早(zao)期報道(dao)中(zhong)指(zhi)出(chu)該細胞(bao)基因(yin)組(zu)中(zhong)含(han)有腺病毒5（Ad5）基(ji)因(yin)組(zu)的(de)左(zuo)側端(duan)和(he)右側(ce)端(duan)的(de)DNA，但(dan)是現(xian)在(zai)明確(que)了(le)只(zhi)存(cun)在其左(zuo)側端(duan)的(de)DNA。經過(guo)對(dui)Ad5的(de)插(cha)入(ru)點(dian)的(de)克(ke)隆(long)測(ce)序發(fa)現(xian)，Ad5的(de)1～4344位線(xian)性(xing)核(he)苷(gan)酸(suan)整合入(ru)細胞(bao)染(ran)色體19q13.2。HEK293細胞(bao)株-人(ren)胚(pei)胎腎(shen)細胞(bao)為(wei)人(ren)類腺病毒載(zai)體擴增(zeng)的宿(xiu)主(zhu)。可(ke)表達(da)異常的玻(bo)連(lian)蛋(dan)白(bai)的細胞(bao)表面(mian)受(shou)體，由(you)整合素β1亞單(dan)位和玻(bo)連(lian)蛋(dan)白(bai)受(shou)體α-v亞單(dan)位組(zu)成。生(sheng)物(wu)安全級別(bie)為(wei)2級。

HEK293細胞(bao)株

早(zao)期報(bao)道(dao)中(zhong)指(zhi)出(chu)該細胞(bao)基因(yin)組(zu)中(zhong)含(han)有腺病毒5（Ad5）基(ji)因(yin)組(zu)的(de)左(zuo)側端(duan)和(he)右側(ce)端(duan)的(de)DNA，但(dan)是現(xian)在(zai)明確(que)了(le)只(zhi)存(cun)在其左(zuo)側端(duan)的(de)DNA。經過(guo)對(dui)Ad5的(de)插(cha)入(ru)點(dian)的(de)克(ke)隆(long)測(ce)序發(fa)現(xian)，Ad5的(de)1～4344位線(xian)性(xing)核(he)苷(gan)酸(suan)整合入(ru)細胞(bao)染(ran)色體19q13.2。HEK293細胞(bao)株-人(ren)胚(pei)胎腎(shen)細胞(bao)為(wei)人(ren)類腺病毒載(zai)體擴增(zeng)的宿(xiu)主(zhu)。可(ke)表達(da)異常的玻(bo)連(lian)蛋(dan)白(bai)的細胞(bao)表面(mian)受(shou)體，由(you)整合素β1亞單(dan)位和玻(bo)連(lian)蛋(dan)白(bai)受(shou)體α-v亞單(dan)位組(zu)成。生(sheng)物(wu)安全級別(bie)為(wei)2級。

細胞(bao)名稱：人(ren)胚(pei)腎(shen)細胞(bao)

細胞(bao)簡稱：HEK-293

產(chan)品(pin)貨號：TCH-C190

種(zhong)屬(shu)來(lai)源：人(ren)

組(zu)織(zhi)來(lai)源：胚腎(shen)

疾(ji)病特(te)征(zheng)：/

細胞(bao)形(xing)態：上皮(pi)細胞(bao)樣

生(sheng)長特(te)性(xing)：貼壁生(sheng)長

培(pei)養(yang)體系：DMEM-H+10%FBS+1%P/S

配套培(pei)養(yang)基(ji)貨(huo)號(hao)：TCH-G190

傳(chuan)代比(bi)例(li)：1:4-1:8，每2-3天(tian)換液(ye)壹(yi)次(ci)

傳(chuan)代周(zhou)期：24-48 h

培(pei)養(yang)條(tiao)件(jian)：氣(qi)相(xiang)：95%空(kong)氣+5%CO2，溫度：37℃

凍存條(tiao)件(jian)：60%基(ji)礎(chu)培(pei)養(yang)基(ji)+30%FBS+10%DMSO，液(ye)氮(dan)儲(chu)存(cun)

質(zhi)量(liang)檢(jian)測：細菌(jun)、真菌、支(zhi)原體檢測(ce)均為(wei)陰(yin)性(xing)

