使用PCR儀進(jin)行(xing)動(dong)物(wu)源性成(cheng)分的(de)檢測方法

近(jin)年(nian)來(lai)，食品(pin)安(an)全欺(qi)詐(zha)問題日益(yi)突(tu)出，尤其是(shi)肉制品(pin)的(de)摻假現象(xiang)屢見(jian)不(bu)鮮(xian)。本文簡(jian)要(yao)說明(ming)使(shi)用PCR檢測(ce)技術對羊肉產品(pin)中(zhong)若(ruo)幹動(dong)物(wu)源性成(cheng)分的(de)檢測方法。

關鍵詞(ci)：基(ji)因(yin)組(zu)DNA樣品(pin)；凝(ning)膠(jiao)成(cheng)像(xiang)系統；PCR儀

1. 概要(yao)

食品(pin)安(an)全欺(qi)詐(zha)問題給消(xiao)費者(zhe)的(de)身(shen)體(ti)健康和合法權(quan)益造(zao)成(cheng)嚴重(zhong)威脅(xie)。在肉類產(chan)業中(zhong)，羊肉作為(wei)重要(yao)的(de)組成(cheng)部分，其摻假(jia)現象(xiang)越(yue)來越(yue)普遍(bian)。因(yin)此，建立(li)壹(yi)種可靠準(zhun)確(que)的(de)羊肉產品(pin)動(dong)物(wu)源性成(cheng)分檢(jian)測(ce)方(fang)法具(ju)有重(zhong)要(yao)意義(yi)。

2. 試(shi)驗(yan)材料(liao)

2.1 羊肉樣品(pin)：羊肉制品(pin)樣本。

2.2 基因(yin)組(zu)DNA樣品(pin)提取試(shi)劑盒：包(bao)括天根(gen)DNA提取試(shi)劑盒、DNA純(chun)化(hua)柱等(deng)。

2.3 PCR試(shi)劑盒：包(bao)括PCR反(fan)應(ying)液、DNA引物(wu)等，電(dian)泳(yong)試(shi)劑

2.4 實(shi)驗(yan)室儀(yi)器包(bao)括：朗(lang)基PCR儀，Tanon凝(ning)膠(jiao)成(cheng)像(xiang)儀(yi),水平電(dian)泳(yong)槽，電(dian)泳(yong)儀電(dian)源，高(gao)速(su)離心(xin)機(ji)

3. 試(shi)驗(yan)方法

3.1 樣品(pin)的(de)準(zhun)備(bei)

將(jiang)購買的(de)羊肉制品(pin)樣本切(qie)碎(sui)，取(qu)樣品(pin)重(zhong)量(liang)為(wei)10g，放入(ru)1.5mL離心(xin)管中(zhong)備(bei)用。

3.2 DNA樣品(pin)提取

按(an)照天根(gen)基因(yin)組(zu)DNA樣品(pin)提取試(shi)劑盒說明(ming)書(shu)中的(de)操作步驟，從樣品(pin)中(zhong)提取DNA樣品(pin)。將(jiang)提取得(de)到的(de)DNA樣品(pin)置於-20°C保(bao)存(cun)備(bei)用。

3.3 七(qi)重PCR檢測

3.3.1 PCR反(fan)應(ying)體(ti)系準(zhun)備(bei)

按照PCR試(shi)劑盒說明(ming)書(shu)中的(de)操作步驟，將(jiang)所(suo)需(xu)的(de)試(shi)劑按比(bi)例(li)混(hun)合，制備(bei)PCR反(fan)應(ying)液。將(jiang)PCR反(fan)應(ying)液分裝(zhuang)至PCR試(shi)管(guan)中，每(mei)管20μL。

3.3.2 PCR反(fan)應(ying)條(tiao)件(jian)設置

將(jiang)PCR試(shi)管(guan)放入朗(lang)基PCR儀中(zhong)，設置以(yi)下(xia)PCR反(fan)應(ying)條(tiao)件(jian)：預變(bian)性程(cheng)序(xu)，95°C，5分鐘；40個循(xun)環：94°C，30秒(miao)；56°C，45秒(miao)；72°C，45秒(miao)；最終(zhong)延伸(shen)程(cheng)序(xu)，72°C，10分鐘。

3.3.3 凝(ning)膠(jiao)電(dian)泳(yong)分析

將(jiang)PCR反(fan)應(ying)產物(wu)經凝(ning)膠(jiao)電(dian)泳(yong)分析，並(bing)使(shi)用天能凝(ning)膠(jiao)成(cheng)像(xiang)系統進(jin)行(xing)觀察(cha)和記錄(lu)。

