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BCA蛋(dan)白(bai)定(ding)量(liang)與(yu)Bradford蛋(dan)白(bai)定(ding)量(liang)的區別(bie)是什(shen)麽(me)
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目(mu)前(qian)實(shi)驗(yan)室裏(li)常用的蛋(dan)白(bai)定(ding)量(liang)的方(fang)法通(tong)常主(zhu)要(yao)有(you)三(san)種(zhong): BCA蛋(dan)白(bai)定(ding)量(liang)、Bradford蛋(dan)白(bai)定(ding)量(liang)法和(he)紫外分(fen)光(guang)法。
BCA 蛋(dan)白(bai)定(ding)量(liang) 的實(shi)驗(yan)原(yuan)理(li)是在(zai)堿(jian)性(xing)條(tiao)件下(xia),H | NH2----C-COOH | R 將(jiang)Cu²+還原(yuan)為(wei)CU+與(yu) BCA 結(jie)晶為紫色(se)的化(hua)合物,再通(tong)過測(ce)定(ding) 562 nm波(bo)長OD值來判定(ding)還原(yuan)劑的含量(liang)。
下(xia)列(lie)表(biao)分別(bie)對兩(liang)種(zhong)實(shi)驗(yan)方(fang)法做以對(dui)比:

通(tong)過上(shang)表(biao)中的的對(dui)比,我們不難看出Bradford實驗法的速(su)度(du)比較(jiao)快(kuai),平(ping)常BCA 蛋(dan)白(bai)定(ding)量(liang) 的孵育時間(jian)大(da)約(yue)30分鐘(zhong)甚至(zhi)更(geng)長,而(er)采(cai)用Bradford蛋(dan)白(bai)定(ding)量(liang)法則(ze)需要幾(ji)分(fen)鐘(zhong)即可(ke)完成(cheng)實(shi)驗。
雖然其標(biao)準曲線的線(xian)性(xing)擬合程度(du)不如(ru)BCA定(ding)量(liang)法,但它(ta)的二(er)項(xiang)式(shi)契合度卻(que)較(jiao)高。
(下(xia)圖(tu)顯示(shi)為(wei):二(er)項(xiang)式的標(biao)準曲線制(zhi)作(zuo)方(fang)法)


除(chu)此之(zhi)外,Bradford 蛋(dan)白(bai)定(ding)量(liang)還有(you)壹(yi)個(ge)小(xiao)小的缺(que)陷(xian),那(na)就是它(ta)比較(jiao)容易(yi)受高濃(nong)度(du)的去垢(gou)劑影(ying)響,比如(ru)需要SDS的實(shi)驗(yan)濃(nong)度低於(yu)0.01%,TRITON X-100的實(shi)驗(yan)濃(nong)度低於(yu)0.005%等(deng)。
解(jie)決的辦(ban)法是:使用與(yu)Bradford 兼(jian)容的去垢(gou)劑,從(cong)而(er)匹(pi)配(pei)到相(xiang)應(ying)的實(shi)驗(yan)濃(nong)度即可(ke)。
Bradford蛋(dan)白(bai)定(ding)量(liang)實(shi)驗(yan)雖然實(shi)驗(yan)在(zai)制(zhi)作(zuo)二(er)項式標(biao)線和(he)公式(shi)計(ji)算(suan)較繁(fan)瑣(suo),但如(ru)果(guo)能(neng)成功破解以上(shang)三(san)個問(wen)題,那(na)麽(me)Bradford法對(dui)比BCA法來說(shuo)還是有(you)不少優(you)勢的,比如(ru)可以節(jie)省(sheng)很(hen)多(duo)時間等(deng)。對(dui)於(yu)追(zhui)求實(shi)驗(yan)效(xiao)率的實(shi)驗(yan)員(yuan)來說(shuo),熟練掌(zhang)握(wo)Bradford實驗(yan)法是個(ge)不錯的選(xuan)擇。
以上(shang)是對(dui)蛋(dan)白(bai)定(ding)量(liang)的兩(liang)種(zhong)方(fang)法做以簡(jian)要(yao)對比,蘇州阿(e)爾法生(sheng)物 蘇州阿(e)爾法生(sheng)物13年(nian)的生(sheng)物儀器(qi)設備與(yu)耗(hao)材的行業(ye)經驗,主(zhu)要(yao)經營(ying)凝(ning)膠成像(xiang) , 微(wei)量(liang)天(tian)平(ping)、 Pcr 檢測(ce)儀、離(li)心(xin)機(ji)、混(hun)勻儀、振蕩培(pei)養箱(xiang)、二氧(yang)化碳(tan)振蕩培(pei)養箱(xiang)、 微孔板(ban)振蕩器(qi)、二氧化(hua)碳(tan)培(pei)養箱(xiang)、微生(sheng)物發酵罐(guan)。還可以關註更(geng)多阿爾法生(sheng)物其他產品如(ru):蛋(dan)白(bai)定(ding)量(liang)試(shi)劑、滲透壓儀、電(dian)子(zi)天(tian)平(ping)、搖床、排(pai)槍(qiang)移液(ye)器(qi)、旋(xuan)渦(wo)混(hun)合儀、切(qie)膠儀、純(chun)水(shui)機(ji)、電(dian)泳(yong)儀、溶(rong)劑過濾器(qi)、真空泵(beng)、超(chao)低(di)溫(wen)冰箱(xiang)、離(li)心(xin)管、實(shi)驗(yan)室試劑盒、幹細(xi)胞(bao)培(pei)養 等(deng)系(xi)列產(chan)品。部(bu)分(fen)儀器(qi)可以免費(fei)試(shi)用, 瑞寧移液(ye)器(qi) 類目(mu)可(ke)免費(fei)校(xiao)準(zhun),免費(fei)出具 CNAS 報(bao)告。
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