參考文獻(xian)：

"Xie QW, et al. Complementation analysis of mutants of nitric oxide synthase reveals that the active site requires two hemes. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 93: 4891-4896, 1996. PubMed: 8643499

Da Costa LT, et al. Converting cancer genes into killer genes. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 93: 4192-4196, 1996. PubMed: 8633039

Graham FL, et al. Characteristics of a human cell line transformed by DNA from human adenovirus type 5. J. Gen. Virol. 36: 59-72, 1977. PubMed: 886304

Graham FL, et al. Defective transforming capacity of adenovirus type 5 host-range mutants. Virology 86: 10-21, 1978. PubMed: 664220

Harrison T, et al. Host-range mutants of adenovirus type 5 defective for growth in HeLa cells. Virology 77: 319-329, 1977. PubMed: 841862

Bodary SC, McLean JW. The integrin beta 1 subunit associates with the vitronectin receptor alpha v subunit to form a novel vitronectin receptor in a human embryonic kidney cell line. J. Biol. Chem. 265: 5938-5941, 1990. PubMed: 1690718

Goodrum FD, Ornelles DA. The early region 1B 55-kilodalton oncoprotein of adenovirus relieves growth restrictions imposed on viral replication by the cell cycle. J. Virol. 71: 548-561, 1997. PubMed: 8985383"

HEK293細胞(bao)-人(ren)胚(pei)胎腎(shen)細胞(bao)使用(yong)說明書(shu)

收貨(huo)當天(tian)如(ru)何處理(li)細胞(bao)？

收到(dao)細胞(bao)後請(qing)務必(bi)仔(zai)細閱(yue)讀(du)產品(pin)資料(liao)，了(le)解細胞(bao)相關(guan)信息(xi)，如(ru)貼壁特(te)性(xing) (貼壁/懸浮/半貼(tie)壁(bi)半懸浮)、細胞(bao)形(xing)態、培(pei)養(yang)體系、傳(chuan)代比(bi)例(li)和換(huan)液頻率等(deng)。

| T25培(pei)養(yang)瓶常溫(wen)運送(song)

1. 收(shou)到細胞(bao)後，請(qing)先檢查培(pei)養(yang)瓶是否完好(hao)，培(pei)養(yang)基(ji)是否外滲(shen)、渾(hun)濁(zhuo)，並(bing)核(he)對(dui)瓶身(shen)上的(de)標(biao)簽(qian)信息(xi)、細胞(bao)數量(liang)是否與發貨清單(dan)壹(yi)致(zhi)。如(ru)有異常情況，及(ji)時(shi)與我們聯(lian)系(xi)。

註(zhu)：培(pei)養(yang)瓶內飄(piao)浮的小體積絮狀物可(ke)能(neng)是脫落的細胞(bao)，對(dui)於(yu)這種(zhong)情況，建(jian)議(yi)在細胞(bao)培(pei)養(yang)箱靜(jing)置2 h 後再觀(guan)察(cha)，如(ru)仍(reng)有細胞(bao)未貼(tie)壁，可(ke)收集(ji)培(pei)養(yang)上清離心(xin)後再接(jie)種(zhong)到原瓶或新(xin)的(de)培(pei)養(yang)容(rong)器(qi)中。

2. 用(yong)75%酒精(jing)消毒細胞(bao)培(pei)養(yang)瓶表面(mian)，不(bu)要打開(kai)培(pei)養(yang)瓶，將細胞(bao)平放於(yu)細胞(bao)培(pei)養(yang)箱內靜(jing)置1~2 h，待細胞(bao)恢(hui)復基本生(sheng)長狀態後，再進(jin)行(xing)後續操(cao)作(zuo)。

3. 顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀(guan)察(cha)細胞(bao)狀態，觀(guan)察(cha)細胞(bao)時(shi)請(qing)拍攝(she)清晰的100×、200×照(zhao)片(pian)各2~3張留存(cun)。

4. 細胞(bao)種(zhong)類不(bu)同(tong)，細胞(bao)的運(yun)輸液(ye)不(bu)同(tong)。請(qing)根據培(pei)養(yang)瓶上的(de)標(biao)識判(pan)斷(duan)培(pei)養(yang)瓶內培(pei)養(yang)基(ji)是否可(ke)以繼續使用(yong)。

