類器官增殖(zhi)培(pei)養(yang)基(ji)與(yu)分化(hua)培(pei)養(yang)基(ji)在成(cheng)分、功(gong)能及使(shi)用(yong)場(chang)景(jing)上(shang)存在較(jiao)大(da)差(cha)異，以(yi)下從兩(liang)者的核心區(qu)別(bie)、具(ju)體(ti)用(yong)途及使(shi)用(yong)要(yao)點展(zhan)開說(shuo)明：

壹(yi)、核心區(qu)別(bie)：成(cheng)分與功(gong)能定(ding)位(wei)

1. 類器官增殖(zhi)培(pei)養(yang)基(ji)

成(cheng)分特點：

以基(ji)礎(chu)培(pei)養(yang)基(ji)（如(ru) DMEM/F12、MEM 等）為(wei)基(ji)質，添(tian)加高(gao)濃度(du)生(sheng)長因子（如 EGF 、FGF、Noggin、R-spondin 1 等）、細(xi)胞(bao)因子（如 BMP、Wnt 信號激(ji)活劑）、激(ji)素（如(ru)胰(yi)島(dao)素、氫(qing)化(hua)可的松）及基(ji)質(zhi)成分（如胎牛血清、B27 添加劑(ji)、 N2 添(tian)加劑(ji)）。

部分培(pei)養(yang)基(ji)需(xu)額(e)外添(tian)加基(ji)質(zhi)膠(jiao)（如 Matrigel），模(mo)擬細(xi)胞(bao)外基(ji)質環(huan)境，支持類器官三(san)維結(jie)構(gou)形成(cheng)。

功(gong)能核(he)心：

維持幹(gan)細(xi)胞(bao)或(huo)祖(zu)細(xi)胞(bao)的(de)未(wei)分化(hua)狀(zhuang)態，促進(jin)其(qi)自我(wo)更新和(he)增殖(zhi)，同時(shi)誘導細(xi)胞(bao)有(you)序(xu)組裝(zhuang)成(cheng)具(ju)有器官雛形(xing)的(de)三(san)維結(jie)構(gou)（如腸(chang)類器官、肝類器官等）。重(zhong)點在於(yu)保留(liu)細(xi)胞(bao)多(duo)能性(xing)，避免(mian)細(xi)胞(bao)向(xiang)特(te)定(ding)譜系(xi)分化(hua)。

2. 類器官分化(hua)培(pei)養(yang)基(ji)

成(cheng)分特點：

  基礎(chu)培(pei)養(yang)基(ji)與(yu)增(zeng)殖(zhi)培(pei)養(yang)基(ji)類似，但(dan)生(sheng)長因子濃度(du)降(jiang)低或替換，常添加分化(hua)誘導因子（如視黃酸(suan)、地塞(sai)米(mi)松(song)、β- 巰基乙(yi)醇等）、特(te)定(ding)譜系(xi)誘(you)導因子（如心肌分化(hua)需添加 BMP4、 Activin A）及營(ying)養(yang)因子（如維生(sheng)素、氨(an)基酸(suan)）。

通(tong)常減少(shao)或去(qu)除(chu)維持自(zi)我更新的(de)因子（如 Wnt 激(ji)動劑(ji)），避免(mian)細(xi)胞(bao)持續(xu)增殖(zhi)。

功(gong)能核(he)心：

定(ding)向(xiang)誘導類器官中的(de)幹(gan)細(xi)胞(bao)向(xiang)特(te)定(ding)組織細(xi)胞(bao)分化(hua)（如神經類器官分化(hua)為神經元(yuan)、膠(jiao)質細(xi)胞(bao)，胰(yi)腺類器官分化(hua)為胰(yi)島(dao) β 細(xi)胞(bao)），促(cu)進(jin)功(gong)能細(xi)胞(bao)成(cheng)熟(shu)，形成具有特(te)定(ding)生(sheng)理功(gong)能的(de)組織結(jie)構(gou)。

二、使(shi)用(yong)場(chang)景(jing)與操(cao)作流程(cheng)

1. 類器官增殖(zhi)培(pei)養(yang)基(ji)的(de)使(shi)用(yong)

適(shi)用(yong)階(jie)段：

類器官初始(shi)建立(li)：從(cong)原代(dai)組織分離(li)幹細(xi)胞(bao)或(huo)使(shi)用(yong)多(duo)能幹(gan)細(xi)胞(bao)（iPSC/ESC），在增(zeng)殖(zhi)培(pei)養(yang)基(ji)中(zhong)培(pei)養(yang)，形(xing)成(cheng)初(chu)始類器官結(jie)構(gou)。

類器官傳(chuan)代擴增(zeng)：維持類器官的長期培(pei)養(yang)和(he)傳(chuan)代，避免(mian)分化(hua)丟失(shi)。

操(cao)作要點：

基質(zhi)膠(jiao)包埋：將細(xi)胞(bao)與(yu)基(ji)質膠(jiao)混合後鋪板(ban)，培(pei)養(yang)基(ji)需(xu)覆(fu)蓋(gai)膠(jiao)滴，確保三(san)維生(sheng)長環(huan)境。

換液(ye)頻率(lv)：通(tong)常每 2-3 天換液(ye)壹(yi)次(ci)，避免(mian)營(ying)養(yang)耗(hao)竭(jie)或(huo)代謝(xie)廢(fei)物積累。

培(pei)養(yang)條(tiao)件(jian)：恒溫（37℃）、5% CO₂，部分類器官需特(te)殊(shu)氣體(ti)環(huan)境（如低氧(yang)條(tiao)件(jian)）。

