免(mian)疫測定(ding)的(de)原理(li)和(he)方(fang)法(fa)

免(mian)疫測定(ding) (IA) 是極其(qi)重要(yao)的(de)生物(wu)分析方(fang)法(fa)，免(mian)疫測定(ding)的(de)原理(li)及(ji)免(mian)疫測定(ding)方(fang)法(fa)用(yong)於(yu)量(liang)化(hua)溶液中(zhong)從小(xiao)分子到(dao)大(da)分子的(de)分析物(wu)（血(xue)清(qing)、毒(du)素、激素(su)等(deng)），使用抗體(ti)或抗(kang)原作為生物(wu)識(shi)別劑(ji)。通(tong)常(chang)應(ying)用於廣(guang)泛(fan)的(de)科學學(xue)科，包括(kuo)生(sheng)物制(zhi)藥分析、臨床(chuang)診斷、環境(jing)監(jian)測和食(shi)品(pin)檢(jian)測(ce)。

酶(mei)聯(lian)免(mian)疫吸附試驗(yan)

1917 年(nian)，奧(ao)地(di)利(li)生(sheng)物(wu)學(xue)家(jia)卡(ka)爾(er)·蘭德施泰納 (Karl Landsteiner) 開(kai)發了分析具有抗(kang)原特性(xing)的(de)小(xiao)分子的(de)方(fang)法(fa)。他的(de)方(fang)法(fa)成(cheng)為發展免(mian)疫分析的(de)框(kuang)架。從 1995 年(nian)到(dao) 2017 年(nian)，科學家(jia)們開(kai)發了廣(guang)泛(fan)的(de)免(mian)疫測定(ding)法(fa)，可(ke)以(yi)對(dui)生物樣(yang)品(pin)進行(xing)定(ding)性(xing)和(he)定(ding)量(liang)檢(jian)測(ce)。

IA在臨床(chuang)決(jue)策中(zhong)起著至(zhi)關(guan)重要(yao)的(de)作用(yong)，因此(ci)對(dui)於(yu)醫(yi)療保(bao)健(jian)環境(jing)來(lai)說是較(jiao)為重要(yao)的(de)。大(da)多數(shu)免(mian)疫測定(ding)方(fang)法(fa)基於(yu)放射免(mian)疫測定(ding)（RIA）和(he)酶(mei)免(mian)疫測定(ding)（EIA）。壹(yi)種常(chang)見(jian)的(de) EIA 類型是酶(mei)聯(lian)免(mian)疫吸附測定(ding) (ELISA)，它有許(xu)多應(ying)用。ELISA 和 RIA 試(shi)劑(ji)盒(he)均(jun)可在市場上(shang)買(mai)到(dao)，用於(yu)檢(jian)測(ce)各種分析物(wu)。這(zhe)些(xie)測(ce)定(ding)法(fa)具有*的(de)特異性(xing)和(he)敏(min)感(gan)性(xing)，因(yin)此(ci)可(ke)作為大(da)量分析物(wu)（抗(kang)原）的金標準(zhun)。免(mian)疫測定(ding)的(de)主(zhu)要(yao)優(you)點包括(kuo)價(jia)格低(di)廉、檢(jian)測(ce)低(di)水平(ping)分子的(de)能(neng)力、準確(que)性(xing)和(he)廣(guang)泛(fan)的(de)適用性(xing)。  

免(mian)疫測定(ding)原理(li)

為應(ying)對細菌(jun)和(he)病毒(du)等外(wai)來(lai)物質或抗(kang)原，所(suo)有動(dong)物和人類(lei)都(dou)會(hui)通(tong)過(guo)免(mian)疫系(xi)統(tong)產(chan)生抗體(ti)。抗體(ti)是 Y 形(xing)抗原特異(yi)性(xing)蛋(dan)白(bai)質，可在特定(ding)位點與(yu)抗(kang)原結合(he)。如上(shang)所(suo)述，免(mian)疫測定(ding)基於(yu)抗(kang)體(ti)-抗原結合(he)關(guan)系(xi)來(lai)檢(jian)測(ce)溶液中(zhong)的特(te)定(ding)分子。       

科學研究中(zhong)使用的不(bu)同(tong)類型(xing)的來(lai)進行(xing)免(mian)疫測定(ding)。

當(dang)前(qian)的(de)免(mian)疫測定(ding)方(fang)法(fa)主(zhu)要(yao)有以(yi)下(xia)幾種：

1.放射免(mian)疫分析 (RIA)

