CHO細胞(bao)轉(zhuan)瓶後長(chang)勢(shi)不(bu)好原因(yin)分析(xi)及(ji)解(jie)決(jue)方(fang)案

在(zai)生(sheng)物(wu)制藥領(ling)域，CHO（中(zhong)國(guo)倉鼠卵巢）細胞(bao)是(shi)常用的(de)宿主細胞，用於(yu)生(sheng)產(chan)重組蛋白(bai)藥物(wu)。然而(er)，在(zai)CHO細胞(bao)的(de)培(pei)養(yang)過程中(zhong)，有(you)時(shi)會(hui)遇(yu)到(dao)細(xi)胞轉(zhuan)瓶後長(chang)勢(shi)不(bu)佳(jia)的問(wen)題。這種(zhong)情況(kuang)可能會(hui)影(ying)響(xiang)藥物(wu)的(de)生(sheng)產(chan)效率(lv)和(he)產(chan)品質量。本文(wen)將分析(xi)可能導致 CHO細(xi)胞(bao)轉(zhuan)瓶後長(chang)勢(shi)不(bu)佳(jia)的原因(yin)，並提出相(xiang)應(ying)的(de)解(jie)決(jue)方(fang)案。

CHO細胞(bao)轉(zhuan)瓶後長(chang)勢(shi)不(bu)好的原因(yin)主(zhu)要(yao)有(you)以下幾點：

1.環(huan)境(jing)變化：細(xi)胞在(zai)轉(zhuan)瓶過程中(zhong)，可能會(hui)遇(yu)到(dao)溫(wen)度、濕度、氧氣和(he)二(er)氧化碳(tan)濃度等環境(jing)因(yin)素的變化。這些變化可能會(hui)對(dui)細胞(bao)的生(sheng)長(chang)狀態(tai)產(chan)生(sheng)影(ying)響(xiang)。例如，溫度的波動(dong)可能導致細(xi)胞(bao)代(dai)謝(xie)途(tu)徑的改(gai)變，濕度的變化可能會(hui)影(ying)響(xiang)細胞的(de)滲(shen)透(tou)壓(ya)平(ping)衡(heng)，氧氣和(he)二(er)氧化碳(tan)濃度的波動(dong)可能會(hui)影(ying)響(xiang)細胞的(de)呼吸和(he)酸(suan)堿平(ping)衡(heng)。因(yin)此，維(wei)持(chi)穩定的(de)培(pei)養(yang)環境(jing)對(dui)於(yu)細(xi)胞(bao)的(de)生(sheng)長(chang)比(bi)較(jiao)重要(yao)。

2.營(ying)養(yang)物(wu)質供(gong)應(ying)不(bu)足：轉(zhuan)瓶後，細(xi)胞可能會(hui)面(mian)臨(lin)營(ying)養(yang)物(wu)質供(gong)應(ying)不(bu)足的問(wen)題。尤其是葡萄糖、氨(an)基(ji)酸和(he)維(wei)生(sheng)素等關(guan)鍵(jian)營(ying)養(yang)素的缺乏(fa)，可能會(hui)導致細(xi)胞(bao)能量供(gong)應(ying)不(bu)足，影(ying)響(xiang)細胞的(de)生(sheng)長(chang)和(he)代(dai)謝(xie)。因(yin)此，在(zai)轉(zhuan)瓶後，需(xu)要(yao)及(ji)時(shi)補(bu)充(chong)足夠的營(ying)養(yang)物(wu)質，以滿(man)足細胞的生(sheng)長(chang)需(xu)求。

