細(xi)胞(bao)培養需(xu)要註意(yi)什(shen)麽

細(xi)胞(bao)培養需(xu)要註意(yi)什(shen)麽

細(xi)胞(bao)培養需(xu)要註意(yi)什(shen)麽

細(xi)胞(bao)培養是(shi)細(xi)胞(bao)和分(fen)子(zi)生物(wu)學(xue)中(zhong)使(shi)用的關(guan)鍵(jian)工具(ju)。它(ta)可以對(dui)細(xi)胞(bao)生理(li)學(xue)和細(xi)胞(bao)生物(wu)化(hua)學(xue)進行建模。此(ci)外(wai)，細(xi)胞(bao)培養使(shi)研究(jiu)人(ren)員(yuan)能夠確(que)定(ding)藥物(wu)和有毒化(hua)合(he)物(wu)對(dui)細(xi)胞(bao)反應的影響。那(na)麽怎麽(me)培養出(chu)壹批好(hao)的細(xi)胞(bao)呢？細(xi)胞(bao)培養需(xu)要註意(yi)什(shen)麽？
細(xi)胞(bao)培養需(xu)要註意(yi)以(yi)下幾(ji)點：
壹、細(xi)胞(bao)培養環(huan)境
不(bu)同的細(xi)胞(bao)，培養環(huan)境是(shi)不(bu)同的。這(zhe)個(ge)不僅(jin)僅是說(shuo)培養基(ji)的不同，還有就是(shi)細(xi)胞(bao)生長(chang)的空間(jian)密(mi)度(du)問題(ti)。有壹些細(xi)胞(bao)是數(shu)量(liang)多(duo)壹點(dian)比較好(hao)生(sheng)長(chang)，生長狀(zhuang)態(tai)也比(bi)較好(hao)。這(zhe)種壹般(ban)是屬(shu)於生(sheng)長(chang)速度慢(man)的細(xi)胞(bao)，比如：內(nei)皮(pi)細(xi)胞(bao)。而(er)有壹些是細(xi)胞(bao)是數(shu)量(liang)少壹點(dian)細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態(tai)會生(sheng)長(chang)的比較好(hao)，例如：巨(ju)噬(shi)細(xi)胞(bao)和某(mou)些腫瘤細(xi)胞(bao)。尤其(qi)是巨(ju)噬(shi)細(xi)胞(bao)，生長(chang)速度快(kuai)，貼(tie)壁(bi)速度也快(kuai)，所以傳代時(shi)就(jiu)應該留(liu)很少量的細(xi)胞(bao)，這(zhe)樣(yang)細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態(tai)會比(bi)較好(hao)。並(bing)且(qie)巨(ju)噬(shi)細(xi)胞(bao)比較喜(xi)歡紮(zha)堆(dui)生長(chang)，而(er)堆(dui)與(yu)堆(dui)之間(jian)是(shi)有空間(jian)的。如果長成(cheng)相(xiang)連(lian)在壹起(qi)的壹滿片的時(shi)候，細(xi)胞(bao)形態(tai)基本(ben)上就(jiu)會(hui)差了，老(lao)化(hua)的會比(bi)較多(duo)，對(dui)後(hou)期(qi)實(shi)驗結(jie)果是不(bu)好(hao)的。所以(yi)進行細(xi)胞(bao)培養的時(shi)候應該多(duo)探(tan)索(suo)該細(xi)胞(bao)喜歡的生長(chang)空間(jian)密(mi)度(du)和生長規(gui)律等(deng)相關(guan)問題(ti)，才(cai)能培養出(chu)理(li)想(xiang)的細(xi)胞(bao)。
二、良(liang)好(hao)的細(xi)胞(bao)形態(tai)
