HeLa細胞(bao)培養(yang)基 TCH-G193 由(you)Cas9X海(hai)星(xing)生物技術團(tuan)隊(dui)精(jing)心優化，可(ke)保(bao)持(chi)HeLa細胞(bao)理想(xiang)的(de)生長狀(zhuang)態(tai)。本產品已包含(han)HeLa細胞(bao)生長的(de)各種(zhong)成(cheng)分，無(wu)需額外添(tian)加，可直(zhi)接用(yong)於(yu)HeLa細胞(bao)的(de)體(ti)外培養(yang)。

產品(pin)名稱：HeLa細胞(bao)專用(yong)培養(yang)基

產品(pin)貨號：TCH-G193

培養(yang)體(ti)系：MEM+10%FBS+1%P/S

產品規(gui)格(ge)：500mL / 200mL / 125mL

產(chan)品形(xing)態(tai)：液(ye)體(ti)

生物安全檢(jian)測：細菌(jun)、真(zhen)菌、支原(yuan)體(ti)檢測陰性

內毒素(su)含量：＜10 EU/mL

儲存條件：2-8℃，避(bi)光儲存

運(yun)輸(shu)條件：冰袋(dai)冷(leng)藏運(yun)輸(shu)

有效(xiao)期(qi)：3 months

這種(zhong)培養(yang)基 TCH-G193 由(you)Cas9X海(hai)星(xing)生物技術團(tuan)隊(dui)精(jing)心優化，可(ke)保(bao)持(chi)HeLa細胞(bao)理想(xiang)的(de)生長狀(zhuang)態(tai)。本產品已包含(han)HeLa細胞(bao)生長的(de)各種(zhong)成(cheng)分，無(wu)需額外添(tian)加，可直(zhi)接用(yong)於(yu)HeLa細胞(bao)的(de)體(ti)外培養(yang)。

註意(yi)事項

(1) 本產品含有血清(qing)和(he)雙(shuang)抗(kang)，如無(wu)特別(bie)需(xu)要不(bu)用(yong)額外再(zai)添加(jia)血清(qing)和(he)雙(shuang)抗(kang)，可以直(zhi)接使(shi)用(yong)。

(2) 使(shi)用(yong)前請(qing)將產(chan)品提(ti)前(qian)置於(yu)室溫(wen)或(huo)37°C充(chong)分預(yu)熱(re)。

(3) 使(shi)用(yong)產品(pin)時應(ying)註(zhu)意(yi)無(wu)菌操作，避(bi)免(mian)汙(wu)染。

(4) 使(shi)用(yong)產品(pin)時請(qing)做(zuo)好(hao)個人防護。

(5) 為(wei)保(bao)持(chi)本產品的(de)最佳(jia)使(shi)用(yong)效(xiao)果(guo)，不宜(yi)將其(qi)長時間(jian)放(fang)置於(yu)室溫(wen)或(huo)較高的(de)溫(wen)度(du)環(huan)境(jing)中。

(6) 所(suo)有產品(pin)請(qing)於(yu)保(bao)質期(qi)內使(shi)用(yong)，超出保(bao)質期(qi)，請(qing)放(fang)棄(qi)使(shi)用(yong)。

HeLa細胞(bao)復蘇及傳代培養(yang)簡要實(shi)驗(yan)步驟(zhou)如下：

細胞(bao)培養(yang)試劑：DMEM培養(yang)基，胎(tai)牛(niu)血清(qing)，青(qing)黴(mei)素，鏈(lian)黴(mei)素，0.25%胰蛋(dan)白(bai)酶(mei)（含(han)0.02%的(de)EDTA），PBS等

細胞(bao)培養(yang)耗材：T25細胞(bao)培養(yang)瓶、移液(ye)槍(qiang)吸(xi)頭、50ml離心管(guan)、15ml離(li)心(xin)管、細胞(bao)計數板。