3.代(dai)謝(xie)廢物(wu)積(ji)累(lei)：細胞代(dai)謝(xie)產(chan)生(sheng)的(de)廢物(wu)，如乳(ru)酸(suan)和(he)氨(an)，如果在(zai)轉(zhuan)瓶後不(bu)能(neng)及(ji)時(shi)清(qing)除(chu)，可能會(hui)對(dui)細胞(bao)生(sheng)長(chang)產(chan)生(sheng)不(bu)利影(ying)響(xiang)。這些廢物(wu)積(ji)累(lei)過多會(hui)導致細(xi)胞(bao)內環(huan)境(jing)惡化，影(ying)響(xiang)細胞的(de)生(sheng)長(chang)和(he)生(sheng)產(chan)力。因(yin)此，定(ding)期(qi)更換培(pei)養(yang)基(ji)，及(ji)時(shi)清(qing)除(chu)代(dai)謝(xie)廢物(wu)，可以使(shi)細(xi)胞維(wei)持(chi)良好的生(sheng)長(chang)狀態(tai)。

4.細(xi)胞密度和(he)競爭(zheng)：轉(zhuan)瓶後，細(xi)胞密度可能會(hui)增(zeng)加(jia)，導致細(xi)胞(bao)間的(de)競爭(zheng)加(jia)劇。過高的(de)細胞(bao)密(mi)度可能會(hui)導致營(ying)養(yang)物(wu)質的消耗(hao)過快，代(dai)謝(xie)廢物(wu)的(de)積(ji)累(lei)增多，以及(ji)細(xi)胞(bao)間(jian)的(de)接(jie)觸抑(yi)制現(xian)象(xiang)。這些因(yin)素都(dou)會(hui)影(ying)響(xiang)細胞的(de)生(sheng)長(chang)和(he)生(sheng)產(chan)力。因(yin)此，在(zai)轉(zhuan)瓶前，需(xu)要(yao)控(kong)制細胞的密度，避免(mian)過高的(de)細胞(bao)密(mi)度對(dui)生(sheng)長(chang)產(chan)生(sheng)不(bu)利影(ying)響(xiang)。

5.無菌條(tiao)件(jian)：轉(zhuan)瓶過程中(zhong)的無(wu)菌(jun)操作不(bu)當(dang)可能會(hui)導致細(xi)胞(bao)汙(wu)染。細胞(bao)汙(wu)染會(hui)嚴(yan)重影(ying)響(xiang)細胞的(de)生(sheng)長(chang)狀態(tai)，甚(shen)至導致細(xi)胞(bao)死亡(wang)。因(yin)此，在(zai)轉(zhuan)瓶過程中(zhong)，需要(yao)嚴格(ge)遵(zun)守無(wu)菌操作規程，包括對(dui)培(pei)養(yang)器(qi)具(ju)的消(xiao)毒(du)、操作人員(yuan)的(de)無菌(jun)操作技術等(deng)，以防(fang)止細胞(bao)汙(wu)染的發(fa)生(sheng)。

轉(zhuan)瓶後細(xi)胞長勢(shi)弱(ruo)的優化解(jie)決(jue)方(fang)案：

1. 優化培(pei)養(yang)環境(jing)：確保轉(zhuan)瓶後的(de)培(pei)養(yang)環境(jing)（如溫度、濕度、氧氣和(he)二(er)氧化碳(tan)濃度）與原培(pei)養(yang)環境(jing)壹(yi)致(zhi)，減少(shao)環境(jing)變化對(dui)細胞(bao)的影(ying)響(xiang)。

2. 調整培(pei)養(yang)基(ji)配方(fang)：根據細胞的營(ying)養(yang)需求，調整培(pei)養(yang)基(ji)中(zhong)的營(ying)養(yang)成分，確保細(xi)胞(bao)在(zai)轉(zhuan)瓶後能(neng)夠獲得(de)充(chong)足的營(ying)養(yang)供(gong)應(ying)。

3. 定(ding)期(qi)更換(huan)培(pei)養(yang)基(ji)：定期更(geng)換培(pei)養(yang)基(ji)，以清(qing)除(chu)代(dai)謝(xie)廢物(wu)，保持(chi)培(pei)養(yang)環境(jing)的(de)穩定。

4. 控(kong)制細胞密度：在(zai)轉(zhuan)瓶前，控(kong)制細胞的密度，避免(mian)過高的(de)細胞(bao)密(mi)度對(dui)生(sheng)長(chang)產(chan)生(sheng)不(bu)利影(ying)響(xiang)。

