HEK293細胞的(de)特(te)點與應(ying)用(yong)

HEK293細胞的(de)特(te)點和應用(yong)

人胚(pei)腎 293 (HEK 293) 細(xi)胞(bao)是(shi)生物技術和研(yan)究(jiu)中常(chang)用的(de)細(xi)胞(bao)系(xi)之壹(yi)。由(you)於 HEK 293 細(xi)胞(bao)具(ju)有(you)較高(gao)的(de)生長(chang)效(xiao)率，通(tong)常生成用(yong)於生物醫學(xue)和藥物研(yan)究(jiu)的(de)外(wai)源性蛋白質。HEK 293細胞 也(ye)會被(bei)用於各(ge)種(zhong)轉染實驗(yan)中。
HEK 293 細(xi)胞起源和背景
人胚(pei)腎293細(xi)胞(bao)
    Alex Van der Eb 在(zai) 1970 年(nian)代時(shi)培養出(chu)了(le) HEK 293 細(xi)胞(bao)系(xi)。為(wei)了(le)產(chan)生永(yong)生化細(xi)胞系(xi)，Graham 將 5 型腺病(bing)毒的(de) DNA 轉染到 HEK 細胞的(de)人(ren)類(lei) 19 號(hao)染色(se)體(ti)中。Ad5 整(zheng)合到細胞基因(yin)組中導(dao)致(zhi)細(xi)胞(bao)雕亡的(de)預防，從(cong)而導(dao)致(zhi)細(xi)胞(bao)系(xi)的(de)連(lian)續(xu)產生。在(zai)獲得成功(gong)之前，Frank Graham 進行(xing)了 293 次實驗(yan)，因(yin)此(ci)得名 HEK 293。
HEK 293細胞(bao)特(te)點
HEK 293 細胞(bao)的(de)直(zhi)徑(jing)通(tong)常在(zai) 11-15µm 左(zuo)右，壹般(ban)情況下(xia)，單(dan)層貼壁培養的(de)HEK293細(xi)胞(bao)形(xing)態(tai)扁平(ping)，直徑(jing)較大。HEK 293 細胞(bao)屬(shu)於亞(ya)3倍體(ti)人(ren)細胞系(xi)。它們攜帶(dai) 64 條(tiao)染色(se)體(ti)、三個(ge) X 染(ran)色體(ti)拷貝(bei)以及(ji) 4 kbp Ad5 摻(chan)入(ru) HEK 293 基(ji)因(yin)組的(de) 19 號(hao)染(ran)色(se)體(ti)，表(biao)明細胞遺(yi)傳(chuan)學不(bu)穩定。
HEK 293細(xi)胞(bao)培養環(huan)境要(yao)求(qiu)
HEK 293 細(xi)胞屬(shu)於穩(wen)定(ding)細(xi)胞(bao)系(xi)，細胞(bao)培養要求(qiu)也(ye)相(xiang)對(dui)較低。這(zhe)些(xie)細(xi)胞生長(chang)迅速(su)，壹(yi)般(ban)倍增(zeng)時(shi)間概在(zai)34~36H。HEK 293 細(xi)胞(bao)既(ji)可(ke)以貼壁培養也(ye)可以懸浮培養，但(dan)多(duo)數(shu)情況下(xia)，這(zhe)類細(xi)胞采(cai)用貼(tie)壁的(de)方(fang)式(shi)進(jin)行(xing)單層培養。
    為(wei)了(le)保(bao)持 HEK 293 細(xi)胞(bao)存活，通(tong)常實驗(yan)高(gao)葡萄(tao)糖細(xi)胞(bao)培養基。正(zheng)常(chang)情況下(xia)，應在(zai)大約(yue) 2-3 天內更換(huan)。HEK 293 細(xi)胞需要(yao)設(she)置在(zai) 37°C 的(de)加濕培養箱(xiang)才能(neng)生長(chang)。培養箱(xiang)還應補(bu)充 5% 的(de) CO2。
