影(ying)響(xiang)瓊(qiong)脂(zhi)糖凝(ning)膠(jiao)電(dian)泳(yong)制膠(jiao)的(de)幾個(ge)因素

對(dui)於(yu)壹般的(de)分(fen)析(xi)工(gong)作，特(te)別(bie)是定(ding)量(liang)分(fen)析(xi)工(gong)作來(lai)講(jiang)，人們強調制備的凝(ning)膠(jiao)要(yao)有較好(hao)的(de)可(ke)重(zhong)復(fu)性(xing)。如(ru)果(guo)制備得到(dao)的凝(ning)膠(jiao)本(ben)身沒有重(zhong)復(fu)性(xing)，比(bi)如孔徑前後兩次凝(ning)膠(jiao)相(xiang)差頗(po)大(da)，那(na)麽(me)在 這(zhe)樣(yang)的(de)條件(jian)下，所得到(dao)的分(fen)析(xi)結果(guo)，其(qi)可(ke)信性就(jiu)有問(wen)題(ti)，往(wang)往會(hui)使幾(ji)次結果(guo)不能重(zhong)復(fu)。所以(yi)，為(wei)了(le)要(yao)獲(huo)得可(ke)靠的分(fen)析(xi)結果(guo)，在制膠(jiao)時(shi)對(dui)能影響(xiang)凝(ning)膠(jiao)聚(ju)合的(de)種(zhong)種因(yin)素必須加(jia)以(yi)控(kong)制。

有哪些(xie)主(zhu)要(yao)因(yin)素，又怎樣(yang)來(lai)控制它(ta)們的條件(jian)，分(fen)別(bie)簡(jian)述如(ru)下(xia)：

(1) 制備凝(ning)膠(jiao)用(yong)的主要(yao)試(shi)劑

(a)丙烯酰(xian)胺(an)、甲(jia)叉雙(shuang)丙(bing)烯酰(xian)胺(an)至(zhi)少(shao)是分(fen)析(xi)純(chun)級(ji)的試劑。存(cun)放時(shi)間(jian)壹般不超過1年(nian), 如(ru)果(guo)存放時(shi)間(jian)過長，丙(bing)烯酰(xian)胺(an)受潮水解，丙烯酸(suan)含量(liang)增(zeng)多(duo)。若(ruo)利用(yong)它為(wei)單(dan)體,聚(ju)合時(shi)孔徑很 不均(jun)壹，表現(xian)現(xian)象是聚合時(shi)間(jian)延長，甚(shen)至很難聚(ju)合，這(zhe)就(jiu)必須重(zhong)結晶。對(dui)於(yu)定(ding)量(liang)分(fen)析(xi)工(gong)作壹 般都要(yao)求(qiu)對(dui)單(dan)體進(jin)行(xing)重(zhong)結晶。

丙烯酰(xian)胺(an)和(he)甲(jia)叉雙(shuang)丙(bing)烯酰(xian)胺(an)應(ying)放在棕(zong)色瓶中，幹燥，低溫( + 4C)條件(jian)下保存。丙(bing)烯酰(xian) 胺(an)經陽光(guang)照射，自(zi)身(shen)會聚(ju)合成(cheng)長鏈(lian)，酰(xian)胺(an)基也會(hui)縮(suo)合形(xing)成(cheng)亞胺(an)橋(qiao),從(cong)而(er)影(ying)響(xiang)交聯結果(guo)。

配制成(cheng)的貯存液(ye)，也應(ying)盛於(yu)棕(zong)色瓶中，於(yu)+ 4 C保存，時(shi)間不超過1個(ge)月。

(b)TEMED應(ying)密封置於(yu)冰(bing)箱中(zhong)貯存，使(shi)用(yong)的量(liang)應(ying)使(shi)凝(ning)膠(jiao)能(neng)在30〜60分(fen)鐘內(nei)聚合完(wan) 成(cheng)，如前述不再重(zhong)復(fu)。

(c)過硫酸(suan)銨應(ying)在臨用(yong)前配制。配(pei)制好(hao)的溶液(ye)應(ying)在冰(bing)箱中(zhong)存放,使(shi)用(yong)期不超過1星 期(qi)。存放1星(xing)期(qi)後的過硫酸(suan)銨，可(ke)能仍(reng)會(hui)起(qi)作用，但不適用(yong)來(lai)作精細的分(fen)析(xi)工(gong)作。

(2)溫度(du)

必須保持聚(ju)合溫度(du)的恒(heng)定(ding)。聚合速度(du)與(yu)溫度(du)有關，壹般是溫度(du)高(gao)聚合快(kuai)，而(er)聚(ju)合的(de)快(kuai) 慢影(ying)響(xiang)交聯孔徑的(de)大小(xiao)，所以(yi)，必(bi)須保持恒(heng)定(ding)溫度(du)。通常(chang)都固定(ding)在與(yu)電(dian)泳(yong)相(xiang)同的溫度(du)。凝(ning) 膠(jiao)的(de)聚合反應(ying)是壹個(ge)放熱(re)反應(ying)，所以(yi)必(bi)須有效地(di)散(san)熱。壹般用(yong)薄壁(bi)玻(bo)璃(li)管(guan)在流通空氣中進(jin) 行(xing)凝(ning)膠(jiao)聚(ju)合，便(bian)能(neng)達(da)到(dao)散熱(re)的(de)目的(de)°

(3)氧氣

氧是凝(ning)膠(jiao)鏈(lian)合成(cheng)反應(ying)的(de)終(zhong)止(zhi)劑。所以(yi)，制膠(jiao)前必須(xu)充(chong)分(fen)抽氣，使02降低到(dao)壹定(ding)水平(ping) 以(yi)下(xia)或(huo)者充(chong)以(yi)惰性(xing)氣體,如(ru)氧氣來(lai)降低02的(de)含量(liang)。

(4)光(guang)照

光(guang)照的(de)時間和強度(du)都和(he)凝(ning)膠(jiao)的(de)聚合速度(du)有關。因(yin)此(ci)，必須(xu)固定(ding)光(guang)源(yuan)強(qiang)度(du)、光(guang)照距(ju)離和 光(guang)照時(shi)間。

註意和控制好(hao)以(yi)上幾點(dian),制備得到(dao)的凝(ning)膠(jiao)其(qi)可(ke)重(zhong)復(fu)性(xing)的(de)程度(du)就(jiu)高(gao)。