TFF和(he)ATF切(qie)向(xiang)流技術(shu)在生(sheng)物(wu)反應器(qi)灌流培養中(zhong)的應(ying)用(yong)

目(mu)前(qian)在(zai)生(sheng)物(wu)反應器(qi)中(zhong)使(shi)用(yong)細(xi)胞(bao)培養技術(shu)進行(xing)生(sheng)物(wu)制(zhi)藥(yao)與抗體生(sheng)產(chan)已(yi)逐漸成(cheng)為(wei)現代制(zhi)藥(yao)新技(ji)術(shu)。細(xi)胞(bao)培養關鍵工(gong)藝(yi)主要有三(san)種即：批次(ci)培(pei)養、灌流培養、連續灌流培養。TFF和(he)ATF切(qie)向(xiang)流技術(shu)在灌流培養和(he)連(lian)續培養工(gong)藝(yi)中(zhong)應用(yong)較(jiao)為(wei)普遍(bian)。

灌流培養工(gong)藝(yi)
灌流培養工(gong)藝(yi)簡單(dan)來(lai)講就是將細(xi)胞(bao)與培(pei)養基(ji)混合加(jia)入(ru)加(jia)入(ru)到(dao)生(sheng)物(wu)反應器(qi)進行培養，而(er)後通(tong)過細(xi)胞(bao)截流技術(shu)截留細(xi)胞(bao)，濾(lv)出廢(fei)棄培養基(ji)，灌註(zhu)新(xin)培(pei)養基(ji)進(jin)行細(xi)胞(bao)培養的工(gong)藝(yi)過(guo)程(cheng)。這種細(xi)胞(bao)培養方式比批次(ci)培(pei)養操作方便，產(chan)能(neng)及(ji)效(xiao)率較(jiao)高。灌流式培養工(gong)藝(yi)中(zhong)細(xi)胞(bao)截留裝置多(duo)數采(cai)用(yong)微(wei)孔濾(lv)膜(mo)設計(ji)、中(zhong)空(kong)纖(xian)維膜(mo)或(huo)旋(xuan)轉膜(mo)裝置，用(yong)來(lai)截留流大分子產(chan)物(wu)和(he)培(pei)養細(xi)胞(bao)。這種培(pei)養截留方式適(shi)用(yong)於大多(duo)數罐(guan)式(shi)生(sheng)物(wu)反應器(qi)及(ji)懸浮(fu)培養操作。如果進(jin)行(xing)固定(ding)化(hua)細(xi)胞(bao)培養也可(ke)以(yi)使(shi)用(yong)固(gu)定(ding)床(chuang)式(shi)生(sheng)物(wu)反應器(qi) ，這種反應器(qi)內(nei)部會(hui)單(dan)獨裝配固(gu)定(ding)的聚(ju)脂纖(xian)維載體培(pei)養床(chuang)使(shi)細(xi)胞(bao)附著於纖維載體中(zhong)進行(xing)生(sheng)長(chang)，通(tong)過攪拌(ban)負壓使(shi)培養基(ji)在(zai)固定(ding)的聚(ju)酯纖維載體網(wang)籃中(zhong)快速(su)流通(tong)，提升(sheng)細(xi)胞(bao)所(suo)需營養成(cheng)分(fen)的補(bu)充(chong)速度(du)和(he)氧(yang)氣(qi)傳遞，有(you)利(li)於短時(shi)間(jian)提高(gao)細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)密(mi)度(du)。

TFF和(he)ATF切(qie)向(xiang)流技術(shu)的應(ying)用(yong)
在(zai)使(shi)用(yong)傳(chuan)統的微(wei)濾(lv)膜(mo)時(shi)，由於液體的流向(xiang)與(yu)過(guo)濾(lv)的方向(xiang)相(xiang)壹(yi)致，這樣(yang)會因(yin)固形物(wu)滯(zhi)留堆(dui)積在(zai)濾(lv)膜(mo)表面形成(cheng)的較(jiao)厚的濾(lv)餅(bing)層(ceng)堵(du)塞(sai)微(wei)孔致使(shi)流速降(jiang)低，因(yin)此(ci)只(zhi)適(shi)合少量樣(yang)品微(wei)濾(lv)，不(bu)太適(shi)合生(sheng)物(wu)反應器(qi)放大生(sheng)產(chan)。而(er)TFF切相(xiang)流技術(shu)則(ze)是通(tong)過蠕(ru)動泵貨其它(ta)增壓(ya)方式改變(bian)過(guo)濾(lv)方向(xiang)使(shi)其與(yu)液體流向(xiang)相(xiang)互(hu)垂(chui)直(zhi)，從(cong)而(er)減少過(guo)濾(lv)器(qi)堵(du)塞(sai)風(feng)險，常(chang)見(jian)的切(qie)相(xiang)流程(cheng)方式有旋轉過(guo)濾(lv)切(qie)向(xiang)流、旋轉切(qie)向(xiang)流、使(shi)用(yong)錯(cuo)流過濾(lv)器(qi)切向(xiang)流等.但(dan)由於使(shi)用(yong)TFF切(qie)向(xiang)流方式壹般(ban)具(ju)有(you)較(jiao)大的細(xi)胞(bao)剪切(qie)力，不太適(shi)合過於脆弱(ruo)的細(xi)胞(bao)。

ATF切向(xiang)流技術(shu)
ATF切向(xiang)流也稱(cheng)為(wei)交(jiao)替(ti)式切(qie)向(xiang)流是將中(zhong)空(kong)纖(xian)維柱、高(gao)壓(ya)空(kong)氣(qi)泵、隔膜(mo)真空(kong)泵相互(hu)連(lian)接，通(tong)過氣(qi)泵與真空(kong)泵調節壓(ya)力差，使(shi)細(xi)胞(bao)和(he)培(pei)養基(ji)通(tong)過中(zhong)空(kong)纖(xian)維柱反復(fu)交(jiao)替(ti)。從(cong)而(er)達(da)到細(xi)胞(bao)截留在(zai)中(zhong)空(kong)纖(xian)維柱內(nei)的培(pei)養的方法.利用(yong) ATF切(qie)向(xiang)流技術(shu)可以(yi)有效(xiao)降(jiang)低細(xi)胞(bao)剪切(qie)力，使(shi)細(xi)胞(bao)在較(jiao)高灌流速度短時(shi)間(jian)獲取(qu)較(jiao)高(gao)的數(shu)量細(xi)胞(bao)密度(du)及(ji)產(chan)物(wu)產(chan)量。比較適(shi)合灌流培養及(ji)連續培養等放(fang)大生(sheng)產(chan)工(gong)藝(yi)中(zhong)。