ya)滅菌(jun)的(de)培養(yang)基(ji)必(bi)須(xu)通過孔徑(jing)為 0.22 μm 的(de)膜過濾(lv)器(qi)進行(xing)滅菌(jun)。
§ 為了(le)增(zeng)加(jia)細(xi)胞(bao)濃(nong)度或洗去(qu)試劑,細(xi)胞(bao)懸液(ye)需要進(jin)行離(li)心操(cao)作。
§ 可以使(shi)用的(de)離(li)心機有(you)臺式離(li)心機、小(xiao)型離心機、落地式離(li)心機和(he)冷(leng)凍(dong)離(li)心機等(deng)。
§ 用於(yu)動物培養(yang)的其他(ta)附加(jia)實(shi)驗室(shi)儀器(qi)設(she)備和(he)實(shi)驗室(shi)耗(hao)材如(ru)下(xia):
§ 蠕動(dong)泵貨(huo)真空(kong)泵
§ PH計
§ 細胞(bao)生物反應器(qi)【大規(gui)模培(pei)養(yang)】
§ 共(gong)聚(ju)焦顯微鏡
§ 流式細(xi)胞(bao)儀
§ 細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)瓶
§ 細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)皿(min)
§ 滾(gun)瓶或(huo)搖(yao)瓶(ping)、細胞(bao)培(pei)養(yang)瓶
§ 移(yi)液器(qi)和(he)移(yi)液器(qi)吸(xi)頭
§ 廢(fei)物容器(qi)
§ 培養(yang)基(ji)、血清(qing)和(he)試劑
§ 細(xi)胞(bao)
1. pH計(ji):
§ PH計(ji)是(shi)壹種計(ji)算溶(rong)液(ye)中氫(qing)離(li)子(zi)(酸(suan)度或堿度)活(huo)度的電子(zi)儀器(qi)。
§ pH 計必(bi)須(xu)包(bao)括連接到(dao) pH 響應電極和(he)參考(不(bu)變(bian))電極的(de)電壓表。
§ pH 響應電極通(tong)常是(shi)玻璃,汞-氯(lv)化亞汞(gong)(甘(gan)汞)電極通(tong)常是(shi)參考電極,但(dan)有時(shi)也(ye)使(shi)用銀(yin)-氯(lv)化銀電極。
§ 共(gong)聚(ju)焦顯微鏡是(shi)壹種特(te)殊(shu)類型的標(biao)準熒(ying)光顯微鏡(也(ye)稱(cheng)為寬(kuan)場(chang)熒(ying)光顯微鏡),它(ta)使(shi)用特(te)定(ding)的(de)光學組件產(chan)生用熒(ying)光探(tan)針染色的材料(liao)的高(gao)分(fen)辨(bian)率圖(tu)像(xiang)。
§ 流式細(xi)胞(bao)術(shu)是(shi)壹種細(xi)胞(bao)分(fen)析(xi)方(fang)法,在 1950 年代用於(yu)確定(ding)流體流中的(de)細(xi)胞(bao)體(ti)積(ji),當(dang)它(ta)們在觀(guan)察孔前流動時(shi),流體流會快速(su)循環。
§ 流體、光學和(he)電子(zi)是(shi)流式細(xi)胞(bao)儀的(de)三(san)個(ge)主(zhu)要組(zu)成部分(fen)。
§ 樣品從(cong)樣品管到(dao)流動池(chi)的(de)傳(chuan)輸(shu)是(shi)流式細(xi)胞(bao)儀的(de)流體系統的功能(neng)。
§ 樣品要麽(me)被分(fen)選(在細(xi)胞(bao)分(fen)選機的(de)情(qing)況下(xia)),要麽(me)在通(tong)過流通池(chi)(並(bing)通過激(ji)光)後被(bei)運(yun)送到廢物中。
§ 光學系統組件(jian)包(bao)括激(ji)發光源、透鏡和(he)用於(yu)在儀器(qi)周(zhou)圍捕獲(huo)和(he)移(yi)動光的濾(lv)光片以(yi)及(ji)光電流產(chan)生檢(jian)測系統。
§ 所有(you)的培(pei)養(yang)細胞(bao)的(de)容(rong)器(qi)起初都是(shi)玻璃的。
§ 與塑料(liao)相(xiang)比(bi),玻璃的缺點(dian)包(bao)括重(zhong)量(liang)大、成本(ben)高、清(qing)潔(jie)勞動強度大和(he)顯微鏡觀(guan)察效果差。
§ 1960 年代(dai)為聚(ju)苯(ben)乙(yi)烯開(kai)發了(le)表面(mian)處理技(ji)術(shu),使(shi)塑料(liao)容器(qi)能(neng)夠代替玻璃用於(yu)大多(duo)數(shu)細胞(bao)培(pei)養(yang)應用。
培(pei)養(yang)瓶瓶(ping)說(shuo)明 | 生長面(mian)積(ji)(cm 2 ) | 推薦(jian)工(gong)作體(ti)積(ji) (ml) | 細胞(bao)產(chan)量(liang) |
T-25 | 25 | 5-10 | 2.5×10 6 |
