分(fen)子生物(wu)學(xue)常(chang)用溶液(ye)配制

壹、分(fen)子生物(wu)學(xue)常(chang)用貯(zhu)存(cun)液(ye)的(de)配制

1．30%丙(bing)烯酰(xian)胺(an)溶(rong)液(ye)

【配制方(fang)法(fa)】將(jiang) 29g 丙(bing)怖(bu)酷膠(jiao)和(he) 1gN ，N’- 亞(ya)甲雙(shuang)丙(bing)怖(bu)酷膠(jiao)溶於總體(ti)積為 60ml  的(de)水(shui)中(zhong)。加(jia)熱(re)至(zhi) 37校溶(rong)解之(zhi)， 補加(jia)水(shui)至(zhi)終體(ti)積為 100ml。用濾(lv)器（0.45μm 孔(kong)徑(jing)） 過濾除(chu)菌，查(zha)證該溶(rong)液(ye)的(de) pH 值(zhi)應不大(da)於 7.0，置(zhi)棕(zong)色(se)瓶中(zhong)保(bao)存(cun)於室(shi)溫(wen)。

【註(zhu)意】丙(bing)怖(bu)酷膠(jiao)具有(you)很強(qiang)的(de)神(shen)經毒(du)性(xing)並可(ke)以(yi)通(tong)過皮膚(fu)吸收，其作(zuo)用(yong)具累積性(xing)。 稱(cheng)量(liang)丙(bing)怖(bu)酷膠(jiao)和(he)亞(ya)甲雙(shuang)丙(bing)怖(bu)酷膠(jiao)時應戴手套(tao)和(he)面具(ju)。可(ke)認(ren)為聚丙(bing)怖(bu)酷膠(jiao)無毒(du)， 但

也應謹慎操(cao)作(zuo)，因(yin)為它還(hai)可(ke)能會(hui)含(han)有少(shao)量(liang)未(wei)聚(ju)合材(cai)料(liao)。

壹些(xie)價格(ge)較低的(de)丙(bing)怖(bu)酷膠(jiao)和(he)雙(shuang)丙(bing)怖(bu)酷膠(jiao)通常(chang)含有(you)壹些(xie)金屬(shu)離子(zi)， 在(zai)丙(bing)怖(bu)酷膠(jiao)貯(zhu)存(cun) 液(ye)中(zhong)加(jia)入大(da)約(yue) 0.2 體(ti)積的(de)單床混合樹(shu)脂(zhi)（MB-1Mallinckrodt），攪(jiao)拌過夜(ye)，然(ran)後

用 Whatman 1 號(hao)濾(lv)紙過濾以(yi)純(chun)化(hua)之(zhi)。

在(zai)貯(zhu)存(cun)期(qi)間(jian)，丙(bing)怖(bu)酷膠(jiao)和(he)雙(shuang)丙(bing)怖(bu)酷膠(jiao)會(hui)緩慢(man)轉化(hua)成(cheng)丙(bing)怖(bu)酷和(he)雙(shuang)丙(bing)怖(bu)酸。 2．40%丙(bing)烯酰(xian)胺(an)

【配制方(fang)法(fa)】把380g 丙(bing)烯酰(xian)胺(an)（DNA 測(ce)序(xu)級(ji)）和(he)20gN，N’- 亞(ya)甲雙(shuang)丙(bing)烯酰(xian)胺(an)溶(rong) 於總體(ti)積為 600ml 的(de)蒸餾(liu)水(shui)中(zhong)。繼(ji)續按上(shang)述(shu)配制 30%丙(bing)烯酰(xian)胺(an)溶(rong)液(ye)的(de)方法(fa)處(chu)理(li)，

但加(jia)熱(re)溶(rong)解後應以(yi)蒸(zheng)餾(liu)水(shui)補(bu)足至(zhi)終體(ti)積為 1L。

【註意】見(jian)上(shang)述(shu)配制 30%丙(bing)烯酰(xian)胺(an)的(de)說(shuo)明,40%丙(bing)烯酰(xian)胺(an)溶(rong)液(ye)用(yong)於 DNA 序(xu)列(lie)測(ce)定。 3．放(fang)線菌(jun)素(su)D 溶液(ye)