5. 加(jia)強無菌操作：在(zai)轉(zhuan)瓶過程中(zhong)，嚴格(ge)遵(zun)守無(wu)菌操作規程，防止細胞(bao)汙(wu)染。

   此外(wai)，可以使(shi)用壹(yi)些商業(ye)化的(de)添加(jia)劑和(he)設(she)備(bei)來促進CHO細胞的生(sheng)長(chang)，如使用InstiGRO、InstiSHAKE和(he)InstiTHAW等(deng)促細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)劑。

- InstiGRO：這是壹(yi)種(zhong)促進CHO或HEK單細(xi)胞生(sheng)長(chang)的(de)添(tian)加(jia)劑，可以提高克(ke)隆(long)效率(lv)，加(jia)速手動(dong)鋪(pu)板後細胞(bao)的(de)生(sheng)長(chang)。與(yu)Solentim VIPS系(xi)統結合(he)使用，可以實(shi)現(xian)自(zi)動(dong)單細(xi)胞鋪(pu)板，從(cong)而(er)提高細(xi)胞株(zhu)開(kai)發(fa)的(de)效(xiao)率(lv)。

- InstiSHAKE：這是壹(yi)種(zhong)專為(wei)CHO或(huo)HEK細胞設(she)計的振(zhen)蕩(dang)培(pei)養(yang)補(bu)充(chong)劑，可以提高細(xi)胞活(huo)力(li)，加(jia)速細胞生(sheng)長(chang)，有(you)助(zhu)於(yu)生(sheng)產(chan)更高密(mi)度的培(pei)養(yang)物(wu)，並在(zai)壹系(xi)列(lie)培(pei)養(yang)基(ji)中(zhong)提供(gong)批(pi)次間(jian)的壹(yi)致性。

- InstiTHAW：這是壹(yi)種(zhong)用於(yu)冷(leng)凍保存(cun)細(xi)胞的(de)添(tian)加(jia)劑，旨(zhi)在(zai)保護CHO或(huo)HEK細胞在(zai)冷凍和(he)解(jie)凍過程中(zhong)的活(huo)力(li)，確保細(xi)胞(bao)在(zai)冷凍保存(cun)後(hou)獲得(de)理(li)想(xiang)的(de)恢復(fu)率(lv)。

當(dang)CHO細(xi)胞(bao)在(zai)轉(zhuan)瓶後出(chu)現(xian)生(sheng)長(chang)不(bu)良(liang)時，可以通(tong)過優化培(pei)養(yang)環境(jing)、調整培(pei)養(yang)基(ji)配方(fang)、定期更(geng)換培(pei)養(yang)基(ji)、控(kong)制細胞密度、加(jia)強無菌操作以及(ji)使(shi)用商業(ye)化添(tian)加(jia)劑和(he)設(she)備(bei)等方(fang)法來解決(jue)問(wen)題。通(tong)過這些措(cuo)施(shi)，可以有(you)效(xiao)地(di)改(gai)善CHO細(xi)胞(bao)的生(sheng)長(chang)狀態(tai)，提高藥物(wu)生(sheng)產(chan)的效(xiao)率(lv)和(he)產(chan)品質量。

蘇(su)州(zhou)阿爾(er)法生(sheng)物(wu)16年(nian)專(zhuan)註實驗室(shi)儀器(qi)設(she)備(bei)、生(sheng)物(wu)試(shi)劑、實(shi)驗耗(hao)材的(de)供(gong)應(ying)商。所(suo)提供(gong)的細(xi)胞(bao)系(xi)開發設(she)備(bei)主要(yao)包括：單細(xi)胞測(ce)序儀、納(na)米粒度儀、單細(xi)胞鋪(pu)板驗證(zheng)儀，活(huo)細胞成(cheng)像(xiang)儀，  iPSC基(ji)質膠，細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)因(yin)子(zi)等(deng)。