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更(geng)新時(shi)間:2022-11-11
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胎(tai)牛血清 (FBS) 是(shi)來(lai)自胎(tai)牛的(de)凝(ning)結血液的(de)液(ye)體部分,不含細(xi)胞、纖(xian)維(wei)蛋(dan)白和凝血因子(zi),但(dan)含有(you)大(da)量對(dui)細(xi)胞生(sheng)長至關重要(yao)的(de)營養和(he)大(da)分子(zi)因子(zi)。牛血清白蛋(dan)白是(shi)FBS 的(de)主要成(cheng)分。FBS 中的(de)生(sheng)長因子(zi)對(dui)於(yu)培養細(xi)胞的(de)維(wei)持和生(sheng)長至關重要(yao)。FBS 還含有(you)多(duo)種(zhong)小分子(zi),如(ru)氨(an)基酸(suan)、糖(tang)、脂(zhi)質(zhi)和激(ji)素。
FBS 應用廣泛(fan)。FBS 的(de)主要用途之(zhi)壹(yi)是(shi)在真核細(xi)胞培養中(zhong),其濃度高(gao)達(da) 20% 甚(shen)至更高(gao),它提供(gong)許多(duo)促(cu)進細(xi)胞存(cun)活(huo)和增殖(zhi)的(de)必需營養素和生(sheng)長因子(zi)。然而,需(xu)要(yao)註(zhu)意(yi)的(de)是(shi),人類(lei)細(xi)胞培養物(wu)中(zhong)的(de) FBS 可(ke)能會(hui)引(yin)入研究(jiu)成果。用人類(lei)血清培養的(de)人類(lei)細(xi)胞與用 FBS 培養的(de)細(xi)胞表(biao)現不同。FBS 還用於人類(lei)和(he)獸(shou)用疫苗以(yi)及生(sheng)物(wu)技(ji)術藥物(wu)的(de)研究(jiu)、制造和控(kong)制(zhi),並(bing)用於阻止(zhi)胰(yi)蛋(dan)白酶消(xiao)化(hua) 或用作冷(leng)凍保(bao)存(cun)中(zhong)的(de)保(bao)護(hu)劑。

為什(shen)麽(me)使(shi)用胎(tai)兒(er)血清而(er)不是(shi)新生(sheng)兒(er)血清或(huo)成(cheng)人血清?
胎(tai)兒(er)血清含有(you)較(jiao)多的(de)生(sheng)長因子(zi),丙種(zhong)球(qiu)蛋(dan)白(即抗(kang)體)含量(liang)較(jiao)低,非胎(tai)兒(er)血清也(ye)有(you)。這(zhe)些(xie)很(hen)重要,因為生(sheng)長因子(zi)促(cu)進細(xi)胞存(cun)活(huo)和增殖(zhi),而(er)抗(kang)體可(ke)以與培養的(de)細(xi)胞結(jie)合(he)。此外,與成人或新生(sheng)兒(er)相比,胎(tai)兒(er)血清中(zhong)的(de)補(bu)體(ti)蛋(dan)白(補(bu)體(ti))含量(liang)較(jiao)低。這(zhe)些(xie)補(bu)體(ti)具(ju)有(you)溶(rong)解(jie)培養細(xi)胞和(he)幹擾(rao)免疫測(ce)定的(de)不良作用。
血清和(he)血漿有(you)什(shen)麽(me)區(qu)別?
血清和(he)血漿均(jun)來(lai)自全血,通過離(li)心(xin)去除(chu)包括(kuo)紅細(xi)胞在(zai)內的(de)成(cheng)分。血漿和(he)血清之(zhi)間(jian)的(de)區(qu)別在(zai)於,凝(ning)血蛋(dan)白存(cun)在(zai)於(yu)血漿中(zhong),但(dan)已從血清中(zhong)去(qu)除。血漿壹(yi)般(ban)是(shi)通過在(zai)離(li)心(xin)前向(xiang)血液中(zhong)加入抗(kang)凝劑來(lai)制備(bei)的(de),但(dan)不會(hui)去(qu)除(chu)凝(ning)血蛋(dan)白。通過在(zai)離(li)心(xin)前使(shi)血液凝(ning)固(gu)或通過廣(guang)泛(fan)/漸進離(li)心(xin)來(lai)制備(bei)血清。因此,與凝血相關的(de)纖(xian)維(wei)蛋(dan)白原和蛋(dan)白質(zhi)不存(cun)在(zai)於(yu)血清中(zhong)。
在(zai)人類(lei)中(zhong),以(yi)下 22 種(zhong)蛋(dan)白質(zhi)占(zhan)血清和(he)血漿總蛋(dan)白質(zhi)含量(liang)的(de) 99%:白蛋(dan)白、總 IgG、轉鐵(tie)蛋(dan)白、纖(xian)維(wei)蛋(dan)白原、總 IgA 、α-2-巨球(qiu)蛋(dan)白、總 IgM、α-1-抗(kang)胰(yi)蛋(dan)白酶、C3 補(bu)體(ti)、結(jie)合(he)球(qiu)蛋(dan)白、α-1-酸(suan)性糖(tang)蛋(dan)白、載脂(zhi)蛋(dan)白-B 、載脂(zhi)蛋(dan)白-A1、脂(zhi)蛋(dan)白 (a)、因子(zi) H、銅(tong)藍(lan)蛋(dan)白、C4 補(bu)體(ti)、補(bu)體(ti)因子(zi) B 、前(qian)白蛋(dan)白、C9 補(bu)體(ti)、C1q 補(bu)體(ti)和(he) C8 補(bu)體(ti)。剩(sheng)下的(de) 1% 包括(kuo)數百種(zhong)蛋(dan)白質(zhi)。豐富的(de)血清蛋(dan)白白蛋(dan)白,濃度為 50 mg/ml ,約(yue)占(zhan)總蛋(dan)白質(zhi)量的(de)壹(yi)半(ban)。
胎(tai)牛血清的(de)檢驗標準是(shi)什(shen)麽(me)?