【配制方(fang)法(fa)】把 20mg 放(fang)線菌(jun)素(su) D 溶解於 4ml 100%乙(yi)醇中(zhong)， 1:10 稀釋貯(zhu)存(cun)液(ye)，

用(yong) 100%乙(yi)醇作(zuo)空(kong)白(bai)對(dui)照讀取(qu) OD440 值(zhi)。放(fang)線菌(jun)素(su) D（分(fen)子量(liang)為 1255）純品(pin)在(zai)水(shui) 溶(rong)液(ye)中(zhong)的(de)摩(mo)爾(er)消化(hua)系數為 21，900，故而(er) 1mg/ml 的(de)放(fang)線菌(jun)素(su) D 溶液(ye)在(zai) 440nm 處(chu) 的(de)吸光值(zhi)為 0.182，放(fang)線菌(jun)素(su) D 的(de)貯(zhu)存(cun)液(ye)應放(fang)在(zai)包(bao)有(you)箔(bo)片(pian)的(de)試管中(zhong)， 保(bao)存(cun)於-20℃。 【註(zhu)意】放(fang)線菌(jun)素(su) D 是致(zhi)畸(ji)劑(ji)和(he)致(zhi)癌劑(ji),配制該溶(rong)液(ye)時(shi)必(bi)須(xu)戴手套(tao)並在(zai)通(tong)風(feng)櫥(chu)內(nei) 操(cao)作(zuo), 而(er)不能(neng)在(zai)開(kai)放(fang)在(zai)實(shi)驗桌面上(shang)進(jin)行(xing),謹防吸入藥(yao)粉(fen)或(huo)讓其接(jie)觸(chu)到眼睛或(huo)皮膚(fu)。  藥(yao)廠(chang)提供的(de)作(zuo)治療用(yong)途(tu)的(de)放(fang)線菌(jun)素(su) D 制品(pin)常含有糖(tang)或(huo)鹽等添(tian)加(jia)劑(ji)。只要(yao)通(tong)過測  量(liang)貯(zhu)存(cun)液(ye)在(zai) 440nm 波長處(chu)的(de)光吸收(shou)確(que)定放(fang)線菌(jun)素(su) D 的(de)濃(nong)度，這(zhe)類(lei)制品(pin)便可(ke)用於

抑制自(zi)身引導作(zuo)用(yong)。

4．0.1mol/L 腺(xian)苷(gan)三磷(lin)酸(suan)（ATP ）溶(rong)液(ye)

【配制方(fang)法(fa)】在(zai) 0.8ml 水(shui)中(zhong)溶解 60mg ATP, 用 0.1mol/L NaOH 調至(zhi) pH 值(zhi)至(zhi) 7.0， 用蒸(zheng)餾(liu)水(shui)定容 1ml，分(fen)裝成(cheng)小(xiao)份(fen)保(bao)存(cun)於-70℃

5．10mol/L 乙(yi)酸酰(xian)溶(rong)液(ye)

【配制方(fang)法(fa)】把 770g 乙(yi)酸酰(xian)溶(rong)解於 800ml 水(shui)中(zhong)，加(jia)水(shui)定容至(zhi) 1L 後過濾除(chu)菌。 6．10%過硫(liu)酸(suan)銨溶液(ye)

【配制方(fang)法(fa)】把 1g 過硫(liu)酸(suan)銨溶解於終量(liang)為 10ml 的(de)水(shui)溶(rong)液(ye)中(zhong)， 該溶(rong)液(ye)可(ke)在(zai) 4℃保(bao) 存(cun)數周。

7．BCIP 溶(rong)液(ye)

【配制方(fang)法(fa)】把 0.5g 的(de) 5-溴-4- 氯(lv)-3-吲(yin)哚(duo)磷(lin)酸(suan)二(er)鈉鹽(yan)（BCIP）溶解於 10ml 100% 的(de)二甲基甲酰(xian)胺(an)中(zhong)，保(bao)存(cun)於 4℃

8．2×BES 緩沖(chong)鹽溶液(ye)

