MDCK細(xi)胞(bao)懸(xuan)浮培(pei)養方(fang)法(fa)

MDCK細(xi)胞(bao)（Madin-Darby Canine Kidney cell）是壹(yi)種常(chang)用(yong)的哺(bu)乳動(dong)物(wu)細(xi)胞(bao)系，最(zui)初來(lai)源於小狗(gou)的腎臟組織(zhi)，已被廣(guang)泛(fan)用(yong)於生物(wu)醫(yi)學(xue)研(yan)究(jiu)中，特別(bie)是(shi)在(zai)細(xi)胞(bao)生物(wu)學(xue)和病毒學(xue)領域(yu)。MDCK細(xi)胞(bao)的懸(xuan)浮培(pei)養方(fang)法(fa)可以(yi)提(ti)供(gong)壹(yi)種不(bu)同於傳統的培養方(fang)式，適(shi)用(yong)於特定類(lei)型(xing)的實(shi)驗(yan)和應(ying)用(yong)。本文將(jiang)介(jie)紹(shao)MDCK細(xi)胞(bao)懸(xuan)浮培(pei)養的方(fang)法(fa)以及(ji)其在(zai)科(ke)學(xue)研(yan)究(jiu)中的應(ying)用(yong)。

MDCK細(xi)胞(bao)介(jie)紹(shao)

MDCK細(xi)胞(bao)初於1958年(nian)由(you)Madin和Darby從(cong)小狗(gou)的腎臟組織(zhi)中分(fen)離(li)出(chu)來(lai)，是(shi)壹種上(shang)皮(pi)細(xi)胞(bao)系，具(ju)有(you)良(liang)好(hao)的生長(chang)特(te)性和穩定的遺(yi)傳(chuan)特(te)性。這些細(xi)胞(bao)以其易(yi)於培養、穩(wen)定的倍(bei)增(zeng)率(lv)和形(xing)成(cheng)細(xi)胞(bao)單層的能力(li)而聞(wen)名。懸(xuan)浮培(pei)養是(shi)壹(yi)種在(zai)培養基(ji)中將(jiang)細(xi)胞(bao)以懸(xuan)浮狀態(tai)培(pei)養的方(fang)法(fa)，與傳(chuan)統的貼壁(bi)培養相比，它能(neng)夠提(ti)供(gong)更(geng)多的細(xi)胞(bao)-細(xi)胞(bao)相互(hu)作用(yong)和三維(wei)微(wei)環境(jing)，從(cong)而(er)更好地模(mo)擬(ni)體內細(xi)胞(bao)的生長(chang)環(huan)境。

MDCK細(xi)胞(bao)懸(xuan)浮培(pei)養方(fang)法(fa)

1. **準備(bei)培養基(ji)和試劑(ji)**

   - 使用(yong)適(shi)用(yong)於MDCK細(xi)胞(bao)的培養基(ji)，通(tong)常為含(han)有(you)高(gao)營養成(cheng)分(fen)的DMEM（Dulbecco's Modified Eagle Medium）或MEM（Minimum Essential Medium）。

   - 添加(jia)10%至(zhi)20%的胎(tai)牛血清（FBS）或(huo)其他適(shi)當的血清替代(dai)物(wu)以(yi)提(ti)供(gong)細(xi)胞(bao)所需(xu)的營養和生長(chang)因子。

   - 可(ke)添加(jia)適(shi)當濃度的抗生(sheng)素/抗真菌(jun)劑(ji)以(yi)防(fang)止(zhi)細(xi)菌和真菌(jun)的汙(wu)染(ran)。

2. **培(pei)養細(xi)胞(bao)**

   - 從(cong)貼壁(bi)培養的MDCK細(xi)胞(bao)中收(shou)集(ji)細(xi)胞(bao)，並通(tong)過高速離(li)心機(ji)將(jiang)細(xi)胞(bao)離(li)心沈澱(dian)。

