如(ru)何選(xuan)購(gou)合(he)適(shi)的PCR耗材(cai)

PCR耗材(cai)包(bao)括PCR管(guan)(EP管(guan)）、8連(lian)排(pai)管(guan)、96孔(kong)PCR板、深孔(kong)板等(deng)這些材(cai)質(zhi)壹(yi)般為聚(ju)丙烯PP材(cai)質(zhi)，具有(you)高品(pin)質(zhi)、高純(chun)度(du)、高透(tou)明(ming)的特點(dian)，壹(yi)般都(dou)在潔凈空(kong)間生產(chan)加工(gong)。

PCR耗材(cai)為(wei)什(shen)麽壹(yi)般都(dou)是(shi)PP材(cai)質(zhi)的呢(ne)，為什(shen)麽需要(yao)環(huan)境潔凈？

因為PCR/qPCR耗材(cai)通(tong)常(chang)會與試劑(ji)或樣(yang)品(pin)直(zhi)接(jie)接(jie)觸，而聚(ju)丙烯（PP）材(cai)質(zhi)是(shi)生物(wu)學惰性(xing)材(cai)料，表(biao)面不(bu)易於粘附生物(wu)分子(zi)，且(qie)有著良好的化(hua)學耐(nai)性，及溫(wen)度(du)耐(nai)受(shou)性（可(ke)以(yi)121℃ 高壓滅(mie)菌(jun)，也(ye)可(ke)以(yi)承(cheng)受(shou)熱循環(huan)過程(cheng)中的溫(wen)度(du)變化）。

這(zhe)裏強調(tiao)壹(yi)下耗材(cai)質(zhi)量（是(shi)否幹(gan)凈）的重(zhong)要性。PCR耗材(cai)必須保(bao)證(zheng)沒(mei)有汙染物(wu)和抑制(zhi)劑(ji)。高壓和輻射(she)能夠去(qu)除細菌(jun)和DNA酶(mei)，但不(bu)能(neng)去(qu)除灰塵和DNA殘留(liu)，它們(men)可(ke)能(neng)會(hui)抑(yi)制(zhi)PCR反(fan)應(ying)或(huo)產(chan)生(sheng)非(fei)特異性擴(kuo)增(zeng)。物(wu)質(zhi)是(shi)具有(you)吸光(guang)度的，即(ji)便(bian)是(shi)很小(xiao)的汙(wu)染物(wu)也會(hui)吸收反(fan)應(ying)體(ti)系(xi)中的熒(ying)光(guang)，影響(xiang)熒(ying)光(guang)信(xin)號的采(cai)集。因(yin)此，在生產(chan)這(zhe)些塑料耗材(cai)時，從制(zhi)模(mo)到最(zui)終的包(bao)裝(zhuang)都(dou)必須在具有(you)顆粒(li)數(shu)量(liang)限(xian)制(zhi)的設(she)施(shi)環(huan)境中進行。

高熱(re)傳(chuan)遞性(xing)

1）極(ji)薄(bo)的壁(bi)厚優(you)化(hua)熱傳(chuan)遞減(jian)少循環(huan)時間(jian)。

之(zhi)前(qian)買(mai)的PCR板/管(guan)材(cai)質(zhi)厚度(du)不(bu)壹(yi)，是(shi)不(bu)是(shi)厚點(dian)的穩定性更好呢？

不(bu)是(shi)的，管(guan)壁(bi)厚度(du)會(hui)直接(jie)影響(xiang)熱(re)傳(chuan)導(dao)率(lv)，極(ji)薄(bo)的壁(bi)厚可(ke)優(you)化(hua)熱(re)傳(chuan)遞減(jian)少循環(huan)時間(jian)。要想(xiang)提(ti)升(sheng)PCR反(fan)應(ying)效(xiao)率(lv)，保證(zheng)反(fan)應(ying)穩定高效(xiao)進(jin)行，需要(yao)選擇(ze)均(jun)壹(yi)、超(chao)壁薄(bo)的PCR耗材(cai)。

高反(fan)射(she)熒光(guang)信(xin)號

1）qPCR更推(tui)薦(jian)使用優質(zhi)的白色PCR耗材(cai)。

2）管(guan)蓋(gai)：高透(tou)光(guang)性，蓋(gai)子(zi)的光(guang)通過(guo)率(lv)直接(jie)關系(xi)著(zhe)儀器(qi)的信(xin)號采(cai)集，選(xuan)擇壹(yi)款透光(guang)性高的蓋(gai)子(zi)對(dui)熒光(guang)定量(liang)檢測(ce)極(ji)其重(zhong)要(yao)。