【配制方(fang)法(fa)】用(yong)總體(ti)積 90ml 的(de)蒸餾(liu)水(shui)溶(rong)解 1.07g 鹽溶液(ye) BES[N ，N-雙(shuang)-2-氨基乙(yi)磺(huang)酸 、1.6g NaCl 和(he) 0.027gNa2HPO4 ，室溫(wen)下用 HCl 調(tiao)節(jie)該溶(rong)液(ye)的(de) pH 值(zhi)至(zhi) 6.96、然(ran)後加(jia)入蒸(zheng)餾(liu)水(shui)定容至(zhi) 100ml，用 0.22μm濾(lv)器過濾除(chu)菌， 分(fen)裝成(cheng) 小(xiao)份(fen)，保(bao)存(cun)於-20℃。

9．1mol/L CaCl2 溶(rong)液(ye)

【配制方(fang)法(fa)】在(zai) 200ml 蒸(zheng)餾(liu)水(shui)中(zhong)溶解 54g CaCl2 · 6H2O，用 0.22μm 濾器過濾除(chu)菌， 分(fen)裝成(cheng) 10ml 小(xiao)份(fen)貯(zhu)存(cun)於-20℃。

【註(zhu)意】制備(bei)感(gan)受態(tai)細(xi)胞時， 取(qu)出壹小(xiao)份(fen)解凍並用(yong)蒸(zheng)餾(liu)水(shui)稀釋至(zhi) 100ml，用 Nalgene 濾(lv)器（0.45μm孔(kong)徑(jing)）過濾除(chu)菌，然(ran)後驟(zhou)冷至(zhi) 0℃。

10．2.5mol/L CaCl2 溶液(ye)

【配制方(fang)法(fa)】在(zai) 20ml 蒸(zheng)餾(liu)水(shui)中(zhong)溶解 13.5g CaCl2·6H2 O，用 0.22μm 濾器過濾除(chu)菌 ， 分(fen)裝成(cheng) 1ml 小(xiao)份(fen)貯(zhu)存(cun)於-20℃。

11．1mol/L 二(er)硫(liu)蘇糖醇（DTT ）溶(rong)液(ye)

【配制方(fang)法(fa)】用(yong) 20ml 0.01mol/L 乙(yi)酸鈉溶(rong)液(ye)（pH5.2）溶(rong)解 3.09g DTT，過濾除(chu) 菌後分(fen)裝成(cheng) 1ml 小(xiao)份(fen)貯(zhu)存(cun)於-20℃。

【註(zhu)意】DTT 或(huo)含有(you) DTT 的(de)溶液(ye)不(bu)能(neng)進(jin)行(xing)高(gao)壓(ya)處(chu)理(li)。

12．脫(tuo)氧核苷三磷(lin)酸(suan)（ dNTP ）溶(rong)液(ye)

【配制方(fang)法(fa)】把每(mei)壹種 dNTP 溶解於水(shui)至(zhi)濃(nong)度各為 100mmol/L 左右，用微(wei)量(liang)移(yi)  液(ye)器吸取0.05mol/l Tris 堿(jian)分(fen)別調(tiao)節(jie)每(mei)壹dNTP 溶(rong)液(ye)的(de)pH 值(zhi)7 . 0（用(yong) pH 試(shi)紙檢測 ）， 把中(zhong)和(he)後的(de)每(mei)種 dNTP 溶液(ye)各取壹份(fen)作(zuo)適(shi)當稀釋， 在(zai)下表中(zhong)給出(chu)的(de)波長下讀取(qu)光(guang)

密(mi)度計算出(chu)每(mei)種 dNTP 的(de)實(shi)際(ji)濃(nong)度，然(ran)後用水(shui)稀釋成(cheng)終濃(nong)度為 50mmol/L 的(de)

dNTP，分(fen)裝成(cheng)小(xiao)份(fen)貯(zhu)存(cun)於-70℃。

13．0.5mol/l EDTA(pH8.0)溶(rong)液(ye)