放射免(mian)疫測定(ding)法(fa)使用抗體(ti)來(lai)量化(hua)生物(wu)樣(yang)品(pin)中(zhong)存(cun)在的抗(kang)原量。這(zhe)種檢(jian)測(ce)非(fei)常(chang)靈(ling)敏和(he)特異，因此(ci)它可(ke)以(yi)檢(jian)測(ce)到樣(yang)品(pin)中(zhong)低(di)至幾個(ge)象(xiang)形(xing)圖的抗(kang)原。RIA 的基本原則是競爭性(xing)約(yue)束。在該(gai)方(fang)法(fa)中(zhong)，目(mu)標(biao)抗(kang)原使用放射性(xing)同(tong)位素標記(ji)並與(yu)其(qi)特(te)異(yi)性(xing)抗(kang)體(ti)結合。

放射性(xing)抗(kang)原與(yu)非(fei)放射性(xing)抗(kang)原（來(lai)自血清(qing)樣(yang)品(pin)）競(jing)爭固定(ding)數(shu)量(liang)的(de)受(shou)體(ti)結合位點或抗(kang)體(ti)。抗體(ti)的競爭導致壹定(ding)數(shu)量(liang)的(de)標(biao)記(ji)抗原的釋放，因此(ci)它與(yu)標(biao)記(ji)抗原與(yu)未(wei)標記(ji)抗原的比(bi)例(li)成(cheng)正(zheng)比(bi)。

在增加(jia)未標(biao)記(ji)抗原的濃(nong)度(du)時，它們取(qu)代(dai)結合(he)的標記(ji)抗原。隨後(hou)，將(jiang)結合的(de)抗原與(yu)未(wei)結合的抗(kang)原分離(li)，並測量殘留在上(shang)清(qing)液中(zhong)的遊(you)離(li)抗(kang)原的放射性(xing)。RIA 方(fang)法(fa)的(de)主(zhu)要(yao)優點是以(yi)*的(de)精度(du)和靈(ling)敏度(du)測量分析物(wu)。

2.酶(mei)免(mian)疫分析 (EIA)

盡(jin)管(guan)酶(mei)免(mian)疫分析 (EIA) 的(de)主(zhu)要原理(li)與(yu) RIA 相(xiang)似，但它使用酶(mei)作為標記(ji)，而(er)不是放射性(xing)同(tong)位素。在該(gai)測(ce)定(ding)中(zhong)，酶(mei)分子通(tong)過(guo)合適(shi)的反(fan)應(ying)偶聯(lian)到(dao)免(mian)疫分析試(shi)劑(ji)中，隨後(hou)進行(xing)正(zheng)常(chang)的(de)免(mian)疫測定(ding)程(cheng)序(xu)。

結(jie)合和遊(you)離(li)部(bu)分分離(li)後(hou)，通(tong)過(guo)添(tian)加(jia)底物(wu)測(ce)定(ding)酶(mei)活(huo)性(xing)。由於酶(mei)促(cu)反(fan)應(ying)，形(xing)成(cheng)有色(se)產(chan)物，使用分光(guang)光(guang)度(du)計(ji)對(dui)其(qi)進行(xing)測量。測量的信號(hao)或產(chan)品(pin)顏(yan)色的強度(du)類似於(yu)分析物(wu)的(de)濃度(du)。

3.熒光(guang)免(mian)疫分析 (FIA)

熒(ying)光(guang)免(mian)疫分析也(ye)與(yu)RIA的(de)工作原理(li)類(lei)似(si)，只是標記(ji)的是熒光(guang)團(tuan)而(er)不是放射性(xing)同(tong)位素。FIA 分為異質和均(jun)質測定(ding)，這(zhe)取(qu)決(jue)於是否需(xu)要分離(li)步驟。這(zhe)些(xie)測(ce)定(ding)可(ke)以(yi)以(yi)競(jing)爭性(xing)或非(fei)競(jing)爭性(xing)形(xing)式(shi)進行(xing)。

異構(gou)競(jing)爭FIA方(fang)法(fa)用(yong)於(yu)測(ce)定(ding)生(sheng)物(wu)樣(yang)品(pin)中(zhong)的藥物，例(li)如氨(an)基糖(tang)苷類抗生素(su)、尿(niao)液中(zhong)的苯甲酰愛康寧、人血(xue)清(qing)中的(de)甲狀(zhuang)腺素(su)等。 

