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細(xi)胞培(pei)養箱(xiang)中(zhong)的真(zhen)菌汙染應(ying)對措施
更(geng)新時(shi)間:2024-04-24
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細(xi)胞培(pei)養是(shi)生命(ming)科(ke)學研究(jiu)中(zhong)的重(zhong)要手段(duan),然(ran)而(er)在實驗過(guo)程中(zhong)常常(chang)受(shou)到各(ge)種汙染因素(su)的(de)幹擾(rao),其(qi)中(zhong)真菌汙染是(shi)常見的(de)問(wen)題之(zhi)壹。真(zhen)菌汙染不僅(jin)會影(ying)響(xiang)細胞的(de)生長和實驗結果(guo)的(de)可靠性(xing),還(hai)可能對實驗室環(huan)境(jing)和其(qi)他(ta)細(xi)胞(bao)造(zao)成潛(qian)在威脅。本文主(zhu)要探討了(le)細胞培(pei)養箱(xiang)在培(pei)養細(xi)胞過(guo)程中(zhong)中(zhong)遇到(dao)的(de)真菌汙染,以酵(jiao)母(mu)菌為(wei)例,介(jie)紹了(le)其(qi)對細胞的影(ying)響和汙染的(de)特(te)征(zheng)。針(zhen)對真菌汙染問(wen)題,提(ti)出了(le)解決方案(an),並(bing)分享(xiang)了(le)壹些常用(yong)的消(xiao)毒劑(ji)對真菌的滅(mie)菌效果。在面對汙染時(shi),要及(ji)時(shi)果(guo)斷(duan)地(di)處理(li)和丟(diu)棄(qi)汙染細(xi)胞(bao)的(de)重(zhong)要性(xing),以保(bao)證(zheng)細(xi)胞(bao)培(pei)養的(de)質量(liang)和可(ke)靠性(xing)。
壹(yi)、細胞培(pei)養箱(xiang)中(zhong)的真(zhen)菌汙染
在細胞(bao)培(pei)養中(zhong),真菌汙染主(zhu)要表現(xian)為(wei)酵母(mu)菌的存(cun)在,其(qi)特(te)征(zheng)包(bao)括在培(pei)養液(ye)中(zhong)形成白(bai)色(se)或淺黃色漂浮物,酵母(mu)菌呈卵(luan)形散布在細胞(bao)周邊或細胞間。在高倍(bei)鏡(jing)下觀(guan)察,可(ke)見到(dao)有鏈狀排列(lie)的菌珠,或者從壹(yi)大壹(yi)小的(de)連(lian)體結構識別(bie)出酵母(mu)菌的存(cun)在。
細胞(bao)培(pei)養過(guo)程中(zhong)的真(zhen)菌汙染可(ke)能由於細胞(bao)培(pei)養條(tiao)件(jian)不潔(jie)凈或操作不慎(shen)導致(zhi)。以下是(shi)幾種(zhong)常見的真(zhen)菌汙染:
1. 外(wai)源(yuan)性(xing)真(zhen)菌汙染:外(wai)部(bu)環境中(zhong)的真(zhen)菌,如空(kong)氣(qi)、培(pei)養皿、培(pei)養試(shi)劑(ji)等(deng)中(zhong)的真(zhen)菌,可能隨著進入(ru)到(dao)細(xi)胞(bao)培(pei)養體(ti)系中(zhong)。這種(zhong)真(zhen)菌汙染通(tong)常(chang)是(shi)由操作不慎(shen)或無菌操作不好(hao)導(dao)致(zhi)的(de)。
2. 內(nei)源(yuan)性(xing)真(zhen)菌汙染:細(xi)胞(bao)培(pei)養物中(zhong)本來就(jiu)存(cun)在的真(zhen)菌,可能來自原始(shi)細(xi)胞株(zhu)或長期(qi)培(pei)養中(zhong)的細(xi)胞中(zhong)。這種(zhong)真(zhen)菌汙染可(ke)能是(shi)由於原始(shi)細(xi)胞株(zhu)就(jiu)含有真菌,或細胞培(pei)養中(zhong)真菌潛(qian)伏過(guo)程中(zhong)發生的(de)。