【配制方(fang)法(fa)】在(zai)800ml 水(shui)中(zhong)加(jia)入 186.1g 二(er)水(shui)乙(yi)二胺(an)四乙(yi)酸二(er)鈉（EDTA-Na·2H2O）， 在(zai)磁(ci)力(li)攪(jiao)拌器上(shang)劇(ju)烈攪(jiao)拌，用 NaOH 調(tiao)節(jie)溶(rong)液(ye)的(de) pH 值(zhi)至(zhi) 8.0（約需 20g NaOH    顆粒(li)）然(ran)後定容至(zhi) 1L，分(fen)裝後(hou)高(gao)壓(ya)滅(mie)菌(jun)備(bei)用。

【註(zhu)意】EDTA 二鈉鹽(yan)需加(jia)入 NaOH 將(jiang)溶液(ye)的(de) pH 值(zhi)調(tiao)至(zhi)接近(jin) 8.0,才(cai)能(neng)全(quan)溶(rong)解。 14．溴化乙(yi)錠(ding)（ 10mg/ml 溶液(ye)）

【配制方(fang)法(fa)】在(zai) 100ml 水(shui)中(zhong)加(jia)入 1g 溴(xiu)化(hua)乙(yi)錠(ding)，磁力(li)攪(jiao)拌數小(xiao)時以(yi)確(que)保(bao)其全(quan)溶(rong) 解，然(ran)後用鋁(lv)箔(bo)包裹容器或(huo)轉移(yi)至(zhi)棕(zong)色(se)瓶中(zhong)，保(bao)存(cun)於室(shi)溫(wen)。

【註(zhu)意】小心： 溴化(hua)乙(yi)錠(ding)是強(qiang)誘(you)變(bian)劑並有(you)中(zhong)度毒(du)性(xing)， 使(shi)用(yong)含(han)有(you)這(zhe)種染料(liao)的(de)溶液(ye)時(shi) 務(wu)必(bi)戴上(shang)手(shou)套(tao)，稱量(liang)染(ran)料時(shi)要(yao)戴面罩(zhao)。

15．2×HEPES 緩沖(chong)鹽溶液(ye)

【配制方(fang)法(fa)】用(yong)總量(liang)為 90ml 的(de)蒸餾(liu)水(shui)溶(rong)解 1.6g NaCl、0.074g KCl、0.027g

Na2PO4·2H2O 、0.2g 葡(pu)聚糖(tang)和(he) 1gHEPES ，用 0.5mol/l NaOH 調(tiao)節(jie) pH 值(zhi)至(zhi) 7.05，

再用蒸餾(liu)水(shui)定容至(zhi) 100ml。用 0.22μm濾(lv)器過濾除(chu)菌， 分(fen)裝成(cheng) 5ml 小(xiao)份(fen)， 貯(zhu)存(cun)於- 20℃。

16．IPTG 溶(rong)液(ye)

【配制方(fang)法(fa)】IPTG 為異丙(bing)基硫(liu)代(dai)- β-D-半(ban)乳(ru)糖(tang)苷(gan)（分(fen)子量(liang)為 238.3），在(zai) 8ml 蒸(zheng) 餾(liu)水(shui)中(zhong)溶解 2g IPTG 後， 用蒸餾(liu)水(shui)定容至(zhi) 10ml，用 0.22μm濾(lv)器過濾除(chu)菌， 分(fen)裝 成(cheng) 1ml 小(xiao)份(fen)貯(zhu)存(cun)於-20℃。

17．1mol/L 乙(yi)酸鎂(mei)溶(rong)液(ye)

【配制方(fang)法(fa)】在(zai) 800ml 水(shui)中(zhong)溶解 214.46g 四水(shui)乙(yi)酸鎂(mei)， 用(yong)水(shui)定容至(zhi) 1L 過濾除(chu)菌。 18．1mol/L MgCl2 溶液(ye)

【配制方(fang)法(fa)】在(zai) 800ml 水(shui)中(zhong)溶解 203.4g MgCl2·6H2O，用水(shui)定容至(zhi) 1L，分(fen)裝成(cheng)小(xiao) 份(fen)並高(gao)壓(ya)滅(mie)菌(jun)備(bei)用。

【註(zhu)意】MgCl2 極易(yi)潮(chao)解， 應選(xuan)購(gou)小瓶（如(ru) 100g）試劑， 啟(qi)用(yong)新(xin)瓶(ping)後勿長期(qi)存放(fang)。 19. β- （BME ）溶(rong)液(ye)