在抗體(ti)結合導(dao)致標記(ji)分析物(wu)的(de)熒光(guang)特(te)性(xing)發生某些(xie)變化(hua)的情(qing)況下，使用均(jun)相競(jing)爭 FIA 方(fang)法(fa)。該(gai)方(fang)法(fa)還(hai)用(yong)於(yu)直接從反應(ying)混(hun)合(he)物(wu)中(zhong)監(jian)測分析物(wu)的(de)濃度(du)。

4.化(hua)學發光(guang)免(mian)疫分析 (CLIA)

化(hua)學發光(guang)免(mian)疫分析是以(yi)化(hua)學發光(guang)物(wu)質作為標記(ji)物。通(tong)常(chang)，發光(guang)是電子從激發態(tai)躍遷(qian)到基態(tai)時發出的可見(jian)光(guang)或近(jin)可(ke)見光(guang)輻(fu)射。該(gai)技(ji)術因(yin)其(qi)檢(jian)測(ce)限低(di)、性(xing)能(neng)高(gao)和(he)特(te)異性(xing)好(hao)而(er)越(yue)來(lai)越(yue)多地(di)用(yong)於藥物分析。

5.脂(zhi)質體(ti)免(mian)疫分析 (LIA)

該(gai)免(mian)疫測定(ding)使用脂質體(ti)封裝標(biao)記(ji)物。脂(zhi)質體(ti)用於 LIA，與(yu)分析物(wu)或抗(kang)體(ti)偶聯(lian)，然後(hou)進行(xing)正(zheng)常(chang)的(de)免(mian)疫測定(ding)過(guo)程(cheng)。LIA 的(de)檢(jian)測(ce)取決(jue)於釋放封裝(zhuang)標(biao)記(ji)物的(de)脂(zhi)質體(ti)的裂解(jie)。這些(xie)測(ce)量(liang)的標記(ji)與(yu)分析物(wu)的(de)濃度(du)相關。 

6.毛細管(guan)電泳免(mian)疫分析 (CEIA)

毛細管(guan)電泳免(mian)疫分析是壹種相對較(jiao)新(xin)的技(ji)術，用(yong)於(yu)靈(ling)敏檢(jian)測(ce)分析物(wu)。該(gai)技(ji)術基於(yu)毛細管(guan)電泳分離(li)和(he)異(yi)質免(mian)疫分析原理(li)的(de)結(jie)合。

CEIA 涉及(ji)抗體(ti)與(yu)作為固相(xiang)免(mian)疫反應(ying)器的(de)微(wei)毛細管(guan)的修(xiu)飾內表面(mian)的共(gong)價(jia)結(jie)合(he)。分析物(wu)的(de)檢(jian)測(ce)基於(yu)免(mian)疫測定(ding)。這(zhe)種方(fang)法(fa)非(fei)常(chang)靈(ling)敏，能(neng)夠檢(jian)測(ce)皮(pi)摩(mo)爾(er)水(shui)平(ping)的分析物(wu)。

蘇州(zhou)阿爾(er)法(fa)生(sheng)物(wu)13年(nian)專(zhuan)註於生物(wu)實驗(yan)室(shi)儀器設備與(yu)實驗(yan)室(shi)試劑(ji)耗(hao)材的專業供應(ying)，實驗(yan)室(shi)儀器中(zhong)所(suo)供應(ying)的生物(wu)反(fan)應(ying)器常(chang)用(yong)於(yu)MDCK 細胞(bao) 、  HEK293細胞(bao)培養(yang), CHO懸浮(fu)細胞(bao)培養(yang)、貼壁(bi)細(xi)胞(bao)培養(yang)、微(wei)載體(ti)培養(yang)、微(wei)生物(wu)培養(yang)、生(sheng)物制(zhi)藥等，同(tong)時我(wo)們還(hai)提供(gong)細(xi)胞(bao)培養(yang)基、血(xue)清(qing)、培養(yang)添(tian)加(jia)劑、免(mian)疫檢(jian)測(ce)試劑(ji)盒(he)、細胞(bao)培養(yang)瓶(ping)、培養(yang)皿、搖(yao)瓶(ping)等  細(xi)胞(bao)培養(yang) 類(lei)的試劑(ji)耗材 。如需了(le)解(jie)更(geng)多 免(mian)疫測定(ding) 的(de)原理(li)及(ji)免(mian)疫測定(ding)方(fang)法(fa)相(xiang)關(guan)問(wen)題(ti)，請搜索(suo)進入(ru)蘇州(zhou)阿爾(er)法(fa)生(sheng)物(wu)進行(xing)咨詢。