   - 將(jiang)細(xi)胞(bao)以適(shi)當濃度懸(xuan)浮於培養基(ji)中，通(tong)常為每毫升(sheng)培養基(ji)約(yue)1-5x10^5個細(xi)胞(bao)。

   - 將(jiang)細(xi)胞(bao)懸(xuan)浮液(ye)轉移(yi)至(zhi)預(yu)先消(xiao)毒的細(xi)胞(bao)培養皿(min)或(huo)生物(wu)反(fan)應(ying)器中。

3. **培養條(tiao)件(jian)**

   - 將(jiang)細(xi)胞(bao)培養在(zai)37°C的CO2細(xi)胞(bao)培養箱(xiang)中，並提(ti)供(gong)5%至(zhi)10%的CO2以維(wei)持(chi)pH值(zhi)穩定。

   - 定期(qi)更(geng)換(huan)培養基(ji)以(yi)保(bao)持(chi)細(xi)胞(bao)的健康(kang)狀態(tai)，通(tong)常每2至(zhi)3天(tian)更(geng)換(huan)壹次(ci)。

4. **細(xi)胞(bao)檢測(ce)和分(fen)析(xi)**

   - 使用(yong)細(xi)胞(bao)分(fen)析(xi)儀(yi)定期(qi)觀(guan)察(cha)細(xi)胞(bao)的形(xing)態(tai)和生長(chang)情(qing)況，確(que)保(bao)細(xi)胞(bao)處(chu)於良(liang)好(hao)的狀態(tai)。

   - 可(ke)通(tong)過細(xi)胞(bao)計(ji)數儀或(huo)活細(xi)胞(bao)成像(xiang)顯(xian)微(wei)鏡進行細(xi)胞(bao)計(ji)數和生存率(lv)的測定。

   - 進行所需(xu)的實(shi)驗(yan)操(cao)作，例(li)如藥物(wu)篩選、病毒感(gan)染(ran)等(deng)。

MDCK細(xi)胞(bao)的應(ying)用(yong)

MDCK細(xi)胞(bao)的懸(xuan)浮培(pei)養方(fang)法(fa)在(zai)生物(wu)醫(yi)學(xue)研(yan)究(jiu)中具(ju)有(you)廣(guang)泛(fan)的應(ying)用(yong)，包(bao)括但不限(xian)於：

1. **病毒研(yan)究(jiu)**：MDCK細(xi)胞(bao)對多種病(bing)毒的感(gan)染(ran)具(ju)有(you)敏(min)感(gan)性，因此(ci)可(ke)用(yong)於病毒生(sheng)物(wu)學(xue)和抗病(bing)藥物(wu)篩選研(yan)究(jiu)。

2. **細(xi)胞(bao)-細(xi)胞(bao)相互(hu)作用(yong)**：懸(xuan)浮培(pei)養提(ti)供(gong)了(le)模(mo)擬(ni)體內細(xi)胞(bao)相互(hu)作用(yong)的平臺，可用(yong)於研(yan)究(jiu)細(xi)胞(bao)間信號傳導、黏(nian)附和遷移(yi)等生(sheng)物(wu)學(xue)過程(cheng)。

3. **藥物(wu)篩選**：MDCK細(xi)胞(bao)懸(xuan)浮培(pei)養可(ke)用(yong)於評(ping)估(gu)藥物(wu)的毒性和有效(xiao)性，為新藥物(wu)的開發提(ti)供(gong)重(zhong)要(yao)參考。

4. **細(xi)胞(bao)生物(wu)學(xue)研(yan)究(jiu)**：懸(xuan)浮培(pei)養可(ke)提(ti)供(gong)更(geng)多的細(xi)胞(bao)-細(xi)胞(bao)相互(hu)作用(yong)和三維(wei)微(wei)環境(jing)，有(you)助於研(yan)究(jiu)細(xi)胞(bao)的形(xing)態(tai)學(xue)、生長(chang)動(dong)力學(xue)和信號傳導機(ji)制等(deng)。