【配制方(fang)法(fa)】壹般得到的(de)是 14.4mol/L 溶液(ye)，應裝在(zai)棕(zong)色(se)瓶中(zhong)保(bao)存(cun)於 4℃。

【註(zhu)意】BME 或(huo)含有(you) BME 的(de)溶液(ye)不(bu)能(neng)高(gao)壓(ya)處(chu)理(li)。

20．NBT 溶(rong)液(ye)

【配制方(fang)法(fa)】把 0.5g 氯(lv)化(hua)氮(dan)藍(lan)四唑溶解於 10ml 70%的(de)二甲基甲酰(xian)胺(an)中(zhong),保(bao)存(cun)於 4℃。

21．酚(fen)/氯(lv)仿溶(rong)液(ye)

【配制方(fang)法(fa)】把酚(fen)和(he)氯(lv)仿等體(ti)積混(hun)合後(hou)用(yong) 0.1mol/L Tris ·HCl(pH7.6)抽提幾次(ci)以(yi)平(ping) 衡(heng)這(zhe)混合物(wu),置(zhi)棕(zong)色(se)玻璃(li)瓶(ping)中(zhong),上(shang)面(mian)覆(fu)蓋(gai)等體(ti)積的(de) 0.01mol/l Tris ·HCl(pH=7.6)液(ye)層,  保(bao)存(cun)於 4℃。

【註(zhu)意】酚(fen)腐蝕(shi)性(xing)很(hen)強(qiang)， 並可(ke)引起(qi)嚴(yan)重(zhong)灼傷， 操作(zuo)時(shi)應戴手套(tao)及(ji)防護(hu)鏡， 穿(chuan)防護(hu) 服。所有操(cao)作(zuo)均(jun)應在(zai)化(hua)學(xue)通(tong)風櫥(chu)中(zhong)進行(xing)。與(yu)酚(fen)接(jie)觸過的(de)部位皮膚(fu)應用大(da)量(liang)的(de)水(shui)清(qing)

洗，並用(yong)肥皂和(he)水(shui)洗(xi)滌，忌用乙(yi)醇。

22．10mmol/L （ PMSF ）溶(rong)液(ye)

【配制方(fang)法(fa)】用(yong)異(yi)丙(bing)醇溶(rong)解 PMSF 成(cheng) 1.74mg/ml（10mmol/L），分(fen)裝成(cheng)小(xiao)份(fen)貯(zhu)存(cun) 於-20℃。如(ru)有(you)必(bi)要(yao)可(ke)配成(cheng)濃(nong)度高(gao)達(da) 17.4mg/ml 的(de)貯(zhu)存(cun)液(ye)（100mmol/L）。

【註(zhu)意】PMSF 嚴(yan)重(zhong)損害(hai)呼吸道(dao)粘(zhan)膜、眼睛及(ji)皮膚(fu)，吸入、吞(tun)進或(huo)通過皮膚(fu)吸收 後有致(zhi)命危(wei)險(xian)。 壹旦(dan)眼睛或(huo)皮膚(fu)接觸了 PMSF，應立(li)即(ji)用大(da)量(liang)水(shui)沖(chong)洗之(zhi)。凡被(bei)

PMSF 汙染(ran)的(de)衣(yi)物(wu)應予丟(diu)棄(qi)。

PMSF 在(zai)水(shui)溶(rong)液(ye)中(zhong)不穩(wen)定。應在(zai)使(shi)用(yong)前(qian)從(cong)貯(zhu)存(cun)液(ye)中(zhong)現用(yong)現加(jia)於裂(lie)解緩沖(chong)液(ye)中(zhong)。

PMSF 在(zai)水(shui)溶(rong)液(ye)中(zhong)的(de)活性(xing)喪(sang)失(shi)速(su)率(lv)隨 pH 值(zhi)的(de)升(sheng)高(gao)而(er)加(jia)快(kuai)， 且(qie) 25℃的(de)失活速(su)率(lv)高(gao) 於 4℃。pH 值(zhi)為 8.0 時,20μmmol/l PMSF 水(shui)溶(rong)液(ye)的(de)半壽(shou)期大(da)約(yue)為 85min，這(zhe)表明  將(jiang) PMSF 溶液(ye)調(tiao)節(jie)為堿(jian)性(xing)（pH>8.6）並在(zai)室(shi)溫(wen)放(fang)置(zhi)數(shu)小(xiao)時(shi)後,可(ke)安全(quan)地(di)予(yu)以(yi)丟(diu)棄(qi)。 23．磷(lin)酸(suan)鹽(yan)緩沖(chong)溶液(ye)（PBS ）溶(rong)液(ye)

