在(zai)生物(wu)分子(zi)互作(zuo)研究(jiu)中,非標記(ji)檢(jian)測技術因(yin)無(wu)需(xu)熒(ying)光標(biao)記(ji)或(huo)放(fang)射性示(shi)蹤(zong),能(neng)保(bao)留分子(zi)天然(ran)狀(zhuang)態(tai),成(cheng)為近(jin)年來的研(yan)究(jiu)熱(re)點。Gator® Pilot 作(zuo)為壹(yi)款基於生物(wu)膜幹(gan)涉(she)技術(BLI)的 4 通(tong)道(dao)非(fei)標(biao)記(ji)分(fen)子(zi)互作(zuo)分析儀(yi),專(zhuan)為(wei)低通量場景設(she)計,通(tong)過 4 個(ge)獨立光譜(pu)儀(yi)實(shi)現(xian)多(duo)樣本(ben)並(bing)行(xing)檢(jian)測(ce),其(qi)核心(xin)優勢(shi)在(zai)於高頻(pin)數(shu)據采集(ji)與(yu)非標(biao)記(ji)技術的結(jie)合(he),為實(shi)驗室(shi)提(ti)供(gong)精(jing)準(zhun)、高(gao)效的分(fen)子(zi)互作(zuo)分析平(ping)臺(tai)。
二(er)、關鍵(jian)技術特性
多(duo)通道(dao)並(bing)行(xing)檢(jian)測(ce)能(neng)力
儀(yi)器(qi)配(pei)備(bei) 4 個(ge)光譜(pu)儀(yi),支(zhi)持(chi) 4 個(ge)樣本(ben)的同(tong)步(bu)高頻(pin)檢(jian)測,單(dan)次運(yun)行(xing)可覆蓋 48 個(ge)反(fan)應(ying)位(wei)點(結合(he) 96 孔板(ban))。該(gai)設(she)計顯著(zhu)提(ti)升(sheng)實驗效率(lv),尤(you)其(qi)適(shi)用於需(xu)要(yao)平(ping)行(xing)對照的低通量場景,如抗體(ti) - 抗原(yuan)特異性篩選(xuan)、小分(fen)子(zi) - 蛋(dan)白相互(hu)作(zuo)用初(chu)篩等。通(tong)過並行(xing)采集(ji),可減少批(pi)次間誤差(cha),增(zeng)強數(shu)據可比性(xing)。
生物(wu)膜(mo)幹(gan)涉(she)技術(BLI)的應(ying)用(yong)
基於光纖(xian)傳感(gan)器(qi)表(biao)面(mian)生(sheng)物(wu)膜的光幹(gan)涉(she)信號(hao)變化,實(shi)時(shi)監測分子(zi)結合(he) / 解離過程(cheng),無(wu)需(xu)標(biao)記(ji)即(ji)可獲取動力學參(can)數(shu)(如(ru)親(qin)和力常數(shu) KD、結(jie)合(he)速率(lv) ka / 解離速率(lv) kd)、定量(liang)濃度及表(biao)位(wei)分(fen)組信息(xi)。該(gai)技術對弱(ruo)相(xiang)互作(zuo)用(如(ru) KD>10-6 M)具有(you)較高(gao)靈敏度,適(shi)用於天然(ran)分(fen)子(zi)體系(xi)的動態(tai)分(fen)析,避免(mian)標記(ji)引(yin)入的空間位阻(zu)或(huo)功(gong)能(neng)幹(gan)擾(rao)。
靈活(huo)的實(shi)驗參(can)數(shu)設(she)置(zhi)
提(ti)供(gong) 2、5、10 Hz 三(san)檔采集(ji)頻(pin)率(lv),可根據反(fan)應(ying)動力學特性選(xuan)擇:
高頻(pin)率(lv)(10 Hz):適(shi)用於快速結合(he)反(fan)應(ying)(如(ru)離子(zi)通道(dao)調(tiao)控(kong)、酶(mei) - 底物(wu)瞬時(shi)作(zuo)用),捕(bu)捉(zhuo)毫秒(miao)級信號(hao)變(bian)化;
低頻(pin)率(lv)(2-5 Hz):適(shi)配(pei)慢反(fan)應(ying)體(ti)系(xi)(如病(bing)毒(du)包(bao)膜蛋(dan)白 - 受體(ti)結合(he)),減少數(shu)據冗(rong)余並降低計算負荷(he)。