3. 培(pei)養物中(zhong)真菌的繁(fan)殖(zhi):真(zhen)菌在溫暖潮濕(shi)的環(huan)境下容(rong)易(yi)生長繁(fan)殖(zhi),如果(guo)培(pei)養條(tiao)件(jian)不符(fu)合無菌條(tiao)件(jian),容(rong)易(yi)導致(zhi)細(xi)胞(bao)培(pei)養物中(zhong)真菌生長繁(fan)殖(zhi),造(zao)成汙染。
4. 細(xi)胞(bao)培(pei)養器(qi)具汙染:培(pei)養皿、培(pei)養瓶(ping)、吸(xi)頭(tou)等(deng)培(pei)養器(qi)具如果(guo)未(wei)經(jing)過(guo)嚴格(ge)消毒和滅(mie)菌,可能殘留(liu)真(zhen)菌,成為(wei)細胞(bao)培(pei)養中(zhong)真菌汙染的(de)來源(yuan)。
真菌汙染的(de)常(chang)見(jian)情況可(ke)能會導(dao)致(zhi)細胞生長受(shou)阻、形態(tai)異常、細胞死(si)亡(wang)等(deng)問(wen)題,在細胞(bao)培(pei)養實驗中(zhong)造(zao)成結果(guo)的(de)誤(wu)差和影(ying)響。因此,在進行(xing)細(xi)胞(bao)培(pei)養時(shi),保(bao)持無(wu)菌操作、定(ding)期(qi)檢(jian)查(zha)培(pei)養物的純度(du)和消(xiao)毒培(pei)養器(qi)具是(shi)預防真菌汙染的(de)關(guan)鍵措施。及(ji)時(shi)的(de)檢(jian)測(ce)和處(chu)理(li)真菌汙染也(ye)是(shi)保(bao)障細胞培(pei)養品(pin)質的(de)重(zhong)要步驟(zhou)。

二、 酵母(mu)菌汙染對細胞的影(ying)響及(ji)特(te)征(zheng)分析(xi)
細(xi)胞遭(zao)受(shou)酵母(mu)菌汙染後(hou),雖然仍(reng)可繼續生長,但活力(li)狀態(tai)逐漸(jian)下降(jiang),最(zui)終可能因為(wei)營養(yang)耗(hao)盡(jin)和毒素(su)作(zuo)用導致(zhi)細胞脫落(luo)死(si)亡(wang)。酵(jiao)母(mu)菌的存(cun)在會幹(gan)擾(rao)細胞(bao)的正(zheng)常生長和實驗結果(guo)的(de)準(zhun)確(que)性(xing),因此必(bi)須(xu)及(ji)時(shi)清(qing)除(chu)。
酵(jiao)母(mu)菌汙染可(ke)能對細胞產(chan)生壹(yi)些影響(xiang),以下是(shi)酵母(mu)菌汙染可(ke)能對細胞的影(ying)響及(ji)其(qi)特(te)征(zheng)分析(xi):
1. 細(xi)胞生長受(shou)抑(yi)制:酵(jiao)母(mu)菌是(shi)壹種真(zhen)菌,其(qi)存(cun)在可能競爭(zheng)營養(yang)物質和生長空(kong)間,導致(zhi)細胞(bao)生長受(shou)到抑(yi)制。細(xi)胞(bao)可(ke)能會出現生長緩(huan)慢或停滯(zhi)的(de)情況。
2. 細(xi)胞(bao)形態(tai)改變:酵(jiao)母(mu)菌的存(cun)在可能引起(qi)細(xi)胞形態(tai)的改變,例(li)如出現異常形態(tai)或胞器(qi)分布(bu)異常。
3. 細胞代(dai)謝(xie)異常:酵母(mu)菌汙染可(ke)能影響(xiang)細(xi)胞的代(dai)謝活(huo)性(xing),導(dao)致代謝(xie)產(chan)物的積累或減(jian)少,對細胞功能產(chan)生影(ying)響(xiang)。
4. 細胞(bao)死(si)亡(wang)或雕亡(wang):嚴重(zhong)的(de)酵(jiao)母(mu)菌汙染可(ke)能導致(zhi)細(xi)胞死(si)亡(wang)或雕亡(wang),造(zao)成實驗結果(guo)的(de)失真。
5. 細(xi)胞功能異常:酵母(mu)菌可能產(chan)生壹(yi)些代謝(xie)產(chan)物或毒素(su),影(ying)響細胞(bao)正(zheng)常功能。
