瓊脂(zhi)糖凝(ning)膠(jiao)電泳原(yuan)理機實驗方(fang)法(fa)

DNA，即(ji)脫氧(yang)核(he)糖核酸(suan)，是(shi)構(gou)成(cheng)生(sheng)命基(ji)礎的(de)分子。我們(men)可(ke)以通(tong)過瓊脂(zhi)糖凝(ning)膠(jiao)電泳技(ji)術(shu)來檢測(ce)、分離並研究DNA分子。瓊脂(zhi)糖凝(ning)膠(jiao)電泳是(shi)壹種(zhong)重要的分子生(sheng)物學實驗方(fang)法(fa)，可以幫助我們(men)了解 DNA的結(jie)構(gou)和(he)功能(neng)。本(ben)文將帶(dai)您了解瓊脂(zhi)糖凝(ning)膠(jiao)電泳技(ji)術(shu)，並介紹(shao)其(qi)在DNA研究中的應(ying)用。

實驗原(yuan)理

在瓊脂(zhi)糖凝(ning)膠(jiao)電泳中(zhong)，DNA分子會受(shou)到(dao)電(dian)荷效應(ying)和(he)分子篩(shai)效(xiao)應(ying)的影(ying)響(xiang)而(er)遷移(yi)。DNA分子在高於(yu)其(qi)等電(dian)點的溶液(ye)中具有負電(dian)荷，因(yin)此(ci)在電場(chang)的(de)作(zuo)用(yong)下(xia)會向正(zheng)極(ji)移(yi)動(dong)。所有(you)DNA雙(shuang)鏈分子幾乎(hu)具有相同數量(liang)的(de)凈(jing)電荷(he)，因(yin)此(ci)它們(men)會以相同的(de)速度(du)向(xiang)正(zheng)極(ji)移(yi)動(dong)。在壹定的(de)電(dian)場(chang)強(qiang)度(du)下(xia)，DNA分子的遷移(yi)速(su)度取(qu)決(jue)於(yu)其(qi)大小和(he)構(gou)型(xing)，即(ji)分子篩(shai)效(xiao)應(ying)。具有不同相對分子質量(liang)的(de)DNA片(pian)段會(hui)以不(bu)同速(su)度移(yi)動(dong)，從(cong)而實現分離。DNA分子的遷移(yi)速(su)度與其(qi)相對分子質量(liang)的(de)對數成(cheng)反(fan)比關(guan)系。利用(yong)瓊(qiong)脂(zhi)糖凝(ning)膠(jiao)電泳，我們(men)不(bu)僅可以分離不同相對分子質量(liang)的(de)DNA，還(hai)可(ke)以(yi)分離具有相同相對分子質量(liang)但(dan)不(bu)同構(gou)型(xing)的DNA。

實驗步驟

1. 制(zhi)備(bei)瓊脂(zhi)糖凝(ning)膠(jiao)：將瓊(qiong)脂(zhi)糖溶解在TAE緩(huan)沖(chong)液(ye)中，酸(suan)堿平衡後(hou)，制(zhi)備(bei)1%的瓊脂(zhi)糖凝(ning)膠(jiao)液(ye)。

2. 準備膠(jiao)板：清洗(xi)幹(gan)凈(jing)的有(you)機玻璃(li)槽(cao)置於(yu)水(shui)平位置(zhi)，並(bing)放置(zhi)樣品(pin)梳(shu)子。

3. 將制(zhi)備(bei)好的瓊脂(zhi)糖凝(ning)膠(jiao)液(ye)倒入有(you)機玻璃(li)槽(cao)，形成(cheng)均勻(yun)的(de)膠(jiao)面，並等(deng)待(dai)凝(ning)固。

4. 加樣：將待(dai)檢測(ce)的DNA樣(yang)品(pin)與上樣(yang)緩(huan)沖(chong)液(ye)混合後(hou)，加入樣(yang)品(pin)孔(kong)中(zhong)。同時(shi)加入DNA標記(ji)物作(zuo)為對照。