4. 結果分析

通過(guo)七(qi)重(zhong)PCR檢(jian)測(ce)技(ji)術(shu)，對羊肉制品(pin)樣本進(jin)行(xing)了(le)動(dong)物(wu)源性成(cheng)分的(de)檢測。根據凝(ning)膠(jiao)電(dian)泳(yong)結果，對不(bu)同樣本中檢(jian)測到的(de)成(cheng)分進(jin)行(xing)鑒定和(he)定量分析，確定(ding)是(shi)否(fou)存(cun)在摻假現象(xiang)。分析結果表明，PCR檢測(ce)技(ji)術(shu)能夠(gou)準(zhun)確(que)可靠地鑒(jian)定羊肉制品(pin)樣本中的(de)動(dong)物(wu)源性成(cheng)分。

本研究(jiu)基於PCR檢測技術(shu)建(jian)立(li)了(le)壹(yi)種(zhong)羊肉產品(pin)中(zhong)動(dong)物(wu)源性成(cheng)分的(de)檢測方法。通過(guo)實(shi)驗(yan)證(zheng)明(ming)，該(gai)方(fang)法能夠(gou)準(zhun)確(que)鑒定(ding)羊肉制品(pin)樣本中的(de)成(cheng)分，並(bing)有(you)效地檢(jian)測出是(shi)否(fou)存(cun)在摻假現象(xiang)。這(zhe)壹(yi)方法在食品(pin)安(an)全監管(guan)和消(xiao)費者(zhe)權(quan)益保(bao)護(hu)方面具(ju)有重(zhong)要(yao)的(de)應(ying)用前(qian)景(jing)。

蘇州阿(e)爾(er)法實(shi)驗(yan)器材(cai)有限(xian)公司(si)致力(li)於生物(wu)實(shi)驗(yan)室儀(yi)器設備(bei)，實(shi)驗(yan)耗材(cai)，實(shi)驗(yan)試(shi)劑的(de)供(gong)應(ying)服(fu)務(wu)14年(nian)以(yi)上(shang)，累(lei)計(ji)服(fu)務(wu)1000多個客戶。

我(wo)們主(zhu)要(yao)經營(ying)的(de)實(shi)驗(yan)室儀(yi)器類(lei)產品(pin)包(bao)括多種(zhong)類型的(de)實(shi)驗(yan)室培(pei)養箱(xiang)，如CO2培(pei)養箱(xiang)、CO2搖床(chuang)、全(quan)溫(wen)振蕩培(pei)養箱(xiang)、恒(heng)溫恒(heng)濕培養箱(xiang)、生(sheng)化(hua)培養箱(xiang)、黴菌培養箱(xiang)、BOD培(pei)養箱(xiang)、低(di)溫(wen)培(pei)養箱(xiang)等(deng)。此外，我(wo)們還提供(gong)移(yi)液器、生(sheng)物(wu)反(fan)應(ying)器、發(fa)酵(jiao)罐(guan)、液氮(dan)罐(guan)、超(chao)純(chun)水(shui)機(ji)、凝(ning)膠(jiao)成(cheng)像(xiang)系統、梯(ti)度(du)PCR儀(yi)、熒(ying)光定(ding)量(liang)PCR儀、高(gao)速(su)離心(xin)機(ji)、臺式(shi)離心(xin)機(ji)、迷妳離心(xin)機(ji)、研(yan)磨(mo)機(ji)、組(zu)織(zhi)研(yan)磨(mo)儀(yi)、低溫(wen)高(gao)速(su)離心(xin)機(ji)潔凈(jing)工作臺等(deng)實(shi)驗(yan)室設備(bei)。

多能幹細(xi)胞，成(cheng)骨誘(you)導分化(hua)培養基,骨(gu)髓(sui)幹細(xi)胞、胚胎(tai)幹細(xi)胞、腫瘤細(xi)胞等細(xi)胞株(zhu)、細(xi)胞系、細(xi)胞培養試(shi)劑、細(xi)胞培養耗材(cai)、實(shi)驗(yan)室消(xiao)毒(du)劑等上(shang)千款產品(pin)，品(pin)類(lei)豐(feng)富(fu)齊全(quan)，可根(gen)據您的(de)需(xu)求，提供(gong)樣機(ji)體(ti)驗(yan)性能服(fu)務(wu)。我(wo)們與(yu)80余家(jia)廠商(shang)企業(ye)合作，其中包(bao)括知(zhi)楚(chu)儀(yi)器(qi)、朗(lang)基、中科(ke)美菱(ling)、梅特勒(le)、樂楓、搏(bo)旅(lv)、NEST、上(shang)海(hai)天能、天根、奧盛(sheng)等(deng)。