    MDCK細(xi)胞(bao)的懸(xuan)浮培(pei)養方(fang)法(fa)可用(yong)於模(mo)擬(ni)體內細(xi)胞(bao)生長(chang)環(huan)境並(bing)開展各(ge)種生(sheng)物(wu)醫(yi)學(xue)研(yan)究(jiu)。通(tong)過優化(hua)培養條(tiao)件(jian)和實(shi)驗(yan)設計(ji)，可以更(geng)好地利用(yong)這(zhe)壹(yi)細(xi)胞(bao)系統(tong)，並(bing)為(wei)科(ke)學(xue)研(yan)究(jiu)提(ti)供(gong)更(geng)多的可能(neng)性和機(ji)會(hui)。

蘇州阿爾法(fa)生物(wu)實(shi)驗(yan)器材有限公司(si)是壹(yi)家16年(nian)專註於提(ti)供(gong)實(shi)驗(yan)室(shi)設備(bei)、實(shi)驗(yan)耗(hao)材和實(shi)驗(yan)試劑(ji)的綜(zong)合(he)性公司(si)。我們(men)帶(dai)動(dong)著(zhe)實(shi)驗(yan)器材行業的發展，為(wei)科(ke)研(yan)人(ren)員(yuan)提(ti)供(gong)高(gao)質(zhi)量、高效(xiao)率(lv)的實(shi)驗(yan)室(shi)解決(jue)方(fang)案(an)。

  除(chu)了(le)日常供應(ying)的實(shi)驗(yan)室(shi)設備(bei)主(zhu)要(yao)包(bao)括：冷(leng)凍離(li)心機(ji)、低(di)速離(li)心機(ji)、微(wei)量離(li)心機(ji)、大(da)容(rong)量離(li)心機(ji)、 迷妳(ni)離(li)心機(ji)移(yi)液器、移(yi)液槍(qiang)、Rainin移(yi)液器、液體處(chu)理(li)工(gong)作站(zhan)、移(yi)液工(gong)作站(zhan)、 磁力攪拌(ban)器、加(jia)熱攪拌(ban)器、電動(dong)攪拌(ban)器、恒(heng)溫(wen)攪拌(ban)器、恒(heng)速攪拌(ban)器、 多功(gong)能(neng)攪拌(ban)器、搖(yao)床恒(heng)溫(wen)振蕩器、氣浴(yu)振(zhen)蕩(dang)器、水浴振(zhen)蕩器、 調速振蕩器、回(hui)旋振(zhen)蕩(dang)器、漩渦振蕩(dang)器、混(hun)勻振(zhen)蕩(dang)器、微(wei)量振蕩(dang)器、 大(da)容(rong)量振蕩(dang)器、多功(gong)能(neng)振蕩器、凝(ning)膠電泳(yong)儀(yi)、電泳(yong)儀(yi)、電泳(yong)槽(cao)、核酸純化(hua)系統、核酸提(ti)取(qu)儀(yi)、 PCR儀(yi)、基(ji)因測序儀、電穿(chuan)孔(kong)儀、基因導入(ru)儀(yi)、DNA合成儀(yi)、 蛋白(bai)質(zhi)純化(hua)系統、細(xi)胞(bao)融(rong)合(he)儀、蛋白(bai)印跡(ji)儀(yi)、化(hua)學(xue)發光儀、流(liu)式(shi)細(xi)胞(bao)儀、細(xi)胞(bao)分(fen)析(xi)儀(yi)、細(xi)胞(bao)計(ji)數儀、 超(chao)凈工(gong)作臺、生物(wu)安(an)全櫃、發酵罐(guan)、細(xi)胞(bao)破碎(sui)儀(yi)、 細(xi)胞(bao)生物(wu)反(fan)應(ying)器、生化培養箱(xiang)、光(guang)照培養箱(xiang)、恒(heng)溫(wen)培養箱(xiang)、 電熱培養箱(xiang)、隔(ge)水式培(pei)養箱(xiang)、CO2培(pei)養箱(xiang)、冷(leng)凍培(pei)養箱(xiang)、 振(zhen)蕩培(pei)養箱(xiang)、低(di)溫(wen)培(pei)養箱(xiang)、人(ren)工(gong)氣候箱、黴(mei)菌(jun)培(pei)養箱(xiang)、 培(pei)養搖(yao)床、多功(gong)能(neng)培養箱(xiang)、厭氧(yang)培(pei)養箱(xiang)、粉(fen)碎(sui)機(ji)、 破碎(sui)機(ji)、研(yan)磨(mo)儀(yi)、球(qiu)磨(mo)機(ji)、組織(zhi)研(yan)磨(mo)器等核心產品。

