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為(wei)什(shen)麽要(yao)優化(hua)抗體的(de)表(biao)達滴(di)度?
更(geng)新時間(jian):2022-04-12
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標(biao)簽:細胞(bao)系(xi) 抗體滴度 抗(kang)體藥(yao)物(wu)
細胞(bao)系(xi)的(de)表(biao)達滴(di)度與(yu)產品的(de)產量與(yu)生產成本息(xi)息(xi)相關,實踐證(zheng)明提(ti)高瞬(shun)時轉染(ran)HEK293細(xi)胞(bao)系(xi)和(he)CHO細胞(bao)系(xi)的(de)表(biao)達滴(di)度可(ke)以提(ti)高抗(kang)體產量,有效降低生產成本。
穩(wen)定(ding)細(xi)胞系(xi)中的(de)細(xi)胞(bao)表(biao)達滴(di)度
穩(wen)定(ding)生產細胞(bao)系(xi)生產過程中,在(zai)可重復性和(he)可放(fang)大(da)性等(deng)多方(fang)面都(dou)具(ju)有許(xu)多優勢。細(xi)胞的(de)培養(yang)參數對(dui)細胞(bao)系(xi)的(de)培育也(ye)具(ju)有較大(da)的(de)影(ying)響(xiang)力(li)。比(bi)如:溫(wen)度、pH、滲(shen)透壓、氣體流速、罐內壓力(li)、攪拌(ban)罐內(nei)的(de)攪拌(ban)槳類型、攪拌(ban)速度和(he)細胞(bao)代(dai)謝物(wu)水平(ping)等(deng)。另外(wai),在(zai)生物(wu)工藝(yi)技術(shu)中,細(xi)胞(bao)的(de)密(mi)度、細(xi)胞活(huo)性、線(xian)粒(li)體活(huo)性、LDH、NADH水平(ping)等(deng)生物(wu)因(yin)素,也(ye)會(hui)影(ying)響(xiang)到(dao)蛋(dan)白質合成、PTM等(deng)從而波(bo)及(ji)到產物(wu)的(de)產量及品(pin)質。
所(suo)以(yi),優化(hua)細胞系(xi)的(de)表(biao)達滴(di)度,除了對(dui)宿(xiu)主細胞系(xi)進行設計(ji)改(gai)造(zao)外,細胞的(de)培養(yang)參數優化(hua)設計(ji),對於提(ti)升細(xi)胞(bao)表(biao)達滴(di)度、滿足(zu)產品質量要求也(ye)很重要(yao)。
我(wo)們知道(dao),在(zai)抗體產品的(de)產量是通(tong)過工藝(yi)放大(da)來(lai)實現,而生物(wu)工藝(yi)放大(da)過程中又(you)會(hui)受(shou)到很多(duo)因(yin)素的(de)影(ying)響(xiang)。比(bi)如生物(wu)因(yin)素和(he)細胞(bao)培養(yang)參數等(deng),生物(wu)反應(ying)器(qi)容(rong)量體積等(deng)。所(suo)以(yi)在(zai)放大(da)工藝(yi)生產中的(de)各(ge)個(ge)環節(jie),都(dou)需要嚴(yan)格(ge)把控(kong),此外(wai)還需要進(jin)壹(yi)步(bu)強(qiang)化(hua)技術(shu)培訓指(zhi)導,是工藝(yi)生產操作(zuo)規(gui)範(fan)化(hua)、標(biao)準(zhun)化(hua),從而確保細(xi)胞(bao)的(de)生產力(li)與(yu)產品質量的(de)有效提(ti)升。
瞬(shun)時轉染(ran)細(xi)胞(bao)系(xi)中的(de)細(xi)胞(bao)表(biao)達滴(di)度
瞬(shun)時轉染(ran)細(xi)胞(bao)由於此類(lei)細胞(bao)構建(jian)生產細胞(bao)系(xi)比(bi)較耗(hao)時,而(er)且(qie)難(nan)度也(ye)較(jiao)大(da),故很少(shao)用於臨(lin)床(chuang)或者(zhe)商業(ye)規(gui)模(mo)化(hua)生產,比(bi)較適用於實驗室(shi)小(xiao)規(gui)模(mo)試驗。在(zai)穩定(ding)生產細胞(bao)系(xi)進行規(gui)模(mo)化(hua)工藝(yi)放大(da)生產時,有時也(ye)會(hui)使(shi)用瞬(shun)時轉染(ran)細(xi)胞(bao)放(fang)大(da)到(dao)批次或補(bu)料分(fen)批生物(wu)反應(ying)器(qi)工藝(yi)中,以(yi)快速提(ti)升產品產量加速生產過程。 目(mu)前(qian),壹(yi)些(xie)細胞生產廠商(shang)也(ye)在(zai)嘗(chang)試提(ti)高瞬(shun)時轉染(ran)HEK293細(xi)胞(bao)的(de)滴(di)度。比(bi)如:這(zhe)種工藝(yi)技術(shu)用於蛋(dan)白質生產的(de)轉染(ran)工藝(yi)和(he)哺(bu)乳(ru)動(dong)物(wu)表(biao)達載(zai)體進行優化(hua),可使重組(zu)抗(kang)體的(de)單(dan)位(wei)體積產量達到(dao)>0.5g/L。 國內(nei)細(xi)胞生產商開(kai)發(fa)的(de)CHO細(xi)胞(bao)高(gao)滴(di)度瞬(shun)轉表(biao)達系(xi)統(tong)具(ju)有高產量低成本等(deng)優勢,已(yi)成為生產抗體類藥(yao)物(wu)廣(guang)泛應(ying)用的(de)工程細(xi)胞,而(er)CHO細(xi)胞(bao)瞬(shun)時轉染(ran)是(shi)新(xin)藥(yao)研(yan)發(fa)過程中的(de)重要(yao)技(ji)術(shu)工藝(yi)。
從長(chang)遠(yuan)看(kan)來(lai),提(ti)高瞬(shun)時轉染(ran)HEK293細(xi)胞(bao)的(de)表(biao)達滴(di)度在(zai)基因(yin)治(zhi)療領(ling)域也(ye)很有意(yi)義。瞬(shun)時轉染(ran)是(shi)雖(sui)是(shi)產生高質量載(zai)體的(de)常用方(fang)法,但(dan)規(gui)模(mo)化(hua)放(fang)大(da)生產仍然(ran)是(shi)基因(yin)制藥(yao)行業(ye)的(de)壹(yi)個(ge)重大(da)挑戰(zhan)。要想(xiang)取得(de)重大(da)突破還需要更(geng)多(duo)的(de)努力(li)。
蘇(su)州(zhou)阿(e)爾法生物(wu)13 年專(zhuan)註(zhu)於(yu)生物(wu)實驗室(shi)儀(yi)器設備與(yu)實驗室(shi)試劑耗(hao)材的(de)專(zhuan)業(ye)供應(ying),實驗室(shi)儀(yi)器中所(suo)供應(ying)的(de)生物(wu)反應(ying)器(qi)常用於MDCK 細(xi)胞(bao) 、 HEK293細胞培養(yang), CHO懸浮(fu)細(xi)胞培養(yang)、貼壁細胞培養(yang)、微(wei)載(zai)體培養(yang)、微(wei)生物(wu)培養(yang)、生物(wu)制藥(yao)等(deng),同(tong)時(shi)我們還提(ti)供細(xi)胞培養(yang)基、血清(qing)、培養(yang)添加劑、細胞培養(yang)瓶(ping)、培養(yang)皿、搖(yao)瓶(ping)等(deng) 細胞培養(yang) 類的(de)試劑耗(hao)材 。
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