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HEK293T 細(xi)胞(bao)與HEK293是同壹(yi)種(zhong)細(xi)胞(bao)嗎(ma)?
更(geng)新時(shi)間:2022-09-01
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如果(guo)您*熟悉細胞(bao)培(pei)養(yang),您(nin)可(ke)能(neng)聽(ting)說過 HEK293 細(xi)胞(bao)。HEK293 細(xi)胞(bao)新藥(yao)實驗室(shi) 較(jiao)為常用的(de)細胞(bao)系之(zhi)壹。但它(ta)們是什(shen)麽(me)?為什(shen)麽(me)要使(shi)用它(ta)們?“293" 是什(shen)麽(me)意(yi)思(si)?與HEK293T 細(xi)胞(bao)相(xiang)同(tong)嗎(ma)?請(qing)繼(ji)續(xu)閱讀這(zhe)些(xie)問題的答(da)案以(yi)及更(geng)多內(nei)容(rong)。 壹、什(shen)麽(me)是 HEK293 細胞(bao)? HEK293 細(xi)胞(bao)是人類(lei)胚(pei)胎腎細胞(bao),起(qi)初(chu)由(you)荷蘭生(sheng)物(wu)學家 Alex Van der Eb 在(zai) 1970 年代(dai)初(chu)期(qi)分(fen)離(li)和培養(yang)。Van der Eb 實驗室(shi)的(de)博士後(hou) Frank Graham 用剪(jian)切的(de)腺病(bing)毒(du) 5 (Ad5) DNA 進(jin)行轉(zhuan)染(ran) 。這(zhe)是他(ta)們的第(di) 293 次(ci)實驗,所(suo)以(yi)就命(ming)名該(gai)細胞(bao)系為 HEK293 ,蓋(gai)細(xi)胞(bao)系的主(zhu)要作(zuo)用是通過細(xi)胞(bao)的(de)基因(yin)改(gai)造(zao)實現(xian)重(zhong)組(zu)蛋白合成。那麽(me),HEK293T 細(xi)胞(bao)與HEK293是同壹(yi)種(zhong)細(xi)胞(bao)嗎(ma)? 其(qi)實,並不*是,因(yin)為系HEK293T細胞(bao)的(de)來源是將 SV40 大(da) T 抗(kang)原(yuan)整(zheng)合到 HEK293 基(ji)因(yin)組(zu)中(zhong)——這(zhe)意(yi)味(wei)著它們(men)能(neng)夠(gou)從攜帶 SV40 復制起(qi)點(dian)的(de)質(zhi)粒(li)載體中產(chan)生(sheng)大(da)量(liang)蛋白質(zhi)。 ![]() 二(er)、HEK 細胞(bao)有(you)何(he)優點(dian)? 使(shi)用 HEK293 細(xi)胞(bao)有(you)很(hen)多優點(dian)。它(ta)們(men)是壹種(zhong)耐(nai)寒(han)、半(ban)貼壁、低(di)維護的細胞(bao)系,分(fen)裂(lie)迅速(su),大(da)約(yue)每 36 小時可(ke)以(yi)增長(chang) 1倍。培(pei)養(yang)的(de)細(xi)胞(bao)既能(neng)用於瞬時(shi)和穩(wen)定(ding)表達,也(ye)可(ke)懸浮(fu)培(pei)養(yang)或(huo)作為單層(ceng)培(pei)養(yang),比(bi)較容(rong)易轉(zhuan)染(ran),並且(qie)能(neng)夠(gou)產(chan)生(sheng)大(da)量(liang)的 重(zhong)組(zu)蛋白。 目(mu)前,HEK293 細胞(bao)主(zhu)要用於癌癥研究(jiu)、新藥(yao)開發(fa)、抗(kang)體(ti)蛋白生(sheng)產(chan)、信(xin)號轉導和蛋白質(zhi)相(xiang)互(hu)作(zuo)用研(yan)究等領域(yu)。 三、 HEK293 細(xi)胞(bao)的(de)分(fen)類(lei) HEK293 細胞(bao)已(yi)被用於創建具(ju)有(you)特(te)定(ding)用途(tu)的各種衍(yan)生(sheng)細(xi)胞(bao)系。 表 1:HEK293 細(xi)胞(bao)的(de)壹些常用衍(yan)生(sheng)物(wu)。
HEK293 細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)對(dui)培(pei)養(yang)環(huan)境(jing)要求(qiu)不(bu)高(gao)。壹般情況下(xia)維持 37°C 和 5% CO 2的加(jia)濕培(pei)養(yang)箱及(ji)充足的(de)培(pei)養(yang)基(ji)供(gong)應(ying)即可(ke)滿足(zu) ,為防止細菌感(gan)染(ran),必要時(shi)可(ke)添加(jia)少許抗(kang)生(sheng)素(su),比(bi)如:青(qing)黴(mei)素-鏈黴素(su)-谷(gu)氨(an)酰胺等。細(xi)胞(bao)轉(zhuan)染方(fang)式(shi)可(ke)以(yi)建議使(shi)用HEK293 轉(zhuan)染試(shi)劑盒,操作方(fang)便、簡單。 ![]() 五(wu)、HEK293 細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)註(zhu)意(yi)事(shi)項(xiang) 1.HEK293在(zai)進行傳(chuan)代(dai)培(pei)養(yang)時(shi),長(chang)期(qi)培養(yang)會導致細胞(bao)活(huo)力下降,所(suo)以(yi)培養(yang)代(dai)數(shu)不宜(yi)過多(duo),通(tong)常培(pei)養(yang)的(de)代(dai)數(shu)維持在(zai)13代以(yi)下,如(ru)果(guo)選擇的(de)細(xi)胞(bao)系超(chao)過20代(dai),需(xu)要需(xu)要解(jie)凍新的(de)細胞(bao)重(zhong)新開始(shi)。 2.實驗操(cao)作過程(cheng)中(zhong)需(xu)要註(zhu)意(yi)無(wu)菌操作(zuo),避(bi)免(mian)支原(yuan)體感(gan)染(ran),同(tong)時做(zuo)好(hao)定(ding)時檢(jian)測。 3.由於HEK293 細胞(bao)系的衍(yan)生(sheng)物(wu)較(jiao)多(duo),所以(yi)培養(yang)時(shi)需(xu)要根(gen)據(ju)實驗選擇合適的(de)細(xi)胞(bao)系進行培(pei)養(yang)。 蘇(su)州(zhou)阿(e)爾法(fa)生(sheng)物(wu)實驗器(qi)材有(you)限(xian)公司(si)13年(nian)專(zhuan)註(zhu)於生(sheng)物(wu)實驗室(shi)儀(yi)器設(she)備(bei)與耗(hao)材(cai)的供應,儀器設(she)備(bei)涵蓋(gai)生(sheng)物(wu)反(fan)應器(qi)、發(fa)酵罐、細(xi)胞(bao)搖床、PCR儀(yi)、移液器(qi)、離(li)心(xin)機等上(shang)百種(zhong)品類(lei)試(shi)劑耗(hao)材(cai)包(bao)括:培(pei)養(yang)瓶、搖瓶、培養(yang)基(ji)、 HEK293細(xi)胞(bao) 、細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)試(shi)劑、細胞(bao)轉(zhuan)染試劑盒等細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)相(xiang)關(guan)。如有(you)更(geng)多問題可(ke)進入網(wang)站(zhan)進行咨詢。 |
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