國(guo)際血清工業(ye)協(xie)會(hui) ISIA是(shi)血清供(gong)應貿易(yi)組織(zhi),制(zhi)定了質(zhi)量控(kong)制標準化(hua)指南(nan)。這(zhe)些(xie)指(zhi)南(nan)要求(qiu)使(shi)用特定方(fang)法(fa)進行(xing)以(yi)下測(ce)試,並且(qie)測(ce)試結果(guo)必須作為分析證(zheng)書(shu)提供(gong)。
| 測(ce)試 |
| 細(xi)菌和(he)真菌 - 無(wu)菌測(ce)試 |
| 支(zhi)原體 |
| 細(xi)胞病(bing)變劑(ji) - 病毒檢測(ce) |
| 血液吸附(fu)劑 - 病毒(du)檢測(ce) |
| 牛病毒(du)性腹瀉 - 病(bing)毒檢測(ce) |
| pH 測(ce)量 |
| 滲(shen)透壓(ya) |
| 總蛋(dan)白, 雙(shuang)縮脲法(fa)測(ce)定 |
| 內(nei)毒(du)素 |
| 血紅蛋(dan)白 |
| 電(dian)泳(yong)圖 |
| 性能測(ce)試,例如幹細(xi)胞培養 |
| 徑向(xiang)免疫擴散 |
| 免疫球蛋(dan)白 |
| γ-谷氨酰(xian)轉移(yi)酶(mei) (GGT) |
內毒素,也稱為脂(zhi)多(duo)糖(tang)(LPS)或(huo)脂(zhi)寡糖(tang)(LOS),來(lai)自革(ge)蘭氏(shi)陰性菌的(de)外膜(mo),有(you)助於(yu)多(duo)種(zhong)致(zhi)病性革(ge)蘭氏(shi)陰性菌的(de)臨(lin)床表(biao)現。在(zai)體(ti)內 ,內(nei)毒素會(hui)引(yin)起(qi)發(fa)燒(shao)和炎(yan)癥反(fan)應,而(er)在(zai)細(xi)胞培養中(zhong)它們(men)會(hui)引(yin)起(qi)細(xi)胞反(fan)應的(de)變(bian)化(hua)。
內毒素水平通過鱟(hou)變形細(xi)胞裂(lie)解(jie)物(wu) (LAL) 測(ce)試或較(jiao)新的(de)合(he)成(cheng)測(ce)試(稱為重(zhong)組因子(zi)測(ce)定)進(jin)行(xing)測(ce)量。變形細(xi)胞類(lei)似(si)於(yu)脊椎(zhui)動物(wu)中(zhong)的(de)白細(xi)胞,LAL 是(shi)由鱟(hou) (美(mei)洲(zhou)鱟(hou);圖 1)的(de)血液制(zhi)備(bei)的(de)。LAL 對(dui)內(nei)毒素非常敏感,即使(shi)存(cun)在(zai)微(wei)量(liang)的(de)內(nei)毒素也會(hui)凝(ning)結(jie)。許(xu)多鱟(hou)種(zhong)群(qun)處(chu)於危(wei)險(xian)之(zhi)中(zhong),因此應註(zhu)意(yi)保護(hu)它們(men)免受 消(xiao) 失。

圖 1.美(mei)洲(zhou)鱟(hou)
不含外泌(mi)體或(huo)其他(ta)成分的(de) FBS
常(chang)規 FBS 含有(you)大(da)量細(xi)胞外囊泡,其中壹些(xie)是(shi)外泌(mi)體。使(shi)用培養細(xi)胞進(jin)行(xing)外泌(mi)體研究(jiu)時(shi),使用不含外泌(mi)體的(de) FBS 至(zhi)關重要(yao)。然而,重(zhong)要(yao)的(de)是(shi)要意(yi)識到(dao),去(qu)除(chu)外泌(mi)體的(de) FBS 可(ke)能會(hui)以(yi)不同於(yu)常(chang)規(gui) FBS 的(de)方(fang)式影響和支(zhi)持細(xi)胞生(sheng)長。去除(chu)外泌(mi)體的(de) FBS 可(ke)以可(ke)以通(tong)過超(chao)速(su)離心(xin)或超(chao)濾(lv)制(zhi)備.
蘇(su)州(zhou)阿(e)爾(er)法(fa)生(sheng)物(wu)13年(nian)專(zhuan)註(zhu)於(yu)生(sheng)物(wu)實(shi)驗室(shi)儀器及生(sheng)物(wu)試(shi)劑(ji)耗材(cai)的(de)供(gong)應,阿(e)爾(er)法(fa)試(shi)劑主要包括(kuo):胎(tai)牛血清,新生(sheng)牛血清,培養基,抗(kang)體,天(tian)根(gen)質(zhi)粒(li)小提試(shi)劑盒(he),基因組提取試(shi)劑盒(he),純化(hua)試劑盒(he),壹抗(kang)、二抗(kang)等。
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