不(bu)同(tong)顏色的PCR管(guan)/板，該怎麽選呢(ne)？

對於(yu)普通的PCR反(fan)應(ying)選(xuan)用透明(ming)或者(zhe)彩(cai)色的PCR管(guan)都(dou)是(shi)可(ke)以(yi)的，而彩色透(tou)明(ming)的PCR管(guan)更(geng)有助於(yu)進行樣(yang)品(pin)分類(lei)管(guan)理(li)。但qPCR更(geng)推薦(jian)選(xuan)用優質(zhi)的白色PCR耗材(cai)。由(you)於qPCR需要實時定(ding)量檢測(ce)熒光(guang)信(xin)號強度(du)，更需(xu)要(yao)靈(ling)敏(min)、精(jing)確(que)的熒(ying)光(guang)信(xin)號傳(chuan)遞。實驗(yan)證(zheng)明(ming)，與傳(chuan)統的透(tou)明(ming)PCR產(chan)品(pin)相比(bi)，白色PCR產(chan)品(pin)可(ke)大(da)程(cheng)度(du)地(di)反(fan)射(she)熒光(guang)信(xin)號，減(jian)少孔(kong)間信(xin)號交叉(cha)汙染(ran)，可(ke)優(you)化(hua)實時熒(ying)光(guang)定量(liang)PCR的結(jie)果。

高防汙(wu)染(ran)性(xing)

1）蓋(gai)子(zi)要(yao)緊密(mi)，蓋(gai)子(zi)與管(guan)子(zi)的適(shi)配性要好，可(ke)以(yi)減(jian)少交叉(cha)汙染(ran)。

2）PCR板要具有(you)升(sheng)孔(kong)緣，有(you)利(li)於(yu)密封。

3）壹(yi)端有手(shou)持條，聯排(pai)蓋(gai)壹(yi)端要有(you)突出(chu)的手(shou)持端(duan)，開(kai)蓋(gai)減(jian)少汙染。

為什(shen)麽有的PCR板孔(kong)是(shi)凸出(chu)的，有(you)的卻(que)是(shi)平(ping)的呢(ne)，哪個更好？

適(shi)合的才是(shi)好的。常(chang)見的PCR板有平(ping)孔(kong)緣和加高孔(kong)緣兩(liang)種(zhong)。

平(ping)孔(kong)緣的反(fan)應(ying)板，可(ke)適(shi)用於大多數(shu)的PCR儀。

升(sheng)孔(kong)緣的反(fan)應(ying)板，便於(yu)封膜，可(ke)降(jiang)低(di)樣(yang)品(pin)間(jian)的交叉(cha)汙染(ran)風險(xian)。

高辨(bian)識(shi)性度

1）具有(you)數(shu)字(zi)字(zi)母(mu)標識，有助(zhu)於(yu)識(shi)別(bie)單(dan)個(ge)孔(kong)及樣(yang)品(pin)位置。2）具有(you)切角(jiao)，便(bian)於辨認方(fang)向。

對於96孔(kong)或者(zhe)384孔(kong)板，為什(shen)麽切角(jiao)和標識都(dou)不(bu)是(shi)很相同呢(ne)？

這是(shi)由切角(jiao)和標識的作(zuo)用決定的。

切角(jiao)：PCR板的切角(jiao)位置選擇(ze)取決(jue)於(yu)適(shi)配儀器(qi)要(yao)求，便於定位。

標(biao)識：PCR板的數(shu)字(zi)字(zi)母(mu)標記有助(zhu)於(yu)識別(bie)單(dan)個(ge)孔(kong)及樣(yang)品(pin)位置。壹(yi)般為凸(tu)出(chu)的顏(yan)色數(shu)字(zi)標(biao)識(shi)或者印刻(ke)標(biao)識。對於(yu)壹(yi)些自動化應(ying)用實驗(yan)，印刻(ke)標(biao)記的反(fan)應(ying)板密封性(xing)會(hui)更好。

體(ti)積精(jing)確(que)

1）密封性(xing)：緊密(mi)的蓋(gai)子(zi)，或(huo)者其他(ta)方(fang)式比(bi)如(ru)封膜減(jian)少蒸(zheng)發(fa)。