實(shi)驗(yan)室儀(yi)器設(she)備(bei):二氧化(hua)碳(tan)振(zhen)蕩培養(yang)箱、 光學顯微(wei)鏡、瑞(rui)寧(ning)移液(ye)器、 超凈臺(tai)、 恒(heng)溫(wen)水(shui)浴鍋(guo)、酒(jiu)精燈(deng)，-80冰箱(xiang)，液(ye)氮罐(guan)，低溫(wen)冷(leng)凍(dong)存儲箱(xiang)。

HeLa細胞(bao)復蘇步(bu)驟：

凍(dong)存液(ye)： 含(han)10%血清(qing)的(de)培養(yang)基和5％-10% DMSO

取對數生長期(qi)細胞(bao)， 精胰酶(mei)消化後(hou)加(jia)入適量凍(dong)存液(ye)，用(yong)吸管(guan)吹打(da)制(zhi)成(cheng) 細胞(bao)懸(xuan)液(ye)（1×106 ~5×106細胞(bao)/ml），加入1ml細胞(bao)於(yu)凍(dong)存管(guan)中(zhong)，密封後標記(ji)細胞(bao)名稱和(he)冷(leng)凍(dong)日期(qi)。

復蘇細胞(bao)是從零(ling)下80℃冰箱(xiang)或(huo)液(ye)氮罐(guan)中取出凍(dong)存管(guan)，迅(xun)速投(tou)入(ru)37℃水(shui)浴中(zhong)，使(shi)其(qi)融化（1分鐘左(zuo)右(you)），用(yong)培養(yang)集緩(huan)慢(man)稀釋(shi)至原(yuan)體(ti)積的(de)10倍(bei)以上，大部分細胞(bao)貼壁後(hou)（4~6小(xiao)時(shi)），吸(xi)取含有凍(dong)存液(ye)的(de)培養(yang)基，並換(huan)成(cheng)完培。

HeLa細胞(bao)復蘇實(shi)驗(yan)步驟(zhou)：

1. 從零(ling)下80℃冰箱(xiang)或(huo)者(zhe)液(ye)氮罐(guan)中取出冷(leng)凍(dong)管，迅(xun)速投(tou)入(ru)37℃水(shui)浴中(zhong)，使(shi)其(qi)融化（1分鐘左(zuo)右(you)）。

2．培養(yang)基緩(huan)慢(man)稀釋(shi)至原(yuan)體(ti)積的(de)10倍(bei)以上。

3.低速離(li)心(xin)10分鐘，吸(xi)去上清(qing)，加(jia)入新鮮(xian)的(de)培養(yang)基培養(yang)剛復蘇的(de)細胞(bao)。

HeLa細胞(bao)傳代實(shi)驗(yan)步驟(zhou)：

取密度80％左(zuo)右(you)的(de)Hela細胞(bao)，吸去舊(jiu)的(de)培養(yang)基，用(yong)PBS或(huo)者(zhe)Trypsin消化液(ye)潤洗細胞(bao)以減(jian)少(shao)殘(can)留(liu)的(de)血清(qing)對(dui)Trypsin的(de)抑制(zhi)作用(yong)。

吸去PBS或(huo)者(zhe)Trypsin，加入Trypsin消化液(ye)，於(yu)37℃消化2～4分鐘，於(yu)倒(dao)置顯(xian)微(wei)鏡下觀察(cha)，當(dang)細胞(bao)之間(jian)出(chu)現(xian)間(jian)時(shi)或(huo)者(zhe)變圓(yuan)時，吸掉(diao)Trypsin消化液(ye)。   加(jia)入適量HeLa細胞(bao)培養(yang)基 ，用(yong)移液(ye)器上下吹(chui)打(da)數次打(da)散(san)細胞(bao)團(tuan)塊以盡(jin)可(ke)能(neng)形(xing)成(cheng)單細胞(bao)懸(xuan)液(ye)，吹(chui)打均(jun)勻(yun)後(hou)，按(an)照(zhao)稀釋比例轉(zhuan)移至新(xin)的(de)培養(yang)瓶中，補(bu)充(chong)完培並(bing)以正常培養(yang)條件培養(yang)。