2. 類器官分化(hua)培(pei)養(yang)基(ji)的(de)使(shi)用(yong)

適(shi)用(yong)階(jie)段：

類器官成熟(shu)分化(hua)：在增(zeng)殖(zhi)培(pei)養(yang)基(ji)中(zhong)形(xing)成初始類器官後（如(ru)培(pei)養(yang) 7-10 天），切換為分化(hua)培(pei)養(yang)基(ji)，誘(you)導特(te)定(ding)譜系(xi)分化(hua)。

功(gong)能研(yan)究(jiu)：如需獲(huo)得(de)具有(you)特(te)定(ding)功(gong)能的(de)細(xi)胞(bao)（如(ru)分泌胰(yi)島(dao)素的(de)胰(yi)島(dao)細(xi)胞(bao)），需(xu)通(tong)過分化(hua)培(pei)養(yang)基(ji)定(ding)向(xiang)誘導。

操(cao)作要點：

分化(hua)時機(ji)：類器官需先(xian)在增(zeng)殖(zhi)培(pei)養(yang)基(ji)中(zhong)形(xing)成穩定(ding)結(jie)構(gou)，再進(jin)行分化(hua)誘導（過早(zao)分化(hua)會(hui)導致(zhi)結(jie)構(gou)紊亂(luan)，過晚(wan)則(ze)分化(hua)效率降(jiang)低）。

分步(bu)誘導：部分分化(hua)過程(cheng)需(xu)分階段調整(zheng)培(pei)養(yang)基(ji)成(cheng)分（如先(xian)誘(you)導內胚(pei)層(ceng)，再(zai)誘導特(te)定(ding)器官細(xi)胞(bao)）。

動態監測：通(tong)過免(mian)疫熒光(guang)、RT-PCR 等方(fang)法(fa)檢測分化(hua)標誌(zhi)物（如(ru)神經分化(hua)檢測 β-III tubulin，肝分化(hua)檢測 ALB），確認分化(hua)效率。

三(san)、對比總結(jie)：成(cheng)分與功(gong)能差(cha)異表(biao)

四(si)、註(zhu)意事(shi)項(xiang)

培(pei)養(yang)基(ji)優(you)化(hua)：不同組織來(lai)源的類器官（如腸(chang)道(dao)、肺、腦）需定(ding)制化(hua)增殖(zhi)培(pei)養(yang)基(ji)，分化(hua)培(pei)養(yang)基(ji)也(ye)需根(gen)據目(mu)標細(xi)胞(bao)類型(xing)調(tiao)整配(pei)方(fang)（如(ru)心(xin)肌(ji)分化(hua)需添加心(xin)肌(ji)營(ying)養(yang)素 - 1）。

避免(mian)交叉汙(wu)染(ran)：分化(hua)培(pei)養(yang)基(ji)中(zhong)若(ruo)殘留自(zi)我(wo)更新(xin)因子，可能導致(zhi)分化(hua)失(shi)敗(bai)；增殖(zhi)培(pei)養(yang)基(ji)中(zhong)若(ruo)混入(ru)分化(hua)因子，會(hui)誘(you)導細(xi)胞(bao)提(ti)前分化(hua)。

動態調整(zheng)：部分類器官分化(hua)需 “兩步(bu)法(fa)"—— 先(xian)在增(zeng)殖(zhi)培(pei)養(yang)基(ji)中(zhong)形(xing)成芽狀(zhuang)結(jie)構(gou)，再切換分化(hua)培(pei)養(yang)基(ji)誘(you)導功(gong)能成(cheng)熟（如(ru)腎(shen)臟類器官分化(hua)為腎(shen)小球、腎(shen)小管）。

通(tong)過精準(zhun)調控(kong)培(pei)養(yang)基(ji)成(cheng)分，可實(shi)現(xian)類器官從 “結(jie)構(gou)構建" 到 “功(gong)能成(cheng)熟" 的(de)全(quan)過程(cheng)誘(you)導，為(wei)疾病建模(mo)、藥物(wu)篩選及再(zai)生(sheng)醫學(xue)研究(jiu)提(ti)供關鍵(jian)工(gong)具(ju)。

蘇州阿(e)爾法(fa)生(sheng)物(wu)提(ti)供的「壹(yi)站式(shi)」腸(chang)類器官構建試(shi)劑(ji)盒是(shi)為簡化(hua)類器官培(pei)養(yang)流(liu)程(cheng)、提(ti)升實(shi)驗(yan)效(xiao)率(lv)研(yan)發(fa)的(de)壹(yi)體(ti)化(hua)產品。試劑(ji)盒(he)包含組織處(chu)理、細(xi)胞(bao)分離(li)、基質(zhi)膠(jiao)包埋、培(pei)養(yang)基(ji)優(you)化(hua)等全(quan)流(liu)程(cheng)必(bi)需試(shi)劑(ji)與(yu)耗(hao)材(cai)，客戶(hu)僅需配(pei)備(bei)離(li)心機(ji)、培(pei)養(yang)箱(xiang)等常規(gui)儀(yi)器，即(ji)可完成從組織取樣到類器官穩定(ding)傳(chuan)代的(de)全(quan)套實(shi)驗(yan)。另(ling)外還(hai)有類器官增殖(zhi)培(pei)養(yang)基(ji)，類器官分化(hua)培(pei)養(yang)基(ji)，無(wu)血(xue)清培(pei)養(yang)基(ji)，F12培(pei)養(yang)基(ji)、細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)試(shi)劑(ji)，細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)耗(hao)材(cai)等多(duo)種(zhong)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)試(shi)劑(ji)和(he)實(shi)驗(yan)耗(hao)材(cai)。