     在(zai)儲(chu)存 HEK 293 細胞(bao)時(shi)，它們必(bi)須(xu)處(chu)於液(ye)氮(dan)氣相(xiang)。避(bi)免(mian)將細(xi)胞(bao)儲(chu)存在(zai) -80°C，因(yin)為(wei)從(cong)長(chang)遠(yuan)來看(kan)它(ta)們會失(shi)去活(huo)力(li)。冷凍(dong)細胞(bao)時(shi)，必須(xu)緩(huan)慢(man)進行(xing)。冷凍(dong)培養基必(bi)須(xu)包括完整(zheng)的(de)生長(chang)培養基。請(qing)記住(zhu)用 5% 的(de)冷凍(dong)保護劑（如二甲(jia)基(ji)亞(ya)碸(feng)）補(bu)充生長(chang)培養基。可(ke)以使(shi)用(yong)異(yi)丙(bing)醇儲(chu)存箱(xiang)以確保(bao) HEK 293 細胞(bao)在(zai)將(jiang)細(xi)胞移(yi)入(ru)液(ye)氮(dan)氣相(xiang)之(zhi)前以每(mei)分(fen)鐘 -1°C 的(de)速(su)度緩(huan)慢(man)冷凍(dong)。
    解凍(dong) HEK 293 細胞(bao)時(shi)，必須(xu)快速(su)完成——在(zai) 37°C 水(shui)浴中輕(qing)輕攪(jiao)動(dong)兩分(fen)鐘。細(xi)胞解凍(dong)後(hou)，必(bi)須將它們添(tian)加到預熱的(de)培養基中。以低速(su)離(li)心(xin)解凍(dong)的(de)細(xi)胞(bao)以分(fen)離(li)冷凍(dong)培養基並(bing)重(zhong)新懸(xuan)浮在(zai)生長(chang)培養基中。由(you)於細(xi)胞(bao)中存在(zai)腺病(bing)毒，HEK 293 的(de)生物安全等級為(wei) BSL-2。

使(shi)用(yong) HEK 293細(xi)胞(bao)的(de)優(you)勢和局限性
使(shi)用(yong) HEK 293 細(xi)胞(bao)，就(jiu)像任(ren)何(he)其(qi)他細(xi)胞系(xi)壹樣(yang)，各(ge)有(you)利(li)弊。下(xia)面(mian)列(lie)出(chu)了(le)這(zhe)些(xie)單(dan)元格的(de)優(you)點和局限性：
HEK 293 細胞(bao)優(you)勢
1.具(ju)有(you)壹致(zhi)的(de)結(jie)果和細胞(bao)具有(you)高(gao)度可(ke)重(zhong)復性 
2.可以高(gao)效(xiao)地(di)大量(liang)生產(chan)重(zhong)組蛋白，使(shi)其(qi)成為(wei)新藥(yao)開(kai)發的(de)主(zhu)流貢獻者(zhe)。
3.可(ke)用(yong)於穩(wen)定(ding)和瞬時(shi)基因(yin)表(biao)達
4.HEK 293 細(xi)胞對(dui)轉染有(you)明顯的(de)反(fan)應(ying)，並(bing)且可(ke)以在(zai)轉染中使(shi)用(yong)不(bu)同(tong)的(de)化學(xue)和物理方(fang)法(fa)。
HEK 293 細(xi)胞(bao)的(de)局(ju)限性
1.容易被(bei)細菌、支原(yuan)體(ti)汙染,可以使(shi)用(yong)支(zhi)原(yuan)體(ti)清(qing)除試劑盒進(jin)行(xing)消滅。
2.易受(shou)病(bing)毒汙染
3.培養時(shi)間延(yan)長(chang)會導(dao)致(zhi)細(xi)胞(bao)健康(kang)狀(zhuang)況(kuang)下(xia)降(jiang)

HEK 293 細胞(bao)應(ying)用(yong)
HEK 293 細胞用(yong)於廣(guang)泛(fan)的(de)研(yan)究(jiu)應(ying)用(yong)。以下是使(shi)用(yong) HEK 293 細(xi)胞(bao)系(xi)的(de)壹(yi)些(xie)研(yan)究(jiu)領(ling)域(yu)：
1.受(shou)體(ti)信(xin)號
HEK 293 細(xi)胞常(chang)用於離(li)子(zi)通(tong)道(dao)和細胞(bao)膜受(shou)體(ti)的(de)異(yi)源表(biao)達。許多(duo)研(yan)究(jiu)人(ren)員使(shi)用(yong)這(zhe)些(xie)細(xi)胞來研(yan)究(jiu)通(tong)常與(yu)疾病(bing)有(you)關(guan)的(de) G 蛋(dan)白偶(ou)聯(lian)受(shou)體(ti)信(xin)號通(tong)路。這(zhe)些(xie)細(xi)胞還用於表(biao)征(zheng)各(ge)種(zhong)生物體(ti)中的(de)嗅(xiu)覺(jiao)受(shou)體(ti)。