5. 若細胞(bao)密(mi)度(du)低(di)於(yu)80%，請(qing)及時(shi)更(geng)換(huan)為(wei)預熱的(de)培(pei)養(yang)基(ji)培(pei)養(yang)。若細胞(bao)密(mi)度(du)大(da)於80%，可(ke)進(jin)行(xing)傳(chuan)代。具(ju)體見《細胞(bao)培(pei)養(yang)操(cao)作(zuo)說(shuo)明》。

| 凍存管幹(gan)冰運送(song)

1. 收(shou)到細胞(bao)後，請(qing)先檢查包裝是否完整，幹(gan)冰是否充足(zu)，凍存管有無破損等情況，並(bing)核(he)對(dui)凍存管上的(de)標(biao)簽(qian)信息(xi)、細胞(bao)管數(shu)是否與發貨清單(dan)壹(yi)致(zhi)。如(ru)有異常情況，及(ji)時(shi)與我們聯(lian)系(xi)。

2. 低溫保(bao)存的(de)細胞(bao)非常(chang)脆弱(ruo)，細胞(bao)收到(dao)後如(ru)在24 h內復蘇(su)，可(ke)存放於(yu)-80℃冰箱；超過24 h請(qing)存放於(yu)液氮(dan)中(zhong)。建議(yi)盡快(kuai)復蘇(su)，具(ju)體復蘇(su)操(cao)作(zuo)見(jian)《細胞(bao)培(pei)養(yang)操(cao)作(zuo)說(shuo)明》。

3. 復(fu)蘇(su)細胞(bao)後，換液(ye)之(zhi)前需(xu)在(zai)顯(xian)微(wei)鏡下(xia)觀(guan)察(cha)細胞(bao)狀態，觀(guan)察(cha)細胞(bao)時(shi)請(qing)拍攝(she)清晰的100×、200×照(zhao)片(pian)各2~3張留存(cun)。

4. 部(bu)分(fen)細胞(bao)貼壁(bi)時(shi)間(jian)較長，請(qing)根據說明書(shu)進(jin)行(xing)操(cao)作(zuo)。若復蘇(su)有異常，及時(shi)與我們聯(lian)系(xi)。

5. 後續根據細胞(bao)匯合(he)度繼續培(pei)養(yang)或(huo)消化傳(chuan)代。

| 血(xue)清管常(chang)溫運送(song)

1. 在(zai)收到細胞(bao)後，請(qing)先檢查試劑管是否完好(hao)，培(pei)養(yang)基(ji)是否外滲(shen)，並(bing)核(he)對(dui)試(shi)劑管上的(de)標(biao)簽(qian)信息(xi)、細胞(bao)管數(shu)是否與發貨清單(dan)壹(yi)致(zhi)。如(ru)有異常情況，及(ji)時(shi)與我們聯(lian)系(xi)。

2. 收到細胞(bao)後請(qing)盡快(kuai)進(jin)行(xing)處理(li)，如(ru)不(bu)能(neng)及(ji)時(shi)處理(li)，請(qing)將細胞(bao)放至常(chang)溫(wen)環(huan)境(jing)，通常15~25℃為(wei)佳，並盡量(liang)在(zai)24 h內處理(li)。血(xue)清管細胞(bao)懸液可(ke)能(neng)會(hui)呈現(xian)壹(yi)定(ding)程度的渾濁(zhuo)，屬(shu)於正常(chang)現(xian)象，可(ke)放心(xin)操(cao)作(zuo)。

3. 用(yong)75%酒精(jing)消毒血(xue)清管表(biao)面，在潔(jie)凈工(gong)作(zuo)臺(tai)內(nei)小心(xin)開(kai)蓋(gai)，盡量(liang)避(bi)免氣(qi)泡溢出(chu)，輕(qing)柔吹(chui)打數次(ci)，轉移(yi)至15 mL離(li)心(xin)管中(zhong)。

4. 吸取1 mL預熱的(de)培(pei)養(yang)基(ji)清洗血清管內(nei)壁，同(tong)樣(yang)轉移(yi)至15 mL離(li)心(xin)管，並(bing)吹(chui)打均勻。

5. 250 g離心(xin)4 min。離心(xin)後去除上清，加(jia)入(ru)適(shi)量(liang)預(yu)熱培(pei)養(yang)基(ji)重(zhong)懸後接種(zhong)至合(he)適(shi)大(da)小的(de)培(pei)養(yang)容(rong)器(qi)中，放置於培(pei)養(yang)箱內進(jin)行(xing)培(pei)養(yang)。

