怎樣(yang)正(zheng)確選擇(ze)細(xi)胞培養(yang)試劑？

細(xi)胞培養(yang)是生(sheng)命(ming)科(ke)學實(shi)驗的基(ji)礎實(shi)驗，做(zuo)過細胞培養(yang)的小(xiao)夥伴都(dou)知(zhi)道(dao)培養(yang)過程中(zhong)的常(chang)用到(dao)的生物試劑的作用(yong)嗎(ma)？小(xiao)編大(da)概歸(gui)納了(le)壹下在(zai)細胞培養(yang)過程中(zhong)常(chang)見試劑的作用(yong)，以便(bian)更(geng)好(hao)地了(le)解(jie)細(xi)胞培養(yang)實(shi)驗。

壹、了(le)解(jie)培養(yang)基(ji)

雖然(ran)細(xi)胞系培養(yang)沒(mei)有固定(ding)的培養(yang)基(ji)，但(dan)針(zhen)對不(bu)同(tong)特(te)性的細胞所(suo)選擇(ze)的培養(yang)基(ji)也(ye)會(hui)有所(suo)不(bu)相(xiang)同(tong)，比(bi)如(ru)貼(tie)壁(bi)培養(yang)選擇(ze)MEM培養(yang)基(ji)會(hui)具(ju)有較好(hao)的貼壁(bi)效果(guo)；懸浮細(xi)胞壹般(ban)采用(yong)RPMI-1640培養(yang)基(ji)生長(chang)狀(zhuang)態旺盛(sheng)；無(wu)血(xue)清培養(yang)的細胞壹般(ban)會(hui)選擇(ze)AIM V （12005）或(huo)SFM培養(yang)基(ji)。

根(gen)據(ju)細胞特(te)性在(zai)培養(yang)基(ji)生產過程中(zhong)常(chang)會(hui)添(tian)加(jia)壹些(xie)特(te)殊成分(fen)： 

1.  L-谷氨(an)酰(xian)胺

 L-谷氨(an)酰(xian)胺在(zai)細胞培養(yang)過程中(zhong)主要(yao)為(wei)細胞提供(gong)能量來源，並且(qie)會(hui)參(can)與到(dao)細胞的核(he)酸(suan)代(dai)謝及蛋白(bai)質合成(cheng)，它的缺陷在(zai)於降解(jie)時(shi)會(hui)釋放(fang)氨(an)基(ji)，對細胞會(hui)造(zao)成(cheng)壹(yi)定(ding)的毒性傷(shang)害(hai)。所(suo)以(yi)壹(yi)些(xie)致敏(min)細胞培養(yang)時(shi)需(xu)要(yao)註(zhu)意谷氨(an)酸(suan)鈉及(ji)氨(an)成(cheng)分(fen)的含量(liang)。

2. GlutaMAX-Ⅰ

GlutaMAX-I 二肽(tai)屬於谷氨(an)酰(xian)胺的衍生品(pin)，其作用機(ji)理(li)基(ji)本上(shang)與(yu)L-谷氨(an)酰(xian)胺相壹(yi)致，不(bu)同(tong)的是GlutaMAX-I 的結(jie)構比(bi)較穩(wen)定(ding)，降解(jie)度低(di)，所(suo)以(yi)釋放(fang)的氨(an)基(ji)毒性物質也(ye)較少，適用於無毒(du)性的供應(ying)能量需求。

 3.酚(fen)紅(hong)指示劑

酚(fen)紅(hong)作(zuo)為(wei)壹種(zhong)化(hua)學指示劑，常(chang)用被於酸(suan)堿度PH 值(zhi)的辨識(shi)。它在(zai)酸(suan)性環(huan)境(jing)下呈現(xian)顯(xian)色(se)為(wei)黃(huang)色(se)，中(zhong)型溶液(ye)時呈現(xian)紅(hong)色(se)，偏(pian)堿(jian)性環(huan)境(jing)時顯(xian)示(shi)顏(yan)色(se)為(wei)紫色(se)。正常(chang)情況(kuang)下，酚(fen)紅(hong)作(zuo)為(wei)指示劑，在(zai)細胞培養(yang)過程中(zhong)壹般(ban)不(bu)與(yu)培養(yang)物發生反應(ying)，但(dan)是對於哺(bu)乳(ru)動(dong)物動(dong)物細胞培養(yang)時(shi)，會(hui)起(qi)到(dao)類(lei)固(gu)醇激素(su)的細胞反應(ying)，並且(qie)在(zai)細胞檢測(ce)時(shi)也(ye)會(hui)對檢測(ce)數據(ju)起(qi)到(dao)幹擾(rao)作(zuo)用(yong)。因(yin)此，壹(yi)般(ban)在(zai)培養(yang)哺(bu)乳(ru)動(dong)物和(he)打算做(zuo)流(liu)式(shi)細(xi)胞檢測(ce)時(shi)壹(yi)般(ban)不(bu)用(yong)含酚(fen)紅(hong)的培養(yang)基(ji)。

