使(shi)用實驗(yan)室(shi)儀器進(jin)行小鼠(shu)抗(kang)體生產(chan)技(ji)術(shu)

小鼠(shu)抗(kang)體是科研實(shi)驗(yan)中(zhong)常(chang)用的(de)壹(yi)種(zhong)抗(kang)體，它主(zhu)要有(you)IgA、IgD、IgE、IgG 和(he) IgM五(wu)種(zhong)類(lei)型(xing)，下面小編就小鼠(shu)抗(kang)體分類(lei)及使用實驗(yan)室(shi)儀器進(jin)行小鼠(shu)抗(kang)體生產(chan)技(ji)術(shu)做(zuo)壹(yi)下簡(jian)單介(jie)紹：

小鼠(shu)抗(kang)體同種(zhong)型(xing)/類(lei)、亞類(lei)和(he)小鼠(shu)抗(kang)體同種(zhong)型(xing)

與人類(lei)相(xiang)同，小鼠(shu)有(you)五(wu)種(zhong)抗(kang)體同種(zhong)型(xing)（IgA、IgD、IgE、IgG 和(he) IgM）。每(mei)個同種(zhong)型(xing)都(dou)有(you)不(bu)同的(de)重(zhong)鏈。同種(zhong)型(xing)也(ye)稱(cheng)為類(lei)。抗(kang)體的(de)另(ling)壹(yi)個名稱(cheng)是(shi)免疫球蛋白(bai)，因(yin)此(ci)後綴“Ig"表示抗(kang)體類(lei)別(bie)和(he)亞類(lei)。幼(you)稚(zhi) B 細(xi)胞(bao)產(chan)生 IgM 和(he) IgD。在(zai) B 細(xi)胞(bao)成熟(shu)過程(cheng)中(zhong)，通過(guo)同種(zhong)型(xing)轉換(huan)，成熟(shu)的(de) B 細(xi)胞(bao)將產(chan)生 IgG、IgA 或 IgE 同種(zhong)型(xing)和(he)亞類(lei)中(zhong)的(de)壹(yi)種(zhong)。不同的(de)同種(zhong)型(xing)在(zai)體內具有(you)不(bu)同的(de)半(ban)衰期(qi)，從 12 小時到 8 天(tian)不等(deng) 。

小鼠(shu)同種(zhong)型(xing)基(ji)因

每(mei)條重鏈(lian)由可(ke)變區(qu)和(he)恒定區組成。恒定區為不同的(de)基(ji)因，盡(jin)管(guan)它們(men)僅構(gou)成免疫(yi)球蛋白(bai)重(zhong)鏈(lian)的(de)壹(yi)部(bu)分。
對(dui)於 IgG2a 和(he) IgG2c 同種(zhong)型(xing)：具(ju)有(you) Igh1-b 等(deng)位(wei)基(ji)因的(de)近(jin)交(jiao)小鼠(shu)品(pin)系(xi)具(ju)有(you) IgG2c 同種(zhong)型(xing)，而(er)不(bu)是 IgG2a 。除其(qi)他同種(zhong)型(xing)外(wai)，鼠(shu)類(lei)重鏈基(ji)因座(zuo)僅具(ju)有(you)這兩(liang)種(zhong)同種(zhong)型(xing)基(ji)因中(zhong)的(de)壹(yi)種(zhong)。小鼠(shu) IgG2a 支(zhi)架有(you)時用於重(zhong)組抗(kang)體表達。
表 1 列出(chu)了(le)小鼠(shu)抗(kang)體類(lei)別(bie)、子類(lei)、基(ji)因名稱(cheng)以及 NCBI 和(he) IMGT 基(ji)因數(shu)據庫(ku)的(de)鏈(lian)接。

表 2 列出(chu)了(le)實驗(yan)室(shi)中(zhong)壹(yi)些(xie)常(chang)用動(dong)物物種(zhong)的(de)不(bu)同同種(zhong)型(xing)和(he)亞類(lei)基(ji)因組(zu)。IgG2a 在(zai)某(mou)些(xie)小鼠(shu)品(pin)系(xi)中(zhong)不(bu)存在(zai)，例(li)如(ru) C57BL、SJL 和(he) NOD 小鼠(shu)，它(ta)們(men)具(ju)有(you) IgG2c。