6. 換(huan)液(ye)前(qian)需(xu)在顯微(wei)鏡下(xia)觀(guan)察(cha)細胞(bao)狀態，觀(guan)察(cha)細胞(bao)時(shi)請(qing)拍攝(she)清晰的100×、200×照(zhao)片(pian)各2~3張留存(cun)。

7. 後續根據匯(hui)合度(du)繼續培(pei)養(yang)或(huo)消化傳(chuan)代。具(ju)體見《細胞(bao)培(pei)養(yang)操(cao)作(zuo)說(shuo)明》。

| 細胞(bao)膠囊技術(shu)

1. “細胞(bao)膠囊"包括細胞(bao)管和(he)溶(rong)解Buffer共(gong)2個(ge)試劑(ji)管。收(shou)到細胞(bao)後，請(qing)先檢查試劑管是否完好(hao)，培(pei)養(yang)基(ji)是否外滲(shen)，並(bing)核(he)對(dui)管身(shen)上的(de)標(biao)簽(qian)信息(xi)、細胞(bao)數量(liang)是否與發貨清單(dan)壹(yi)致(zhi)。如(ru)有異常情況，及(ji)時(shi)與我們聯(lian)系(xi)。

2. 收到“細胞(bao)膠囊"後需盡(jin)快(kuai)處理(li), 如(ru)不(bu)能(neng)及(ji)時(shi)處理(li), 請(qing)將細胞(bao)放至常(chang)溫(wen)環(huan)境(jing), 通常15~25℃為(wei)佳，並盡量(liang)在(zai)24 h內處理(li)。“細胞(bao)膠囊"管內(nei)的液體肉(rou)眼(yan)觀(guan)察(cha)可(ke)能(neng)會(hui)呈現(xian)壹(yi)定(ding)程度的渾濁(zhuo)，這(zhe)屬(shu)於正常(chang)現(xian)象，可(ke)放心(xin)操(cao)作(zuo)。

3. 用(yong)75%酒精(jing)消毒試(shi)劑(ji)管表(biao)面，在潔(jie)凈工(gong)作(zuo)臺(tai)內(nei)小心(xin)的打開(kai)細胞(bao)膠囊管蓋(gai)，盡量(liang)避(bi)免氣(qi)泡溢出(chu)。

4. 小心(xin)棄去細胞(bao)膠囊管中(zhong)的全部(bu)液(ye)體。

5. 將溶(rong)解Buffer全(quan)部(bu)加(jia)入(ru)到細胞(bao)膠囊管中(zhong)，擰(ning)緊(jin)管蓋(gai)，上下(xia)顛倒(dao)3~5 min。觀(guan)察(cha)到(dao)球(qiu)狀的細胞(bao)膠囊溶(rong)解後，小心(xin)開(kai)蓋(gai)，使用(yong)移液(ye)槍(qiang)輕(qing)柔吹(chui)打數次(ci)，將(jiang)所(suo)有液體轉移(yi)到(dao)15 mL離(li)心(xin)管內(nei)。

7. 250 g離心(xin)4 min。離心(xin)後去上清，加(jia)入(ru)適(shi)量(liang)預(yu)熱培(pei)養(yang)基(ji)重(zhong)懸後，將細胞(bao)懸液接種(zhong)到合適(shi)大(da)小的(de)培(pei)養(yang)容(rong)器(qi)中（T25瓶或6cm皿），放置於細胞(bao)培(pei)養(yang)箱中培(pei)養(yang)。

8. 換(huan)液(ye)前(qian)需(xu)在顯微(wei)鏡下(xia)觀(guan)察(cha)細胞(bao)狀態，觀(guan)察(cha)細胞(bao)時(shi)請(qing)拍攝(she)清晰的100×、200×照(zhao)片(pian)各2~3張留存(cun)。如(ru)有異常情況，及(ji)時(shi)與我們聯(lian)系(xi)。

9. 後續根據細胞(bao)匯合(he)度繼續培(pei)養(yang)或(huo)消化傳(chuan)代。具(ju)體見《細胞(bao)培(pei)養(yang)操(cao)作(zuo)說(shuo)明》。