5. 進(jin)行(xing)電(dian)泳：連接電(dian)泳(yong)槽(cao)和(he)電源(yuan)，註意極(ji)性（DNA片(pian)段由負極(ji)向正(zheng)極(ji)遷移(yi)）。控制(zhi)電(dian)壓和(he)電泳(yong)時(shi)間(jian)，確保電泳(yong)過程充分分離DNA片(pian)段。

6. 染色：將電(dian)泳後(hou)的凝(ning)膠(jiao)浸入溴(xiu)化乙錠(ding)溶(rong)液(ye)中進(jin)行(xing)染色，使DNA片(pian)段可(ke)見。

7. 觀察(cha)和(he)記錄(lu)：在紫外(wai)光下(xia)觀察(cha)凝(ning)膠(jiao)中的DNA條(tiao)帶(dai)，拍(pai)照記(ji)錄(lu)結(jie)果。

8. 處理凝(ning)膠(jiao)：對於(yu)含(han)有溴(xiu)化乙(yi)錠(ding)的(de)凝(ning)膠(jiao)，需(xu)采取(qu)專(zhuan)門方法(fa)處(chu)理，以避(bi)免對環境(jing)造成(cheng)汙染。

應(ying)用領(ling)域

瓊(qiong)脂(zhi)糖凝(ning)膠(jiao)電泳技(ji)術(shu)在生(sheng)物學研(yan)究中有著廣(guang)泛(fan)的(de)應(ying)用。以(yi)下(xia)是(shi)壹些常(chang)見的應(ying)用領(ling)域：

1. DNA分子量(liang)測(ce)定：通(tong)過與已知分子量(liang)的(de)DNA標記(ji)物進(jin)行(xing)對比，可(ke)以推斷(duan)待(dai)測(ce)樣品(pin)中(zhong)DNA片(pian)段的(de)相對分子質量(liang)。

2. DNA分離與純化(hua)：利用(yong)瓊(qiong)脂(zhi)糖凝(ning)膠(jiao)電泳技(ji)術(shu)，可以將DNA片(pian)段按(an)大小分離，並從(cong)凝(ning)膠(jiao)中提取(qu)純(chun)化。

3. 檢測(ce)基因(yin)突變(bian)：通(tong)過與正(zheng)常(chang)基(ji)因(yin)進(jin)行(xing)對比，瓊(qiong)脂(zhi)糖凝(ning)膠(jiao)電泳技(ji)術(shu)可以檢(jian)測(ce)到(dao)某(mou)些基(ji)因(yin)突變(bian)，為遺傳學(xue)研(yan)究提供(gong)依據。

4. 核(he)酸(suan)*交：將特定標記(ji)的探(tan)針(zhen)與瓊脂(zhi)糖凝(ning)膠(jiao)中的DNA進(jin)行(xing)*交(jiao)，可以檢測(ce)特定基(ji)因(yin)在DNA中的(de)存在與表達(da)。

5. DNA指紋(wen)圖(tu)譜：通(tong)過瓊脂(zhi)糖凝(ning)膠(jiao)電泳，可(ke)以(yi)生(sheng)成(cheng)DNA條(tiao)帶(dai)圖譜，用(yong)於(yu)個(ge)體(ti)識(shi)別(bie)、法(fa)醫學(xue)鑒定和(he)生(sheng)物學親(qin)緣關系研究。

瓊脂(zhi)糖凝(ning)膠(jiao)電泳技(ji)術(shu)是(shi)壹種(zhong)重要的分子生(sheng)物學實驗方(fang)法(fa)，廣(guang)泛(fan)應(ying)用於(yu)DNA的(de)檢測(ce)、分離與研究。通(tong)過本(ben)文的(de)介紹(shao)，我們(men)對瓊脂(zhi)糖凝(ning)膠(jiao)電泳技(ji)術(shu)有了更深入的(de)了解。在今後(hou)的科(ke)學研(yan)究和(he)實驗中(zhong)，瓊(qiong)脂(zhi)糖凝(ning)膠(jiao)電泳將繼(ji)續發揮(hui)重要的作(zuo)用，助(zhu)力我們(men)解開(kai)DNA之謎。