小鼠(shu)抗(kang)體分子量(liang)
IgA、IgD 和(he) IgG 的(de)重(zhong)鏈具有(you)壹(yi)個(ge)具(ju)有(you)三(san)個(ge)免(mian)疫(yi)球蛋白(bai) (Ig) 結(jie)構(gou)域的(de)恒定區。例如(ru)小鼠(shu)IgA重(zhong)鏈(lian)恒定區有(you)344個(ge)氨基(ji)酸(suan)，小鼠(shu)IgG1恒定區有(you)324個(ge)氨基(ji)酸(suan)。其(qi)他類(lei)型(xing)的(de)重(zhong)鏈可(ke)能(neng)具有(you)不(bu)同數(shu)量的(de)免(mian)疫球蛋白(bai)結(jie)構(gou)域。例如(ru)，分泌(mi)型(xing)和(he)膜結合型(xing) IgD 重(zhong)鏈(lian)恒定區有(you)兩(liang)個(ge) Ig 結構(gou)域。IgE 和(he) IgM 的(de)重(zhong)鏈有(you)壹(yi)個(ge)帶有(you)四(si)個(ge)免(mian)疫(yi)球蛋白(bai)結(jie)構(gou)域的(de)恒定區。小鼠(shu) IgM 重(zhong)鏈(lian)恒定區有(you) 475 個(ge)氨基(ji)酸(suan)。來自(zi)所(suo)有(you)同種(zhong)型(xing)的(de)重(zhong)鏈都有(you)壹(yi)個(ge)帶有(you)單(dan)個(ge)免(mian)疫(yi)球蛋白(bai)結(jie)構(gou)域的(de)可(ke)變區(qu)。
      每(mei)個免疫球蛋白(bai)結(jie)構(gou)域長約 110 個(ge)氨基(ji)酸(suan)。每(mei)條IgD和(he)IgG重鏈約450個(ge)氨基(ji)酸(suan)，每(mei)條IgE和(he)IgM重鏈約550個(ge)氨基(ji)酸(suan)。每(mei)條輕(qing)鏈(lian)（kappa 或(huo) lambda）都(dou)有(you)壹(yi)個(ge)恒定的(de)免(mian)疫球蛋白(bai)結(jie)構(gou)域和(he)壹個可(ke)變的(de)免(mian)疫球蛋白(bai)結(jie)構(gou)域，大約有(you) 211 到(dao) 217 個(ge)氨基(ji)酸(suan)。常(chang)見的(de) IgG 同種(zhong)型(xing)的(de)分子量(liang)為 150 KD。在(zai)還原條件下，每(mei)條重鏈(lian)約為50 KD，每(mei)條輕(qing)鏈(lian)約為25 KD。IgM 往(wang)往(wang)以五(wu)聚(ju)體或六聚(ju)體形(xing)式(shi)存在(zai)，其(qi)中(zhong) IgM 分子通過(guo)二硫鍵(jian)共價連(lian)接(jie)，從(cong)而(er)產(chan)生 970 KD 的(de)分子量(liang)。由於(yu)免(mian)疫球蛋白(bai)是(shi)糖基(ji)化的(de)，因(yin)此表觀分子量(liang)可(ke)能(neng)與標稱(cheng)分子量(liang)不同，有(you)時甚至(zhi)區別(bie)較(jiao)大。
小鼠(shu)抗(kang)體生產(chan)
    小鼠(shu)是(shi)單(dan)克隆抗(kang)體產(chan)生的(de)主(zhu)要動(dong)物宿(xiu)主(zhu)，也(ye)是(shi)多克隆抗(kang)體產(chan)生的(de)宿(xiu)主(zhu)。小鼠(shu)單(dan)克隆抗(kang)體生產(chan)也(ye)會(hui)涉(she)及到實(shi)驗(yan)室(shi)儀器、實(shi)驗(yan)耗(hao)材及壹些(xie)科研試劑。比(bi)如：用外源(yuan)抗(kang)原(yuan)以及常(chang)用的(de)弗(fu)氏(shi)佐劑或(huo)新型(xing)水(shui)溶性(xing) QuickAntibody對(dui)小鼠(shu)（通常(chang)是BALB/c小鼠(shu)， 進(jin)行(xing)免(mian)疫(yi)。小鼠(shu)單(dan)克隆抗(kang)體也(ye)可(ke)以通過(guo)將(jiang)來自(zi)特定小鼠(shu)品(pin)系(xi)的(de)未(wei)免疫脾(pi)細(xi)胞(bao)與自身抗(kang)體融合直(zhi)接(jie)獲得，如(ru)抗(kang) SM Y12 抗(kang)體的(de)情(qing)況。其(qi)他菌(jun)株(zhu)，如 C57BL/6 、NMRI、C3H 和(he) SJL，以及其(qi)他佐(zuo)劑如(ru)殼聚(ju)糖、LQ 或(huo)弗(fu)氏(shi)佐劑，以及過表達免疫(yi)原(yuan)的(de)埃(ai)文(wen)細(xi)胞(bao)，也(ye)可(ke)以使(shi)用。基(ji)因工(gong)程(cheng)小鼠(shu)品(pin)系(xi)也(ye)可(ke)以作(zuo)為宿(xiu)主(zhu)開(kai)發特異性(xing)抗(kang)體，例如通過(guo)β3Gn-T5基(ji)因敲(qiao)除小鼠(shu)開(kai)發了(le)壹種(zhong)對(dui)GM3神經節(jie)苷(gan)脂(zhi)具有(you)高(gao)結(jie)合(he)特異性(xing)的(de)IgG單(dan)克隆抗(kang)體。
      截(jie)至(zhi)2026年(nian)01月(yue)02日，科(ke)研數(shu)據庫(ku)列出(chu)了(le)針對(dui)12039個人(ren)類(lei)基(ji)因、7144個(ge)小鼠(shu)基(ji)因、6475個(ge)大鼠(shu)基(ji)因以及來自(zi)其(qi)他156個(ge)物種(zhong)的(de)11079個(ge)基(ji)因的(de)254742個(ge)小鼠(shu)單(dan)克隆抗(kang)體。
    大多數(shu)單克隆抗(kang)體是在(zai)小鼠(shu)體內產(chan)生的(de)。通常(chang)使用抗(kang)小鼠(shu)二抗(kang)。 二抗(kang)多數(shu)為山羊(yang)抗(kang)小鼠(shu)。
蘇州(zhou)阿(e)爾法(fa)生物實驗(yan)器(qi)材(cai)有(you)限(xian)公(gong)司提(ti)供的(de)實(shi)驗(yan)室(shi)儀器，實(shi)驗(yan)耗(hao)材，生化試劑等(deng)廣泛用於抗(kang)體紙杯(bei)、抗(kang)體生產(chan)等工(gong)藝。