技(ji)術(shu)文(wen)章(zhang)
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間充質(zhi)幹細(xi)胞計(ji)數方法(fa)有哪(na)些(xie)?
更新時間(jian):2024-04-07
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目(mu)前間充質(zhi)幹細(xi)胞計(ji)數的(de)方法(fa)有哪(na)些(xie)? 都(dou)有什(shen)麽(me)優勢和弊(bi)端?
計數(shu)間(jian)充質(zhi)幹細(xi)胞(MSCs)是實驗室(shi)研(yan)究應用中(zhong)的(de)壹(yi)個重(zhong)要步驟(zhou)。目(mu)前,科學(xue)家們使(shi)用多(duo)種(zhong)方法(fa)來(lai)計數(shu)這些細(xi)胞,每(mei)種方法(fa)都(dou)有其(qi)優勢和潛(qian)在的(de)局限性。
1. 流式(shi)細(xi)胞儀(yi) (Flow Cytometry )
優勢:
高(gao)通(tong)量和快(kuai)速(su):能(neng)夠在短(duan)時(shi)間內分(fen)析和計(ji)數(shu)成(cheng)千(qian)上萬的(de)細(xi)胞。
多(duo)參數(shu)分(fen)析:可(ke)以同時測定細(xi)胞的(de)多種(zhong)特(te)性,如(ru)大(da)小、復雜度和表(biao)面(mian)標誌物。
精(jing)確(que)性:通過(guo)使(shi)用特(te)定的(de)細(xi)胞表(biao)面(mian)標誌物,流(liu)式(shi)細(xi)胞儀(yi)可(ke)以高(gao)度(du)特(te)異(yi)性地(di)識別MSCs。
弊端:
成(cheng)本(ben)高(gao):儀(yi)器昂(ang)貴且(qie)運(yun)行(xing)成(cheng)本(ben)較高(gao)。
技(ji)術(shu)要(yao)求高(gao):需(xu)要(yao)專(zhuan)門的(de)技(ji)術(shu)知識和經(jing)驗來(lai)正確(que)操作和解析數(shu)據。
細(xi)胞損傷(shang):樣(yang)本(ben)準備(bei)過(guo)程(cheng)可(ke)能(neng)對細(xi)胞造(zao)成(cheng)損傷(shang)。
2. 顯(xian)微鏡(jing)計數(shu)配合(he)血(xue)球(qiu)計(ji)數(shu)板(ban)
優勢:
直(zhi)觀(guan):直(zhi)接(jie)觀察(cha)細(xi)胞的(de)形態和狀(zhuang)態。
成(cheng)本(ben)低(di):不(bu)需(xu)要(yao)昂(ang)貴的(de)設備(bei)。
操作簡單:基(ji)本(ben)的(de)顯微(wei)技(ji)術(shu)容(rong)易掌握。
弊端:
低(di)通量:計(ji)數過(guo)程(cheng)耗(hao)時,不(bu)適(shi)合(he)大(da)批量樣(yang)本(ben)。
主觀性(xing):計數結果(guo)可(ke)能(neng)受到(dao)操作者技(ji)能(neng)和經(jing)驗的(de)影響(xiang)。不(bu)合(he)規(gui)。
3. 傳統細(xi)胞計(ji)數儀
優勢:
快(kuai)速(su)和高(gao)效(xiao):能(neng)夠迅(xun)速(su)計(ji)數大(da)量樣(yang)本(ben)。
用戶友(you)好:操作簡便(bian),多數(shu)設備(bei)提(ti)供壹(yi)鍵(jian)計數(shu)功能(neng)。
準確(que)性:排除了人員引(yin)入(ru)的(de)個體 隨機(ji)誤差(cha) 。
弊端:
傳統(tong)的(de)細(xi)胞計(ji)數儀區分(fen)能(neng)力(li)有限(xian):可(ke)能(neng)因為(wei)算(suan)法(fa)的(de)問題(ti),無法(fa)對MSCs細(xi)胞進(jin)行(xing)精(jing)確(que)的(de)劃分(fen)。
成(cheng)本(ben):雖比(bi)流式細(xi)胞儀(yi)低(di),但仍需(xu)壹(yi)定投資,除了主機(ji)費用,還(hai)有壹(yi)次(ci)性計(ji)數(shu)板(ban)的(de)費用。只(zhi)要(yao)使(shi)用就(jiu)會(hui)花(hua)錢。
智能(neng)細(xi)胞計(ji)數儀
間充質(zhi)幹細(xi)胞的(de)準確(que)劃分(fen)和計(ji)數(shu)依賴(lai)於多種技(ji)術(shu)和方法(fa)的(de)綜(zong)合(he)應用。高(gao)分(fen)生物出(chu)品(pin)的(de)halo Counter HD系列(lie)智能(neng)細(xi)胞計(ji)數儀利用深(shen)度(du)學(xue)習AI技(ji)術(shu),解決(jue)了傳統(tong)細(xi)胞計(ji)數儀對MSCs細(xi)胞劃(hua)分(fen)普遍(bian)存在的(de)偏(pian)離真實(shi)值較大(da)的(de)問題(ti)(見下圖(tu))。HD系(xi)列(lie)計數(shu)儀既能(neng)識別完(wan)整(zheng)的(de)大(da)細(xi)胞也(ye)不(bu)會(hui)漏掉直(zhi)徑(jing)相(xiang)差5倍(bei)以(yi)上的(de)小細(xi)胞,並(bing)且(qie)都(dou)能(neng)準備(bei)的(de)圈選(xuan)上。經過(guo)和“血(xue)球(qiu)計(ji)數(shu)板(ban)"對比(bi),發(fa)現(xian)高(gao)分(fen)生物的(de)HD系列(lie)產品(pin)對MSCs細(xi)胞的(de)劃分(fen)準確(que)性非(fei)常高(gao),兩(liang)者之間的(de)誤差(cha)小於1%。

圖(tu)1 傳(chuan)統方法(fa)壹(yi)些(xie)錯(cuo)誤(wu)的(de)劃分(fen)結果(guo)

圖(tu)2 高(gao)分(fen)生物Halo Counter細(xi)胞計(ji)數儀劃分(fen)結果(guo)
不(bu)僅如(ru)此,Halo Counter的(de)可(ke)重(zhong)復利用的(de)細(xi)胞點(dian)樣(yang)臺,改變(bian)了依靠壹(yi)次(ci)性計(ji)數(shu)板(ban)來(lai)進(jin)行(xing)計(ji)數的(de)方式。8個樣(yang)品(pin)壹(yi)次(ci)性加入(ru)到(dao)樣(yang)品(pin)臺,點擊計數,8個結果(guo)壹(yi)次(ci)性給(gei)出(chu)。打開(kai)樣(yang)品(pin)臺上蓋,壹(yi)次(ci)即(ji)可(ke)清(qing)潔8個樣(yang)品(pin)臺,進(jin)入(ru)下壹(yi)次(ci)高(gao)通(tong)量計數。

不(bu)僅如(ru)此,高(gao)分(fen)生物Halo Counter系(xi)列(lie)可(ke)提(ti)供完(wan)備(bei)3Q認(ren)證(zheng)及審計(ji)追蹤(zong)模塊(kuai),符(fu)合(he)FDA及GXP相(xiang)關法(fa)規(gui)認(ren)證(zheng)需(xu)求(qiu)。
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