特征(zheng)分析(xi)方(fang)面,可(ke)以通(tong)過(guo)以下方(fang)法識別(bie)和確(que)認酵母(mu)菌汙染:
1. 顯(xian)微(wei)鏡(jing)觀察:通(tong)過(guo)顯(xian)微(wei)鏡(jing)觀察細(xi)胞形(xing)態(tai)是(shi)否異常,是(shi)否存(cun)在額外的結構體,如酵(jiao)母(mu)菌的孢(bao)子或菌絲(si)。
2. 染色(se)法:使(shi)用特定(ding)的(de)染色(se)方(fang)法,如格(ge)拉姆(mu)染色(se)或增殖素(su)染色(se)法,能夠幫助(zhu)區分酵(jiao)母(mu)菌和細(xi)胞。
3. 分子生物學方法:使(shi)用PCR等(deng)分子生物學方法檢(jian)測(ce)酵母(mu)菌的DNA或RNA序列(lie),確認(ren)是(shi)否存(cun)在酵母(mu)菌汙染。
酵(jiao)母(mu)菌汙染可(ke)能對細胞產(chan)生多種(zhong)影響(xiang),通(tong)過(guo)細胞(bao)的(de)形(xing)態(tai)、代謝(xie)、功能等(deng)特(te)征(zheng)分析(xi)可(ke)以對酵母(mu)菌汙染進(jin)行(xing)識別(bie)和確(que)認。在實驗過(guo)程中(zhong)應(ying)加(jia)強(qiang)對細胞培(pei)養箱(xiang),培(pei)養基(ji)的PH值等(deng)細(xi)胞(bao)培(pei)養環(huan)境進(jin)行(xing)有效管理(li),及(ji)時(shi)清(qing)除(chu)酵(jiao)母(mu)菌汙染,確(que)保(bao)實驗結果(guo)的(de)準(zhun)確(que)性(xing)和可(ke)靠性(xing)。

三、應(ying)對細胞培(pei)養箱(xiang)中(zhong)細胞(bao)汙染的(de)有效解決方案(an)探討
針(zhen)對酵母(mu)菌等(deng)真(zhen)菌汙染,需(xu)采取針(zhen)對性(xing)的(de)解決方案(an)。在輕微(wei)汙染情況下,可(ke)嘗試(shi)使(shi)用適量(liang)的消(xiao)毒劑(ji)進(jin)行(xing)清(qing)洗(xi)和處(chu)理(li),以消(xiao)除(chu)汙染源(yuan)。壹些常用(yong)的消(xiao)毒劑(ji)如5%甲酚皂(zao)、0.5%新潔(jie)爾滅(mie)等(deng)對真菌有較好(hao)的(de)滅(mie)菌效果。對於支原體(ti)汙染也(ye)可(ke)以使(shi)用支原體(ti)清(qing)除(chu)試(shi)劑(ji),來進行(xing)支原體(ti)清(qing)除(chu)以消(xiao)除(chu)細胞(bao)汙染。
常(chang)見(jian)生化培(pei)養箱(xiang)內(nei)部(bu)常用消(xiao)毒劑(ji)對真菌的滅(mie)菌效果比(bi)較:
1. 75%乙(yi)醇(chun):75%乙(yi)醇(chun)是(shi)壹種廣(guang)泛(fan)使(shi)用的消(xiao)毒劑(ji),對真菌有壹定(ding)的(de)滅(mie)菌效果。在生化培(pei)養箱(xiang)內(nei)部(bu)進行(xing)噴(pen)灑(sa)和擦(ca)拭可以有效清(qing)除(chu)部(bu)分真(zhen)菌。
2. 過(guo)氧(yang)乙(yi)酸:過(guo)氧(yang)乙(yi)酸是(shi)壹種氧(yang)化性(xing)強(qiang)的消(xiao)毒劑(ji),在生化培(pei)養箱(xiang)內(nei)部(bu)使(shi)用可以迅(xun)速殺(sha)滅(mie)真(zhen)菌,並對各種微(wei)生物有較好(hao)的(de)殺(sha)菌效果。
3. 新潔(jie)爾滅(mie):新潔(jie)爾滅(mie)是(shi)壹種廣(guang)譜殺(sha)菌劑(ji),在生化培(pei)養箱(xiang)內(nei)部(bu)使(shi)用可以有效清(qing)除(chu)真(zhen)菌、細菌和病(bing)毒,具有較好(hao)的(de)消(xiao)毒效果。