2.蛋(dan)白質生產(chan)
如前所述(shu)，HEK 293 細(xi)胞(bao)在(zai)大量(liang)產(chan)生重(zhong)組蛋白方面(mian)異常(chang)高(gao)效(xiao)。為(wei)此(ci)，科(ke)學(xue)家們壹(yi)直(zhi)在(zai)廣(guang)泛(fan)使(shi)用(yong)該(gai)細(xi)胞(bao)系(xi)功能(neng)性蛋白質。
3.癌癥(zheng)研(yan)究(jiu)
HEK 293 細(xi)胞(bao)具(ju)有(you)致(zhi)瘤(liu)性，常用(yong)於癌癥(zheng)研(yan)究(jiu)。在(zai)壹(yi)項(xiang)研(yan)究(jiu)中，HEK 293 細(xi)胞被(bei)用來解釋(shi)二甲(jia)雙(shuang)胍(gua)在(zai)癌癥(zheng)中的(de)作(zuo)用(yong)。研(yan)究(jiu)證實，二甲(jia)雙(shuang)胍(gua)有(you)助(zhu)於阻礙細胞遷(qian)移(yi)和抑制趨(qu)化因(yin)子(zi)白介素(su) 8 的(de)表(biao)達。
HEK 293 細(xi)胞也(ye)經(jing)常在(zai)涉(she)及(ji)測試對(dui)癌癥(zheng)特(te)異性細胞(bao)分(fen)析效(xiao)果的(de)研(yan)究(jiu)中用(yong)作(zuo)對(dui)照。近(jin)期(qi)，這些(xie)細(xi)胞被(bei)用於研(yan)究(jiu)百(bai)裏(li)醌(kun)對(dui)乳(ru)腺癌影響(xiang)的(de)研(yan)究(jiu)中。
HEK 293 細(xi)胞開(kai)發(fa)
 HEK 293T 是 HEK 293 細(xi)胞(bao)系(xi)的(de)壹(yi)種(zhong)變體(ti)，這(zhe)種(zhong)細(xi)胞(bao)衍(yan)生物攜帶(dai) SV40 大 T 抗原(yuan)，使(shi)這(zhe)些(xie)細(xi)胞能(neng)夠在(zai)含有(you) SV40 啟動子(zi)的(de)質(zhi)粒載體(ti)中產(chan)生重(zhong)組蛋白。話雖如此(ci)，HEK 293T 廣(guang)泛(fan)用於病(bing)毒顆粒生產(chan)。HEK 293 細胞(bao)系(xi)具有(you)其(qi)特性，因(yin)此(ci)在(zai)生物技術和研(yan)究(jiu)中得到廣泛應用也(ye)就不足(zu)為(wei)奇(qi)了(le)。
      阿(e)爾(er)法(fa)生物提供(gong)CHO細(xi)胞、HEK細(xi)胞(bao)、Vero細胞(bao)、小(xiao)鼠(shu)胚(pei)胎成纖細胞(bao)、倉(cang)鼠(shu)腎成纖細胞(bao)、人(ren)肝癌細(xi)胞(bao)、非洲(zhou)綠(lv)猴腎(shen)細胞、等百余種(zhong)細(xi)胞(bao)系(xi)以及(ji)培養基、國(guo)產(chan)胎牛(niu)血(xue)清(qing)、支原(yuan)體(ti)清(qing)除劑、細胞培養瓶、康(kang)寧(ning)細胞(bao)搖(yao)瓶等細胞(bao)培養試劑和耗材，同(tong)時(shi)提供(gong)細(xi)胞培養生物反應(ying)器(qi)、CO2振蕩(dang)培養箱(xiang)、PCR儀、離(li)心(xin)機(ji)、分(fen)光(guang)光(guang)度計(ji)、細(xi)胞分(fen)析儀(yi)、細胞計(ji)數(shu)儀等各(ge)種(zhong)實驗(yan)室儀器(qi)和實驗(yan)設(she)備(bei)，更多(duo)需求(qiu)可進(jin)入(ru)蘇(su)州(zhou)阿爾(er)法(fa)生物實驗(yan)器(qi)材有(you)限公司(si)網站進行(xing)了解(jie)。