幹細胞(bao)培養基(ji)作用與存(cun)放(fang)要求

　　幹(gan)細胞(bao)培養基(ji)是細胞(bao)培養的核心(xin)成(cheng)分(fen)，其(qi)作用是為幹(gan)細胞(bao)提(ti)供必(bi)要的營養(yang)、生長因子(zi)、pH緩(huan)沖和無(wu)菌(jun)環(huan)境，以(yi)維(wei)持(chi)細胞(bao)的存(cun)活、增(zeng)殖(zhi)和分化(hua)。

　　壹(yi)、幹(gan)細胞(bao)培養基(ji)的作用：

　　提(ti)供基(ji)礎(chu)營養(yang)：

　　氨基(ji)酸(suan)、糖類(lei)、維(wei)生(sheng)素(su)：為細胞(bao)代謝提(ti)供能(neng)量和原(yuan)料。

　　無(wu)機(ji)鹽：維(wei)持(chi)滲(shen)透(tou)壓和離子(zi)平(ping)衡(heng)。

　　支持(chi)細胞(bao)生長與(yu)增殖(zhi)：

　　血清（如FBS胎牛(niu)血清）：提(ti)供生(sheng)長因子(zi)、激(ji)素(su)、脂(zhi)蛋(dan)白等，促進(jin)細胞(bao)貼壁(bi)和增殖(zhi)。

　　重組(zu)生(sheng)長因子(zi)：誘導(dao)幹(gan)細胞(bao)自我(wo)更新，抑(yi)制(zhi)分化(hua)。

　　維(wei)持(chi)pH穩(wen)定：

　　通過(guo)緩(huan)沖系(xi)統中和代謝產生的酸(suan)性(xing)物(wu)質，保持(chi)培養基(ji)pH在(zai)7.2~7.4範(fan)圍內。

　　防(fang)止(zhi)汙染(ran)：

　　添(tian)加抗生素(su)預(yu)防(fang)細菌(jun)汙染(ran)（註(zhu)意：長期使用可(ke)能影(ying)響(xiang)細胞(bao)狀態(tai)）。

　　培養基(ji)本身需(xu)無(wu)菌(jun)，通常(chang)經過過(guo)濾除(chu)菌(jun)。

　　調(tiao)節(jie)滲(shen)透(tou)壓：

　　通過(guo)電解質(zhi)濃度控(kong)制(zhi)滲透(tou)壓，避免細胞(bao)因滲透(tou)壓失(shi)衡(heng)而破裂(lie)或皺(zhou)縮(suo)。

　　支持(chi)特定細胞(bao)需(xu)求：

　　根(gen)據(ju)幹(gan)細胞(bao)類(lei)型（如胚胎幹(gan)細胞(bao)、間充(chong)質幹細胞(bao)、神經幹細胞(bao)）添加特異(yi)性(xing)成(cheng)分。

　　二(er)、幹細胞(bao)培養基(ji)存(cun)放(fang)要求：

　　1. 未開封(feng)培養基(ji)的存(cun)放(fang)

　　低溫保存(cun)：

　　基(ji)礎(chu)培養基(ji)應(ying)存(cun)放(fang)於4℃冰(bing)箱(xiang)，避(bi)免反復凍融(rong)。

　　添(tian)加血清或生(sheng)長因子(zi)後(hou)的培養基(ji)需(xu)根據(ju)成(cheng)分調整：

　　含血(xue)清的培養基(ji)：短期可(ke)存(cun)於4℃，長期（>1周(zhou)）需(xu)-20℃冷(leng)凍(dong)，使用前解凍(dong)。

　　無(wu)血清培養基(ji)：建議(yi)小量分(fen)裝，4℃保存(cun)（部分(fen)需(xu)-20℃）。

　　避光(guang)保存(cun)：

　　某些成分(fen)（如谷(gu)氨酰胺、生(sheng)長因子(zi)）對(dui)光(guang)照(zhao)敏(min)感，需(xu)用錫箔(bo)紙(zhi)包裹(guo)或(huo)存(cun)放(fang)在(zai)深(shen)色容器中。

　　保質期限(xian)制(zhi)：

　　基(ji)礎(chu)培養基(ji)開封(feng)後(hou)建議(yi)1個月(yue)內用完(wan)，含血(xue)清的培養基(ji)最好2周(zhou)內使用。

　　2. 配(pei)制(zhi)後(hou)培養基(ji)的存(cun)放(fang)

　　無(wu)菌(jun)操(cao)作：

　　配(pei)制(zhi)時在(zai)超(chao)凈臺內(nei)完(wan)成，避免(mian)微(wei)生物汙染(ran)。

　　分(fen)裝至(zhi)無(wu)菌(jun)容(rong)器（如培養瓶(ping)、離(li)心(xin)管），密(mi)封(feng)後(hou)標記(ji)配(pei)制(zhi)日(ri)期。

　　短(duan)期存(cun)放(fang)：

　　4℃保存(cun)，不超過(guo)1周(zhou)（含血(xue)清培養基(ji)）。

　　無(wu)血清培養基(ji)可(ke)存(cun)於4℃或(huo)按說(shuo)明(ming)書要求冷(leng)凍(dong)。

　　長期存(cun)放(fang)：

　　冷(leng)凍(dong)，使用前需(xu)緩(huan)慢(man)解(jie)凍(dong)。

　　3. 特殊註意事(shi)項

　　避(bi)免(mian)反(fan)復凍融(rong)：

　　凍(dong)融會(hui)導(dao)致(zhi)血清蛋白變(bian)性(xing)、生(sheng)長因子(zi)失(shi)活(huo)，建議(yi)分裝成(cheng)單次用量後(hou)冷(leng)凍(dong)。

　　禁(jin)止(zhi)陽(yang)光(guang)直射(she)：

　　存(cun)放(fang)位置(zhi)遠離窗(chuang)戶或強(qiang)光(guang)，防(fang)止(zhi)光(guang)敏(min)成(cheng)分降解。

　　定期檢(jian)查(zha)：

　　觀(guan)察(cha)培養基(ji)是否(fou)渾(hun)濁(zhuo)、沈(chen)澱(dian)或變色(se)，若出(chu)現(xian)異(yi)常則(ze)丟(diu)棄。