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常(chang)見生物樣(yang)本的(de)存儲和(he)運(yun)輸(shu)條件匯總(zong)
更(geng)新(xin)時(shi)間(jian):2023-02-08
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生物(wu)樣(yang)本是(shi)醫(yi)學研(yan)究(jiu)的重(zhong)要資源(yuan),其質(zhi)量(liang)在(zai)很大程(cheng)度上(shang)決定著(zhe)臨(lin)床結(jie)果(guo)的準(zhun)確(que)性和(he)可(ke)靠(kao)性。目前生(sheng)物樣(yang)本及(ji)其(qi)提取(qu)產物(wu)主要(yao)有(you)深低溫和(he)常(chang)溫(wen)兩大類保存方式(shi),針(zhen)對(dui)不(bu)同科(ke)研(yan)的(de)需求,更(geng)多的(de)樣(yang)本保(bao)存方式(shi)也(ye)相繼(ji)問(wen)世,本文將對(dui)常(chang)用的樣(yang)本保(bao)存方式(shi)及運(yun)輸(shu)條(tiao)件進(jin)行小結(jie),可以收藏保存備用。
樣(yang)本儲存條件
1. -196℃、-150℃ 深低溫凍(dong)存
超低溫凍(dong)存是理(li)想(xiang)的樣(yang)本保(bao)存方法,目前液(ye)氮(-196℃)是靠(kao)譜(pu)的(de)樣(yang)本保(bao)存方法,然(ran)而由於(yu)樣(yang)本浸(jin)沒(mei)在(zai)液(ye)氮中,遊離(li)的(de)組(zu)織(zhi)碎片可能帶來交(jiao)叉(cha)汙染的潛(qian)在(zai)風險,因此催生了氣相液(ye)氮(-150℃)的保(bao)存方式(shi),就是將(jiang)樣(yang)本置於(yu)液氮以上、氣相液(ye)氮的包圍之中,可以很好地避(bi)免(mian)交叉(cha)汙染的風險。另外,也(ye)可以通(tong)過電力冰箱(xiang)制冷達(da)到(dao)-150℃的低溫效(xiao)果(guo),從而能滿足(zu)樣(yang)本的(de)長(chang)期保存需求。因為(wei)-137℃是水玻(bo)璃化(hua)溫度,低於(yu)此溫度時(shi)細(xi)胞內能導(dao)致內容物(wu)降(jiang)解(jie)的壹(yi)切生化(hua)反應(ying)均處於(yu)失(shi)活(huo)狀態,從而能達(da)到(dao)長期保存的要(yao)求。
2. -80℃
-80度低溫保(bao)存是凍(dong)存核(he)酸較(jiao)為(wei)理想(xiang)的樣(yang)本保(bao)存方法:在(zai)不(bu)具有液氮保存條件的生(sheng)物樣(yang)本庫(ku),也(ye)可以考慮使用-80℃深低溫冰(bing)箱(xiang)來保(bao)存組織(zhi)樣(yang)本。有(you)研(yan)究(jiu)表明,在(zai)-80℃條(tiao)件下,DNA產量(liang)、完(wan)整性以及RNA產(chan)量(liang)可以維持(chi)長(chang)達(da)7年(nian)不(bu)發生明顯(xian)改變,但是RNA完(wan)整性在(zai)凍(dong)存5年後(hou)開始下降。因此建議保存組織(zhi)時(shi)候(hou)進(jin)行分(fen)裝(zhuang),再加(jia)入RNA特(te)異(yi)性穩(wen)定劑後凍(dong)存於(yu)-80℃,更(geng)有利(li)於(yu)組織(zhi)內RNA的保(bao)存。
關於(yu)蛋白質(zhi)的(de)保存,目前也(ye)以深低溫凍(dong)存為(wei)主,可(ke)以很好地保護(hu)其穩(wen)定性。短期儲存也(ye)可以保存在(zai)-20°C的(de)低溫冰(bing)箱(xiang)中。
3. 常(chang)溫(wen)保存:鑒(jian)於(yu)深低溫凍(dong)存的運(yun)輸與(yu)操(cao)作(zuo)的(de)不(bu)便性,常(chang)溫(wen)保存的方(fang)法應運而生。常(chang)溫(wen)保存技(ji)術的原(yuan)理(li)可(ke)類比(bi)線蟲(chong)的(de)脫(tuo)水休(xiu)眠(mian)現(xian)象(xiang),利用某些特(te)殊(shu)技(ji)術或容(rong)器將(jiang)脫(tuo)水(shui)幹燥(zao)後(hou)的樣(yang)本置於(yu)密(mi)閉(bi)環(huan)境中,或(huo)者向生(sheng)物(wu)樣(yang)本中(zhong)添加(jia)保(bao)護劑,使相關(guan)酶(mei)失(shi)活(huo),從而達(da)到(dao)常(chang)溫(wen)環境下保護(hu)樣(yang)本的(de)目的(de)。
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