蘇州阿(e)爾(er)法生(sheng)物提供(gong)的實驗室(shi)儀(yi)器類產(chan)品(pin)主(zhu)要有以(yi)下(xia)幾類：

1. 實驗室(shi)培(pei)養箱(xiang)類，如(ru)CO2培養箱(xiang)、CO2振蕩搖(yao)床(chuang)、全溫振蕩培(pei)養箱(xiang)、恒溫恒濕培養箱(xiang)、生(sheng)化培養箱(xiang)、黴(mei)菌培(pei)養箱(xiang)、BOD培養箱(xiang)、低溫培養箱(xiang)等主(zhu)要品(pin)牌(pai)為賽默(mo)飛(fei)、知楚(chu)、楚(chu)怡。

2. 移(yi)液(ye)槍類(lei)：這個類(lei)目的主(zhu)要以梅(mei)特勒(le)rainin為主(zhu)，比如(ru)：單(dan)道(dao)移(yi)液(ye)器、多道移(yi)液(ye)器、手動移(yi)液(ye)器、電(dian)動(dong)移(yi)液(ye)器、電(dian)動(dong)助(zhu)吸器、6道(dao)移(yi)液(ye)器、8道(dao)排(pai)槍(qiang)移(yi)液(ye)器、12道(dao)排(pai)槍(qiang)還有與之配套的移(yi)液(ye)吸頭(tou)。

3. 發酵罐、生(sheng)物反(fan)應(ying)器：這個主(zhu)要以楚(chu)怡為主(zhu)。比如(ru)壹次(ci)性生(sheng)物反(fan)應(ying)器、2聯(lian)發酵罐、四(si)聯(lian)細胞生(sheng)物反(fan)應(ying)器、微載體(ti)生(sheng)物反(fan)應(ying)器等(deng)另(ling)外(wai)接受(shou)不(bu)同規格的定制(zhi)。這款(kuan)還(hai)是(shi)挺全(quan)的(de)。

4. PCR儀(yi)：他(ta)們家(jia)的PCR儀主(zhu)要是(shi)朗基、BMG、和(he)奧盛(sheng)三(san)種(zhong)。朗(lang)基的實驗室(shi)裏(li)用的挺多的。

5. 實驗室(shi)離(li)心機類(lei)：他(ta)們的(de)實驗室(shi)離(li)心機主(zhu)要包(bao)括：高速(su)離心(xin)機(ji)、臺(tai)式(shi)離心(xin)機、迷(mi)妳離心(xin)機(ji)、研磨機、組織研磨儀、低溫高速(su)離心(xin)機。雖(sui)然(ran)是(shi)國產品(pin)牌(pai)，但(dan)是(shi)性價比(bi)還(hai)是(shi)挺不(bu)錯的，值得推薦(jian)。

6. 粉碎(sui)研(yan)磨儀類：他(ta)們的(de)研磨儀主(zhu)要儀實驗室(shi)研(yan)磨、實驗室(shi)粉(fen)碎機為主(zhu)，如(ru)：行星(xing)式(shi)球磨機、球磨儀、組織研磨儀、旋風(feng)研(yan)磨儀、刀(dao)式(shi)研磨儀、顎(e)式(shi)破碎機(ji)等(deng)幾十種(zhong)粉(fen)碎研磨設備，有(you)的研(yan)磨機出(chu)料尺(chi)寸(cun)甚至(zhi)達(da)到(dao)納米(mi)級。總(zong)之，這個品(pin)牌(pai)是(shi)國產中的姣(jiao)姣(jiao)者，性價比(bi)也還(hai)是(shi)挺不(bu)錯的，值得推薦(jian)。

7. 乳酸(suan)分析儀：這個是(shi)德國EKF旗下(xia)的進(jin)口(kou)品(pin)牌(pai)，國外(wai)市(shi)場(chang)挺火(huo)，用(yong)的(de)也較(jiao)多，尤其(qi)是(shi)測(ce)量(liang)中(zhong)試(shi)發酵罐中(zhong)的(de)細胞乳酸(suan)水平，挺方(fang)便(bian)。