對(dui)於有些人(ren)總(zong)是(shi)會(hui)遇(yu)到養的細(xi)胞(bao)形態(tai)怎麽(me)都(dou)不好(hao)的問題(ti)。這(zhe)個(ge)其(qi)實(shi)是(shi)有壹個(ge)方(fang)法(fa)可以改(gai)善(shan)的。對(dui)於貼(tie)壁(bi)細(xi)胞(bao)，如果細(xi)胞(bao)形態(tai)不好(hao)，（或(huo)者(zhe)細(xi)胞(bao)形態(tai)不清晰(xi)，表面(mian)似(si)有異(yi)物(wu)等(deng)）可以在傳代的時(shi)候進行如下操(cao)作：
1.倒掉舊(jiu)的培養基(ji)，加入(ru)3ml新的培養基(ji)（有無血(xue)清的都(dou)可）洗滌壹次(ci)，用滴管(guan)吸(xi)走，然後(hou)再(zai)加入(ru)3ml的培養基(ji)，進行預(yu)吹(chui)打，控(kong)制吹(chui)打力度(du)，輕輕(qing)地大概(gai)沿(yan)著瓶(ping)底過壹遍，然後(hou)吸(xi)走。這(zhe)時(shi)侯(hou)再(zai)開(kai)始(shi)正式(shi)的消化(hua)、吹(chui)打。（巨(ju)噬(shi)細(xi)胞(bao)我們(men)只吹(chui)打，不消化(hua)的）
2.把吹(chui)打下來的細(xi)胞(bao)懸(xuan)液加(jia)入(ru)到新的培養瓶(ping)內，培養瓶(ping)事先(xian)加入(ru)培養基(ji)，放入(ru)培養箱(xiang)內培養，按時(shi)間(jian)點(dian)觀(guan)察(cha)細(xi)胞(bao)貼(tie)壁(bi)情況。10分(fen)鐘(zhong)觀(guan)察(cha)壹次(ci)，20分(fen)鐘(zhong)，30分(fen)鐘(zhong)觀(guan)察(cha)壹次(ci)。選擇(ze)壹個(ge)時(shi)間(jian)點(dian)，已(yi)經有部分(fen)細(xi)胞(bao)貼(tie)壁(bi)的情況下，重(zhong)新置(zhi)於潔凈(jing)臺，底面(mian)朝上迅(xun)速倒出(chu)其(qi)中(zhong)的培養基(ji)，加入(ru)3ml新培養基(ji)再(zai)輕輕(qing)洗(xi)壹次(ci)。然後(hou)加入(ru)培養基(ji)培養。後(hou)續(xu)觀察(cha)細(xi)胞(bao)生長(chang)情況以及(ji)形(xing)態(tai)。
3.如果壹次(ci)效果還不(bu)理(li)想(xiang)，可重復(fu)多(duo)次，直到找(zhao)到細(xi)胞(bao)合(he)適(shi)的形態(tai)。這(zhe)裏(li)需(xu)要註意(yi)的是要(yao)結合(he)細(xi)胞(bao)的生長(chang)情況而(er)定。
三(san)、培養基(ji)的量
由(you)於每(mei)種(zhong)細(xi)胞(bao)的生長(chang)環(huan)境不(bu)同，對(dui)養料(liao)需求也是(shi)不相同的，這(zhe)就需(xu)要我們(men)取(qu)認真了(le)解(jie)每(mei)種細(xi)胞(bao)系的特(te)性(xing)，根(gen)據細(xi)胞(bao)生長(chang)需求及細(xi)胞(bao)特(te)性(xing)來選擇(ze)培養基(ji)類(lei)型(xing)和適(shi)宜(yi)的培養基(ji)添加(jia)劑(ji)。關(guan)於培養容(rong)器(qi)並(bing)不(bu)是(shi)小(xiao)的玻(bo)璃方(fang)瓶(ping)12ml，大方(fang)瓶(ping)14ml的。