T-75 | 75 | 15-25 | 7.5×10 6 |
T-150 | 150 | 30-50 | 15.0 X 10 6 |
T-175 | 175 | 35-60 | 17.5 X 10 6 |
T-225 | 225 | 45-75 | 22.5 X 10 6 |
A.。細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)皿(min):
§ 細胞(bao)培(pei)養(yang)皿(min)提(ti)供(gong)了(le)較佳的經(jing)濟(ji)性和(he)進(jin)入(ru)生長表面(mian)的(de)途徑(jing)。
§ 它(ta)們應該(gai)與二氧化(hua)碳(tan)振蕩培(pei)養(yang)箱壹起(qi)使(shi)用。
§ 大多(duo)數(shu)制造(zao)商提(ti)供(gong)四種培(pei)養(yang)皿(min):35 毫米(mi)、60 毫米(mi)、100 毫米(mi)和(he) 150 毫(hao)米(mi)。
§ 細胞(bao)培(pei)養(yang)皿(min)主要用於(yu)培養(yang)貼(tie)壁細胞(bao)。
細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)皿(min)說明 | 生長良(liang)好(hao) (cm 2 ) | 工(gong)作容(rong)積(ji)(ml) | 細胞(bao)產(chan)量(liang) |
96孔 | 0.32 | 0.1-0.2 | 0.32×10 5 |
48孔 | 1.00 | 0.3-0.6 | 0.8×10 5 |
24孔 | 1.88 | 0.5-1.2 | 1.9×10 5 |
12孔 | 3.83 | 1.0-2.4 | 3.8×10 5 |
6孔 | 9.40 | 2.0-3.0 | 9.5×10 5 |
B。 滾(gun)瓶:
§ 為了(le)增(zeng)加(jia)貼(tie)壁細胞(bao)數(shu)量(liang),壹般(ban)使(shi)用滾(gun)瓶、搖(yao)瓶(ping)培養(yang),細胞(bao)培(pei)養(yang)瓶的(de)使(shi)用與燒(shao)瓶(ping)基(ji)本(ben)相(xiang)同(tong)但勞動力(li)大大減(jian)少。
滾(gun)瓶的(de)說明 | 生長面(mian)積(ji)(cm 2) | 工(gong)作容(rong)積(ji)(mL) | 細胞(bao)產(chan)量(liang) |
小的 | 490 | 100-150 | 4.9×10 5 |
標(biao)準 | 850 | 170-250 | 8.5×10 5 |
制(zhi)藥 | 1750 | 340-500 | 17.5 X 10 5 |
C . 移(yi)液器(qi)和(he)移(yi)液管(guan):
§ 血清(qing)移(yi)液管(guan)是壹種相(xiang)對常(chang)見的實驗室(shi)儀器(qi),用於(yu)轉(zhuan)移(yi)毫升(sheng)體積(ji)的(de)液體。
§ 為了(le)計算被(bei)吸(xi)出或(huo)分配(pei)的液體(ti)體(ti)積(ji),血清(qing)移(yi)液管(guan)通常沿其側(ce)面有(you)刻(ke)度。
§ 這(zhe)些(xie)儀器(qi)最常(chang)與移(yi)液器(qi)分液(ye)器(qi)壹起(qi)使(shi)用,通(tong)過產(chan)生部分(fen)真空(kong)來(lai)增(zeng)強液(ye)體轉(zhuan)移(yi)。
§ 根據(ju)您(nin)想要通(tong)過的體積(ji)量(liang),相(xiang)同(tong)的移(yi)液器(qi)分液(ye)器(qi)可與多(duo)種血清(qing)移(yi)液器(qi)尺寸壹起(qi)使(shi)用。
§ 血清(qing)移(yi)液管(guan)通常是可消毒(du)和(he)可重復使(shi)用的(de),可以是塑料(liao)的、無菌(jun)的(de)、壹次(ci)性的(de)或玻璃的。
§ 對於(yu)液體(ti)的轉(zhuan)移(yi)可使(shi)用移(yi)液器(qi)來進(jin)行操(cao)作。
蘇州阿爾(er)法生物13年專註(zhu)於(yu)生命科(ke)學儀器(qi)和(he)試劑耗(hao)材的(de)供(gong)應,產(chan)品包(bao)括生物安全櫃(gui)、超凈(jing)臺、細胞(bao)培(pei)養(yang)生物反應器(qi)、移(yi)液器(qi)、 動物細胞(bao)培(pei)養(yang)設(she)備、二氧化(hua)碳(tan)培(pei)養(yang)箱、流式細(xi)胞(bao)儀、發酵(jiao)罐、搖(yao)瓶(ping)、滾(gun)瓶、培(pei)養(yang)瓶、培(pei)養(yang)皿(min)、移(yi)液器(qi)、移(yi)液器(qi)吸(xi)頭等(deng)
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