我們(men)還(hai)提(ti)供(gong)梅(mei)特勒瑞寧Rainin吸(xi)頭(tou)，以(yi)其穩定的和可靠(kao)性贏(ying)得(de)了(le)廣(guang)泛(fan)的認可(ke)。不僅(jin)如(ru)此(ci)，我(wo)們還(hai)引(yin)進了(le)耐(nai)思Nest品牌的細(xi)胞(bao)培養耗(hao)材、PCR耗(hao)材、搖(yao)瓶、細(xi)胞(bao)工(gong)廠、離(li)心管等豐富(fu)系(xi)列(lie)產品(pin)。這些(xie)產(chan)品采用(yong)耐(nai)用(yong)的材料(liao)和精(jing)確(que)的制造(zao)工(gong)藝，確(que)保(bao)了(le)實(shi)驗(yan)的穩定性和準確(que)性。

   此(ci)外(wai)，我們(men)還(hai)提(ti)供(gong)天(tian)根(gen)核酸提(ti)取(qu)試(shi)劑(ji)盒(he)、PCR Taq酶以及(ji)各(ge)種酶等生(sheng)物(wu)試(shi)劑(ji)。我(wo)們(men)的產品(pin)經(jing)過嚴格(ge)的質量控(kong)制，確(que)保(bao)了(le)其在(zai)實(shi)驗(yan)過程(cheng)中的穩定性和可靠(kao)性。碧雲(yun)天生(sheng)化(hua)試(shi)劑(ji)和Biosharp生化(hua)試(shi)劑(ji)則是(shi)我們(men)配套的實(shi)驗(yan)試劑(ji)，可(ke)滿足您在(zai)生物(wu)研(yan)究(jiu)過程(cheng)中的各(ge)種需(xu)求。

為(wei)了(le)保(bao)證實(shi)驗(yan)環境(jing)的清潔(jie)與安(an)全，我們(men)提(ti)供(gong)了(le)哈(ha)爵雅消(xiao)毒劑(ji)系(xi)列(lie)產(chan)品(pin)，包括乙醇(chun)消(xiao)毒液(ye)、異(yi)丙(bing)醇(chun)消(xiao)毒液(ye)、過氧化(hua)氫(qing)消(xiao)毒液(ye)、復(fu)方(fang)季銨鹽(L)消(xiao)毒液(ye)、復(fu)方(fang)過氧化(hua)物(wu)消(xiao)毒液(ye)等(deng)等(deng)。這(zhe)些產(chan)品能(neng)夠有(you)效(xiao)地殺(sha)滅細(xi)菌和病毒，保(bao)護實(shi)驗(yan)器材和樣(yang)本的安(an)全。

 除了(le)耗(hao)材外，我們還(hai)提(ti)供(gong)國產(chan)CHO細(xi)胞(bao)、HEK細(xi)胞(bao)、MDCK細(xi)胞(bao)、腫瘤細(xi)胞(bao)株等(deng)細(xi)胞(bao)產品(pin)服(fu)務(wu)，致力於為生物(wu)領域(yu)的科(ke)學(xue)家提(ti)供(gong)解決(jue)方(fang)案(an)。