【配制方(fang)法(fa)】在(zai)800ml 蒸(zheng)餾(liu)水(shui)中(zhong)溶解 8g NaCl、0.2g KCl、1.44gNa2HPO4 和(he) 0.24g KH2PO4,用 HCl 調(tiao)節(jie)溶(rong)液(ye)的(de) pH 值(zhi)至(zhi) 7.4 加(jia)水(shui)定容至(zhi) 1L，在(zai) 15lbf/in2(1034 × 105Pa) 高(gao)壓(ya)下蒸氣(qi)滅(mie)菌 20min。保(bao)存(cun)於室(shi)溫(wen)。

24．1mol/L 乙(yi)酸鉀(jia)（pH=7.5 ）溶液(ye)

【配制方(fang)法(fa)】將(jiang) 9.82g 乙(yi)酸鉀(jia)溶解於 90ml 純(chun)水(shui)中(zhong)，用 2mol/L 乙(yi)酸調(tiao)節(jie) pH 值(zhi)至(zhi)

7.5 後加(jia)入純(chun)水(shui)定容到 1L，保(bao)存(cun)於-20℃。

25． 乙(yi)酸鉀(jia)溶液(ye)（ 用(yong)於堿(jian)裂(lie)解）

【配制方(fang)法(fa)】在(zai) 60ml 5mol/L 乙(yi)酸鉀(jia)溶液(ye)中(zhong)加(jia)入 11.5ml 冰(bing)乙(yi)酸和(he) 28.5ml 水(shui)，即(ji)

成(cheng)鉀(jia)濃(nong)度為 3mol/L 而(er)乙(yi)酸根濃(nong)度為 5mol/L 的(de)溶液(ye)。

26．3mol/L 乙(yi)酸鈉（pH5.2 和(he) pH7.0 ）溶液(ye)

【配制方(fang)法(fa)】在(zai) 80ml 水(shui)中(zhong)溶解 408.1g 三水(shui)乙(yi)酸鈉，用(yong)冰(bing)乙(yi)酸調(tiao)節(jie) pH 值(zhi)至(zhi) 5.2 或(huo)用稀乙(yi)酸調(tiao)節(jie) pH 值(zhi)至(zhi) 7.0，加(jia)水(shui)定容到 1L，分(fen)裝後(hou)高(gao)壓(ya)滅(mie)菌(jun)。

27．5mol/L NaCl 溶液(ye)

【配制方(fang)法(fa)】

在(zai) 800ml 水(shui)中(zhong)溶解 292.2g NaCl 加(jia)水(shui)定容至(zhi) 1L，分(fen)裝後(hou)高(gao)壓(ya)滅(mie)菌(jun)。 28．10%十二烷(wan)基硫(liu)酸(suan)鈉（ SDS ）溶(rong)液(ye)

【配制方(fang)法(fa)】在(zai) 900ml 水(shui)中(zhong)溶解 100g 電泳級(ji) SDS，加(jia)熱(re)至(zhi) 68℃助溶(rong)， 加(jia)入幾(ji)滴(di) 濃(nong)鹽酸調(tiao)節(jie)溶(rong)液(ye)的(de) pH 值(zhi)至(zhi) 7.2，加(jia)水(shui)定容至(zhi) 1L，分(fen)裝備(bei)用。

【註(zhu)意】SDS 的(de)微細(xi)晶(jing)粒易(yi)擴散， 因此(ci)稱量(liang)時(shi)要(yao)戴面罩(zhao)， 稱(cheng)量(liang)完(wan)畢(bi)後要(yao)清(qing)除殘留 在(zai)稱(cheng)量(liang)工作(zuo)區(qu)和(he)天平(ping)上(shang)的(de) SDS ，10%SDS 溶液(ye)無(wu)須(xu)滅(mie)菌。