8. 分子生(sheng)物學設(she)備(bei)：這塊主(zhu)要是(shi)天能電泳槽(cao)、電泳儀、凝(ning)膠(jiao)成(cheng)像(xiang)儀、化(hua)學發光(guang)成(cheng)像(xiang)儀、小動物活體(ti)成(cheng)像(xiang)系統等(deng)。

9. 其(qi)他(ta)儀器(qi)：還有很多，比如(ru)：樂(le)楓的(de)純(chun)水(shui)機、奧(ao)盛(sheng)小離心機、伯能(neng)滅菌器(qi)、實驗室(shi)洗(xi)瓶(ping)機(ji)、生(sheng)物安(an)全櫃、超凈(jing)臺、恒溫水浴(yu)鍋、旋渦混(hun)勻(yun)儀(yi)、分析天平、低溫冰箱(xiang)等。還(hai)有就不壹(yi)壹(yi)列(lie)舉了，自(zi)己進(jin)他(ta)們看(kan)吧，此(ci)外(wai)，我們(men)還(hai)提供(gong)移(yi)液(ye)器、生(sheng)物反(fan)應(ying)器、發酵罐、液(ye)氮罐、超純水機(ji)、天平、高速(su)離(li)心機、臺(tai)式(shi)離心(xin)機、迷(mi)妳離心(xin)機(ji)、研磨機、組織研磨儀、低溫高速(su)離心(xin)機潔(jie)凈(jing)工作(zuo)臺等實驗室(shi)設(she)備。

實驗室(shi)耗(hao)材(cai)類的主(zhu)要是(shi)NEST吸頭、rainin移(yi)液(ye)吸頭(tou)、濾(lv)芯吸(xi)頭(tou)、PCR管、8連(lian)排管、離心管(guan)、培養瓶(ping)、細胞培(pei)養板、試(shi)劑瓶(ping)、細胞小室、細胞工(gong)廠、細胞網篩(shai)等(deng)上百(bai)種(zhong)實驗耗(hao)材(cai)，基本(ben)齊全(quan)。

實驗試(shi)劑主(zhu)要有：

1.細胞類(lei)產品(pin)：

各(ge)種(zhong)的(de)腫(zhong)瘤細胞、基(ji)因(yin)編輯(ji)細胞：比(bi)如(ru)常見(jian)的HEK293細胞、CHO細胞、骨(gu)髓幹(gan)細胞、胚胎2.天(tian)根(gen)試(shi)劑盒產(chan)品(pin)：天(tian)根(gen)系列(lie)試(shi)劑盒主(zhu)要有質(zhi)粒大提、質粒小提等各種(zhong)質(zhi)粒抽提試(shi)劑盒、血液(ye)DNA提取(qu)試(shi)劑盒、細菌DNA提(ti)取(qu)試(shi)劑盒、病(bing)毒RNA提(ti)取試(shi)劑盒、植(zhi)物(wu)組織DNA提取(qu)試(shi)劑盒等(deng)各種(zhong)基(ji)因(yin)組提(ti)取(qu)試(shi)劑盒。還(hai)有DH5&/TOP-10感(gan)受(shou)態(tai)等。

3. 其(qi)他(ta)試(shi)劑類：細胞培(pei)養試(shi)劑、分子生(sheng)物學試(shi)劑、緩(huan)沖(chong)液(ye)、培養基、抗體(ti)、碧(bi)雲天試(shi)劑等。

       蘇(su)州阿(e)爾(er)法實驗器(qi)材(cai)有限(xian)公(gong)司主(zhu)要 致力於(yu)生(sheng)物實驗室(shi)儀(yi)器設備(bei)，實驗耗(hao)材(cai) ，實驗試(shi)劑的供(gong)應(ying)服(fu)務(wu) 14 年以上，累(lei)計(ji)服(fu)務(wu) 1000 +客(ke)戶。 在行業(ye)內(nei)均有不(bu)錯的口碑。更(geng)多瓊脂(zhi)糖凝(ning)膠(jiao)電泳相關(guan)設(she)備、電(dian)泳儀、電泳槽(cao)、凝(ning)膠(jiao)成(cheng)像(xiang)等，可(ke)以進(jin)入蘇(su)州阿(e)爾(er)法生(sheng)物進(jin)行(xing)了解。