不(bu)同(tong)體(ti)積的PCR管(guan)/板，該怎麽選呢(ne)？

選擇(ze)宗旨(zhi)：依(yi)據具體(ti)的實驗(yan)要求選用合適(shi)的產(chan)品(pin)。PCR管(guan)的體(ti)積大多數(shu)都(dou)可(ke)以(yi)滿(man)足PCR反(fan)應(ying)的要(yao)求。在此基礎上(shang)，推(tui)薦(jian)優(you)先選用低容(rong)管(guan)。因(yin)為低容(rong)反(fan)應(ying)管(guan)/板有著(zhe)較小(xiao)的上(shang)方(fang)空(kong)間，可(ke)提(ti)高熱(re)傳(chuan)導(dao)率(lv)並降(jiang)低蒸(zheng)發(fa)。同(tong)時，在加樣(yang)時需(xu)要避免(mian)加樣(yang)過(guo)量或過(guo)少。過量會(hui)導(dao)致熱(re)傳(chuan)導(dao)率(lv)下降(jiang)，溢出(chu)及(ji)交叉(cha)汙染(ran)，而過少可(ke)能(neng)會(hui)造(zao)成(cheng)樣(yang)品(pin)蒸(zheng)發(fa)損(sun)失。

常(chang)見反(fan)應(ying)管(guan)的規(gui)格及體(ti)積：

單(dan)管(guan)/8聯管(guan)/12聯管(guan)：0.5mL，0.2mL，0.15mL，0.1mL

96孔(kong)板：0.2mL，0.15mL，0.1mL

384孔(kong)板：0.04mL

易操作(zuo)性(xing)

PCR耗材(cai)操(cao)作起來簡單(dan)易行，如(ru)：蓋(gai)子(zi)好蓋(gai)但(dan)不(bu)影(ying)響(xiang)密(mi)封性(xing)等(deng)。PCR耗材(cai)要(yao)與PCR儀器(qi)適(shi)配性好。

對於(yu)96孔(kong)或者(zhe)384孔(kong)板，為什(shen)麽有的有(you)裙邊，有的沒(mei)有呢？

其實PCR/qPCR板的裙(qun)邊是(shi)為了(le)更好地(di)適(shi)應(ying)自動化應(ying)用，可(ke)為(wei)儀器(qi)提(ti)供穩定的支持和機械耐(nai)受(shou)強度(du)，且(qie)移(yi)液(ye)過程(cheng)中的穩定性也會(hui)更(geng)高。PCR板壹(yi)般分為(wei)無裙邊、半裙邊、全裙邊。

無裙邊板：可(ke)適(shi)用於大多數(shu)的PCR儀或qPCR儀，但不(bu)適(shi)用於自動化應(ying)用。移(yi)液(ye)過程(cheng)中穩定性不(bu)高，需(xu)要(yao)配合板托使用。半裙邊板：可(ke)適(shi)配標簽或應(ying)用條碼(ma)，及自動化應(ying)用，且有著較好的移(yi)液(ye)穩定性。全裙(qun)邊板：非常(chang)適(shi)用於自動化實驗(yan)應(ying)用，也可(ke)適(shi)配標簽及應(ying)用條碼(ma)。機械強度(du)較好，可(ke)適(shi)用於凸出(chu)模(mo)塊的PCR儀，且移(yi)液(ye)過程(cheng)中穩定性高。

PCR封板膜有(you)好多種(zhong)類(lei)型(xing)，哪種(zhong)實驗(yan)效(xiao)果(guo)更好呢？

根(gen)據具體(ti)的PCR實驗(yan)要求選用適(shi)配的高質(zhi)量封板膜，不(bu)僅(jin)能有效(xiao)地(di)保(bao)護(hu)樣(yang)品(pin)，防止(zhi)汙染，還可(ke)以(yi)提(ti)供可(ke)信(xin)賴(lai)的實驗(yan)檢測(ce)數(shu)據(ju)。

提(ti)供溫(wen)度(du)耐(nai)受(shou)性和密封性(xing)強(qiang)、高透(tou)明(ming)度、操(cao)作(zuo)簡便的高質(zhi)量PCR/qPCR膜。

     蘇州(zhou)阿爾法(fa)生物(wu)提供的PCR耗材(cai)包(bao)括：0.2mlPCR管(guan)、PCR8聯排(pai)管(guan)、八(ba)排(pai)管(guan)、96孔(kong)PCR板、酶(mei)標板、封板膜等(deng)，同時提(ti)供熒(ying)光(guang)定量(liang)PCR儀、凝膠(jiao)成(cheng)像(xiang)儀、電泳儀等(deng)實驗(yan)室儀器(qi)設(she)備等(deng)。