二．細胞培養(yang)、檢(jian)測(ce)過程中(zhong)的試劑

1.臺盼藍(lan)染(ran)色(se)與活(huo)細胞計數

普通(tong)細胞計數的方法(fa)將細胞懸浮液(ye)用無(wu)血(xue)清培養(yang)基(ji)稀(xi)釋後(hou)，加(jia)入(ru)壹(yi)定(ding)比(bi)例(li)的臺盼蘭(lan)染色(se)液，輕(qing)搖(yao)混(hun)勻(yun)後(hou)，用血(xue)球計數板(ban)/細胞計數板(ban)中(zhong)進行人工或機器(qi)計(ji)數操(cao)作(zuo)。其中(zhong)未(wei)染色(se)的細胞為(wei)活細(xi)胞，染為(wei)藍(lan)色(se)的細胞為(wei)死細(xi)胞。

2.抗生素(su)的使用(yong)

為(wei)防(fang)止(zhi)下的培養(yang)汙(wu)染(ran)在(zai)有些(xie)細胞培養(yang)過程中(zhong)也(ye)會(hui)適量添(tian)加(jia)抗生素(su)或(huo)康黴菌(jun)素(su)，由於這些(xie)添加(jia)劑雖能起(qi)到(dao)抑(yi)菌(jun)作用(yong)但(dan)會(hui)影(ying)響(xiang)到細胞的正常(chang)生長(chang)和(he)傳代(dai)，甚至出現毒(du)殺細胞的作用(yong)。所(suo)以(yi)，添(tian)加(jia)時壹(yi)定(ding)要(yao)進行細胞毒性測(ce)試並註(zhu)意使用濃度。

3.丙酮(tong)酸(suan)鈉的添加(jia)

丙酮(tong)酸(suan)鈉在(zai)細胞培養(yang)過程中(zhong)壹般(ban)會(hui)作(zuo)為(wei)葡(pu)萄(tao)糖(tang)的替代(dai)品(pin)為(wei)細胞生長(chang)提(ti)供(gong)充(chong)足(zu)的碳(tan)源，可(ke)根(gen)據(ju)細胞生長(chang)狀(zhuang)況(kuang)添加(jia)，有的也(ye)會(hui)配(pei)備好(hao)添(tian)加(jia)在(zai)培養(yang)基(ji)中(zhong)。

4.平衡鹽(yan)溶液(ye)、緩(huan)沖(chong)液的使用(yong)

細胞培養(yang)中(zhong)常(chang)見的平衡鹽(yan)主要(yao)有HBS、EBS和(he)Eagles液(ye)。

不(bu)同(tong)緩(huan)沖(chong)液的碳(tan)酸(suan)氫鈉(na)的水平也(ye)不(bu)壹(yi)致(zhi)，並且(qie)緩(huan)沖(chong)液的PH也(ye)會(hui)根(gen)據(ju)培養(yang)產物及培養(yang)溫(wen)度的不(bu)同(tong)而產生相應的變化(hua)，可(ke)根(gen)據(ju)實(shi)際(ji)情(qing)況(kuang)選擇(ze)使(shi)用(yong)。

5.培養(yang)血(xue)清的選擇(ze)

細(xi)胞的培養(yang)與(yu)血(xue)清的選擇(ze)也(ye)具(ju)有較大(da)關系。壹(yi)般(ban)胎牛(niu)血(xue)清由於成本(ben)昂(ang)貴壹般(ban)被用(yong)於對生長(chang)環(huan)境(jing)挑剔(ti)的難以(yi)生長(chang)的細胞，比(bi)如(ru)幹(gan)細胞、神經(jing)細(xi)胞等。普通(tong)的肌細(xi)胞、白細(xi)胞等選擇(ze)普通(tong)的新生(sheng)牛(niu)血(xue)清即(ji)可(ke)。

蘇州阿爾法(fa)生(sheng)物13年專註(zhu)於生物實(shi)驗室儀器(qi)設(she)備與(yu)實(shi)驗室試劑耗材的專業(ye)供應(ying)，實(shi)驗室儀器(qi)中(zhong)所(suo)供(gong)應(ying)的生物反應器(qi)常(chang)用於MDCK細胞、 HEK293細胞培養(yang),懸浮細(xi)胞培養(yang)、貼(tie)壁(bi)細胞培養(yang)、微載(zai)體培養(yang)、微生(sheng)物培養(yang)、生(sheng)物制(zhi)藥(yao)等，同(tong)時我們(men)還提(ti)供細胞培養(yang)基(ji)、血(xue)清、培養(yang)添(tian)加(jia)劑、細胞培養(yang)瓶(ping)、培養(yang)皿(min)、搖(yao)瓶(ping)等細(xi)胞培養(yang)類(lei)的試劑耗材 。