有些細(xi)胞(bao)反而(er)是培養基(ji)少壹點(dian)，細(xi)胞(bao)形態(tai)會長(chang)得(de)更好(hao)。（可對(dui)於生(sheng)長(chang)速度快(kuai)的細(xi)胞(bao)，易(yi)生(sheng)長的細(xi)胞(bao)加少壹點(dian)培養基(ji)細(xi)胞(bao)形態(tai)會更好(hao)。但(dan)是(shi)需要註意(yi)及(ji)時(shi)補液、換(huan)液，避(bi)免(mian)細(xi)胞(bao)死(si)亡(wang)。
四(si)、細(xi)胞(bao)培養瓶(ping)的選擇(ze)
在實(shi)驗過(guo)程(cheng)中(zhong)妳(ni)常(chang)常會發(fa)現發(fa)現生長(chang)速度快(kuai)的細(xi)胞(bao)在玻(bo)璃瓶內生長的狀(zhuang)態(tai)會比(bi)壹次(ci)性塑(su)料(liao)瓶相(xiang)對(dui)好(hao)壹些。而(er)對(dui)於同壹種(zhong)細(xi)胞(bao)，在其(qi)生長旺盛快速的時(shi)期(qi)在玻(bo)璃瓶內的生長(chang)狀(zhuang)態(tai)也比(bi)塑料瓶內好(hao)。這(zhe)可能是(shi)因為(wei)塑料瓶(ping)比(bi)玻(bo)璃瓶更容(rong)易(yi)貼(tie)壁(bi)。生長速度快(kuai)的細(xi)胞(bao)在塑料(liao)瓶這(zhe)種相(xiang)對(dui)“更安(an)逸"的環(huan)境裏(li)反(fan)而(er)長得(de)狀(zhuang)態(tai)不如玻(bo)璃瓶好(hao)。
所(suo)以(yi)對(dui)於生(sheng)長(chang)速度慢(man)的細(xi)胞(bao)如果想要(yao)更漂(piao)亮(liang)的細(xi)胞(bao)狀(zhuang)態(tai)，塑料(liao)瓶(ping)比(bi)玻(bo)璃瓶會好(hao)，對(dui)於生(sheng)長(chang)速度快(kuai)的細(xi)胞(bao)，玻(bo)璃瓶則會更好(hao)。同樣(yang)，對(dui)於同壹種(zhong)細(xi)胞(bao)，在其(qi)生長速度慢(man)的時(shi)候，塑料(liao)瓶會(hui)好(hao)壹點(dian)，比如剛剛復蘇(su)的時(shi)候，或(huo)者(zhe)原(yuan)代培養的時(shi)候。而(er)在其(qi)生長旺盛的時(shi)候，玻(bo)璃瓶則相對(dui)會(hui)好(hao)壹點(dian)。掌握了上面(mian)這(zhe)些小(xiao)技(ji)巧(qiao)，就(jiu)能培養出(chu)漂亮(liang)的細(xi)胞(bao)了。
     蘇(su)州(zhou)阿(e)爾(er)法(fa)生(sheng)物(wu)14年(nian)專(zhuan)註於生(sheng)命(ming)科(ke)學(xue)領(ling)域(yu)實(shi)驗室(shi)設備(bei)及實(shi)驗室(shi)耗(hao)材(cai)和試(shi)劑(ji)供應，包(bao)括振蕩培養箱(xiang)、生物(wu)反(fan)應器(qi)、發(fa)酵(jiao)罐、移液器(qi)、PCR儀(yi)、光(guang)學(xue)顯微(wei)鏡等(deng)，集(ji)實(shi)驗室(shi)設計規(gui)劃、實(shi)驗室(shi)儀器(qi)設備(bei)、生物(wu)實(shi)驗器(qi)材(cai)供應、售後(hou)服務為壹體(ti)的壹站(zhan)式(shi)供應商(shang)，大量(liang)供應、使(shi)您(nin)的實(shi)驗室(shi)采購(gou)更加(jia)方(fang)便(bian)快捷。