4. 84消毒液:84消(xiao)毒液含(han)有氯(lv)含量(liang)高,能夠對真菌具有較好(hao)的(de)殺(sha)菌效果,在生化培(pei)養箱(xiang)內(nei)部(bu)使(shi)用可以有效消除真菌汙染。
5. 漂(piao)白(bai)粉:漂白(bai)粉含有氯(lv),是(shi)壹種較強(qiang)效的消毒劑(ji),可(ke)以殺(sha)滅(mie)多種(zhong)微(wei)生物包(bao)括真菌,但使(shi)用時需(xu)要小心避(bi)免(mian)刺(ci)激性(xing)氣(qi)味和對器(qi)具的腐(fu)蝕(shi)。

選擇合適的(de)消(xiao)毒劑(ji)進(jin)行(xing)生化培(pei)養箱(xiang)內(nei)部(bu)消毒,需(xu)要考(kao)慮滅(mie)菌效果、安(an)全(quan)性(xing)、易(yi)用性(xing)等(deng)因素(su)。在使(shi)用消毒劑(ji)時(shi)應(ying)按(an)照正(zheng)確的濃度和操作方(fang)法進(jin)行(xing),確(que)保(bao)消(xiao)毒效果同(tong)時不會對實驗物品(pin)和設(she)備(bei)造(zao)成損害。
除了(le)真菌汙染外(wai),使(shi)用細胞(bao)培(pei)養箱(xiang)培(pei)養細(xi)胞過(guo)程中(zhong)還可(ke)能遇到(dao)其(qi)他(ta)細(xi)菌汙染的(de)情況。針(zhen)對不同(tong)類型(xing)的(de)汙染,需(xu)要采取相(xiang)應(ying)的(de)汙染解決方案(an),及(ji)時(shi)丟(diu)棄(qi)受(shou)汙染的(de)細(xi)胞(bao),並對實驗室環(huan)境(jing)進行(xing)全(quan)面消(xiao)毒,以防止汙染的(de)傳(chuan)播(bo)和擴散(san)。
我(wo)們主(zhu)要經(jing)營(ying)的(de)實驗室儀(yi)器(qi)類產(chan)品(pin)包(bao)括多種(zhong)類型(xing)的(de)實驗室培(pei)養箱(xiang),如CO2培(pei)養箱(xiang)、CO2搖床(chuang)、全(quan)溫振(zhen)蕩培(pei)養箱(xiang)、恒溫(wen)恒濕(shi)培(pei)養箱(xiang)、生化培(pei)養箱(xiang)、黴(mei)菌培(pei)養箱(xiang)、BOD培(pei)養箱(xiang)、低(di)溫(wen)培(pei)養箱(xiang)等(deng)。此外(wai),我(wo)們還(hai)提供移(yi)液(ye)器(qi)、生物反(fan)應(ying)器(qi)、發酵(jiao)罐、液(ye)氮(dan)罐、超純水(shui)機(ji)、天(tian)平(ping)、離(li)心機(ji)、潔(jie)凈(jing)工(gong)作臺(tai)等(deng)實驗室設(she)備(bei)。 還有多能幹細(xi)胞(bao),成骨誘導(dao)分化培(pei)養基(ji),骨髓(sui)幹細(xi)胞(bao)、胚胎(tai)幹細(xi)胞、腫(zhong)瘤(liu)細(xi)胞(bao)等(deng)細(xi)胞(bao)株(zhu)、細(xi)胞(bao)系(xi)、細胞培(pei)養試(shi)劑(ji)、細(xi)胞(bao)培(pei)養耗(hao)材、實驗室消(xiao)毒劑(ji)等(deng)上(shang)千(qian)款(kuan)產(chan)品(pin),品(pin)類豐(feng)富齊全(quan),可根據(ju)您的需(xu)求(qiu),提(ti)供樣(yang)機(ji)體(ti)驗性(xing)能服務。我(wo)們與(yu)80余(yu)家(jia)廠商(shang)企業(ye)合(he)作(zuo),其(qi)中(zhong)包(bao)括知(zhi)楚(chu)儀(yi)器(qi)、朗基(ji)、中(zhong)科美(mei)菱、梅特勒、樂(le)楓、搏(bo)旅(lv)、NEST、天(tian)根(gen)、奧盛(sheng)等(deng)。
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