標(biao)準(zhun)化質(zhi)量(liang)控(kong)制體(ti)系(xi)
配(pei)套(tao)的 IQ/OQ(安(an)裝(zhuang)確(que)認 / 運(yun)行(xing)確(que)認)服務(wu)包(bao),通過光學校(xiao)準(zhun)、流(liu)速(su)驗證(zheng)和(he)軟(ruan)件功能(neng)測(ce)試(shi),確保(bao)儀(yi)器(qi)性能(neng)符(fu)合(he) ISO 標準(zhun),為(wei)科研(yan)數(shu)據的可重(zhong)復性(xing)提(ti)供(gong)保(bao)障。該(gai)體(ti)系(xi)尤其(qi)適(shi)用於需(xu)要(yao)嚴(yan)格(ge)質(zhi)量(liang)控(kong)制的實(shi)驗室(shi)(如(ru) GLP 認證(zheng)平(ping)臺(tai))。

三(san)、典(dian)型應(ying)用(yong)場景
基礎(chu)科研(yan)領域(yu)
在(zai)結構(gou)生物學中,可用於驗證(zheng)蛋(dan)白 - 蛋(dan)白復合(he)物的組裝(zhuang)機(ji)制(zhi),例(li)如(ru)通過表(biao)位(wei)分(fen)組實驗分(fen)析抗體(ti)與(yu)抗原(yuan)的結(jie)合(he)區域差(cha)異;在(zai)藥(yao)物化學中,輔助小分(fen)子(zi)抑制(zhi)劑(ji)的初(chu)步(bu)篩選(xuan),通過動力學參(can)數(shu)快速評估化合(he)物與(yu)靶點(dian)的結(jie)合(he)能(neng)力。
工業質(zhi)量控(kong)制
在(zai)抗體(ti)生(sheng)產工藝中,用於監測純化後抗體(ti)的親(qin)和(he)力均(jun)壹(yi)性;在(zai)疫苗(miao)研(yan)發(fa)中,分析病(bing)毒(du)樣顆(ke)粒(li)(VLPs)與(yu)宿主(zhu)細胞受體(ti)的相(xiang)互(hu)作(zuo)用強度,輔助抗原(yuan)設(she)計優(you)化。
四(si)、與(yu)傳統(tong)技術的對比(bi)優(you)勢(shi)
| 技術類(lei)型 | 標(biao)記(ji)要(yao)求 | 通(tong)量(liang) | 動力學分(fen)辨(bian)率(lv) | 樣本(ben)消耗量 |
|---|
| SPR(表(biao)面(mian)等離子(zi)體共(gong)振) | 需(xu)固(gu)定化 | 中低 | 秒級 | 微克(ke)級 |
| BLI(生物(wu)膜(mo)幹(gan)涉(she)) | 非標(biao)記(ji) | 中低 | 秒級 | 納克(ke)級 |
| 熒(ying)光偏(pian)振(FP) | 需(xu)熒(ying)光標(biao)記(ji) | 高(gao)通 | 終(zhong)點法(fa) | 納克(ke)級 |
Gator® Pilot 憑借(jie)非標(biao)記(ji)特性與(yu)多(duo)通道(dao)並(bing)行(xing)能(neng)力,在(zai)保留(liu)分子(zi)天然(ran)活(huo)性(xing)的同(tong)時(shi),實(shi)現(xian)低樣本(ben)消耗下(xia)的動力學實(shi)時(shi)監測,尤其(qi)適(shi)合(he)珍(zhen)貴(gui)樣本(ben)(如(ru)臨(lin)床活檢(jian)提(ti)取物)的分(fen)析。
五、技術發(fa)展趨(qu)勢(shi)
隨著單(dan)分子(zi)技術與(yu)人工智能(neng)算法(fa)的融(rong)合(he),非標(biao)記(ji)分(fen)子(zi)互作(zuo)分析正朝(chao)著更高時(shi)空分(fen)辨(bian)率(lv)發(fa)展。Gator® Pilot 的硬(ying)件設(she)計(如(ru)獨立光譜(pu)儀(yi)模(mo)塊(kuai))為(wei)未(wei)來升(sheng)級預(yu)留(liu)接口(kou),可兼容新型傳(chuan)感(gan)器(qi)(如納(na)米(mi)孔(kong)陣列),有(you)望(wang)在(zai)單(dan)細胞互作(zuo)分析等前(qian)沿(yan)領域(yu)拓(tuo)展應(ying)用(yong)場景。