29．20×SSC 溶液(ye)

【配制方(fang)法(fa)】在(zai)800ml 水(shui)中(zhong)溶解 175.3g NaCl 和(he) 88.2g 檸(ning)檬(meng)酸鈉， 加(jia)入數(shu)滴(di) 10mol/l NaOH 溶液(ye)調(tiao)節(jie) pH 值(zhi)至(zhi) 7.0，加(jia)水(shui)定容至(zhi) 1L，分(fen)裝後(hou)高(gao)壓(ya)滅(mie)菌(jun)。

30．20×SSPE 溶液(ye)

【配制方(fang)法(fa)】在(zai) 800ml 水(shui)中(zhong)溶解 17.5g NaCl、27.6g NaH2PO4·H2 O 和(he) 7.4g EDTA, 用 NaOH 溶(rong)液(ye)調(tiao)節(jie) pH 值(zhi)至(zhi) 7.4（約需 6.5ml 10ml/L NaOH）,加(jia)水(shui)定容至(zhi) 1L,分(fen)裝 後(hou)高(gao)壓(ya)滅(mie)菌(jun)。

31．100% C2HCl3O2溶液(ye)

【配制方(fang)法(fa)】在(zai)裝(zhuang)有(you) 500g TCA 的(de)瓶中(zhong)加(jia)入 227ml 水(shui)，形(xing)成(cheng)的(de)溶液(ye)含(han)有(you) 1 0 0 %（M/V）

TCA。

32．1mol/L Tris 溶(rong)液(ye)

【配制方(fang)法(fa)】在(zai) 800ml 水(shui)中(zhong)溶解 121.91g Tris 堿(jian),加(jia)入濃(nong) HCl 調節(jie) pH 值(zhi)至(zhi)所需值(zhi)。

pHHCl          7.4 70ml                     7.6 60ml                           8.0 42ml

 應使溶(rong)液(ye)冷(leng)至(zhi)室溫(wen)後(hou)方(fang)可(ke)最後調(tiao)定 pH 值(zhi)，加(jia)水(shui)定容至(zhi) 1L，分(fen)裝後(hou)高(gao)壓(ya)滅(mie)菌(jun)。 【註意】如 1mol/L 溶(rong)液(ye)呈(cheng)現黃(huang)色(se)，應予丟(diu)棄(qi)並置(zhi)備(bei)質(zhi)量(liang)更(geng)好的(de) Tris。

盡管多(duo)種類(lei)型(xing)的(de)電極均(jun)不(bu)能(neng)準(zhun)確(que)測(ce)量(liang) Tris 溶(rong)液(ye)的(de) pH 值(zhi)，但仍(reng)可(ke)向(xiang)大(da)多(duo)數(shu)廠(chang)商購(gou) 得合適(shi)的(de)電極。

Tris 溶(rong)液(ye)的(de) pH 值(zhi)因(yin)溫(wen)度而(er)異， 溫(wen)度每(mei)升(sheng)高(gao) 1℃ , pH 值(zhi)大(da)約(yue)降(jiang)低 0.03 個(ge)單位。例 如： 0.05mol/L 的(de)溶液(ye)在(zai) 5℃ 、25℃、和(he) 37℃時的(de) pH 值(zhi)分(fen)別為 9.5、8.9 和(he) 8.6。 33．Tris 緩沖(chong)鹽溶液(ye)（ TBS ）（25mmol/l Tris ）

【配制方(fang)法(fa)】在(zai)800ml 蒸(zheng)餾(liu)水(shui)中(zhong)溶解 8g NaCl、0.2g KCl 和(he) 3g Tris 堿(jian)，加(jia)入 0.015g

酚(fen)並用(yong) HCl 調(tiao)至(zhi) pH 值(zhi)至(zhi) 7.4，用蒸(zheng)餾(liu)水(shui)定容至(zhi) 1L，分(fen)裝後(hou)在(zai)

151bf/in2(1.034 × 105Pa)高(gao)壓(ya)下蒸汽(qi)滅(mie)菌 20min，於室(shi)溫(wen)保(bao)存(cun)。

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