熒(ying)光定量(liang)PCR在(zai)分子(zi)生物(wu)學及醫學研究(jiu)領(ling)域的(de)應用

PCR儀在生命(ming)科(ke)學及醫學研究(jiu)實驗室中廣(guang)泛(fan)使(shi)用，熒(ying)光定量(liang)PCR實驗法的(de)普遍應用不(bu)僅(jin)僅(jin)表(biao)現在(zai)基因擴(kuo)增方面，在(zai)以(yi)下實驗中也(ye)發(fa)揮(hui)著(zhe)重要(yao)作(zuo)用。

壹(yi)、分子(zi)生物(wu)學研究(jiu)方面 
1、核酸定量(liang)分(fen)析 通過(guo)核酸的(de)定量(liang)擴(kuo)增，從而達(da)到病原(yuan)微(wei)生物(wu)分(fen)析檢測的(de)目的(de)。比如通過(guo)咽拭子采集(ji)樣本(ben)，進(jin)行(xing)樣本(ben)PCR擴(kuo)增的(de)方式定(ding)向(xiang)分析檢(jian)測(ce)流感病(bing)毒(du)等。
2、基(ji)因表(biao)達(da)差異化(hua)分(fen)析 通過(guo) 熒(ying)光定量(liang)PCR法來比較(jiao)經(jing)過(guo)不同樣本間的(de)基因(yin)表(biao)達(da)差異。為(wei)下遊實驗提供充分的(de)實驗數據(ju)。
3、SNP 檢測：熒(ying)光定量(liang)分(fen)析實驗中常用TaqMan探針(zhen)法即針(zhen)對(dui)DNA 貨RNA上不同SNP位點進(jin)行(xing)獨立的(de)PCR引物(wu)設計和(he)TaqMan探針(zhen)設計 ，再進(jin)行(xing)熒(ying)光PCR擴(kuo)增、熒(ying)光PCR分析從而判別單核苷(gan)酸的(de)多態(tai)型(xing)對(dui)特定(ding)藥(yao)物(wu)的(de)反(fan)應 ，或(huo)單堿(jian)基多型(xing)等差(cha)異研(yan)究(jiu)。
4、甲基化(hua)檢(jian)測 基因中的(de)甲基化(hua)通常會抑(yi)制基因表(biao)達(da)所以(yi)與(yu)生物(wu)體(ti)的(de)生長發(fa)育調控(kong)有(you)著(zhe)密(mi)切的(de)關系。比如受甲基化(hua)影(ying)響(xiang)所造成(cheng)的(de)腫瘤(liu)類疾病(bing)。而在 DNA修飾中通過(guo)去(qu)甲基化(hua)，在(zai)不改變(bian)基因(yin)序列(lie)的(de)前(qian)提下，重新活化(hua)及(ji)基因表(biao)達(da)，減少腫瘤(liu)細(xi)胞形成概(gai)率(lv)。通過(guo)電(dian)泳(yong)檢(jian)測(ce)MSP擴(kuo)增產(chan)物(wu)，利(li)用熒(ying)光應定(ding)量(liang)PCR 分(fen)析法對(dui)甲基化(hua)DNA鏈(lian)的(de)引物(wu)片段(duan)進(jin)行(xing)PCR擴(kuo)增可檢(jian)測(ce)到甲基化(hua)的(de)存在(zai)位(wei)點(dian)。

 

二(er)、醫學研究(jiu)領(ling)域
在(zai)醫學研究(jiu)方面熒(ying)光定量(liang)PCR常(chang)被(bei)應用在(zai)產前(qian)診(zhen)斷，比如：醫學產檢過(guo)程(cheng)中通過(guo)從孕(yun)婦(fu)的(de)外周(zhou)血液中分離出胎(tai)兒DNA， 用實時(shi)熒(ying)光定量(liang)PCR 的(de)方法檢測(ce)染色體(ti)遺(yi)傳(chuan)類疾病(bing)是(shi)產前(qian)遺(yi)傳(chuan)病篩查的(de)有(you)效(xiao)手段(duan)。另外，病(bing)原(yuan)體(ti)檢(jian)測(ce)、藥(yao)效(xiao)測(ce)試(shi)、腫瘤(liu)基(ji)因(yin)分(fen)析(xi)等方面也(ye)同樣離不開(kai)熒(ying)光定量(liang)PCR實驗分析(xi)法。