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All-in-One First-Strand Synthesis MasterMix (with dsDNase) 是壹(yi)款高(gao)效(xiao)、便捷(jie)、減少(shao)汙染的高(gao)質(zhi)量壹(yi)鏈 cDNA 合成試劑盒,耐高(gao)溫(wen)逆轉錄(lu)預混液包含(han)熱(re)穩定的 M-MLV GIII Reverse Transcriptase 及(ji)其(qi)反(fan)應 Buffer、RNA 酶(mei)抑(yi)制劑(ji)隨(sui)機引(yin)物(wu)等(deng)壹鏈 cDNA 合(he)成(cheng)所(suo)需(xu)的所(suo)有(you)組分。
二代M-MLV逆(ni)轉錄(lu)酶(mei)是通過基(ji)因(yin)修飾(shi)和(he)重(zhong)組技術克(ke)隆(long)表達的RNase H活(huo)性(xing)缺失型(xing)莫(mo)洛(luo)尼氏鼠白(bai)血(xue)病毒(du)(Moloney Murine Leukemia Virus, M-MLV)逆(ni)轉錄(lu)酶(mei)。經過基(ji)因(yin)工程改造,本(ben)酶(mei)的最(zui)適反(fan)應溫(wen)度提(ti)升(sheng)至42℃,延伸(shen)能(neng)力更強,可(ke)用(yong)於較(jiao)長的cDNA合(he)成(cheng)。
Taq DNA聚合酶(mei)單(dan)抗(kang)是 Taq DNA polymerase 的鼠(shu)源(yuan)單(dan)克(ke)隆(long)抗(kang)體,與(yu) Taq DNA polymerase 結合(he)後能夠(gou)有效(xiao)封閉 DNA 聚(ju)合(he)酶(mei)活性。本(ben)品與(yu) Taq DNA polymerase 的親和(he)力非(fei)常(chang)高,在 55℃下仍(reng)然可(ke)以封(feng)閉 95% 以上(shang) Taq DNA polymerase 的聚(ju)合(he)酶(mei)活性,因(yin)此可(ke)以非(fei)常(chang)有效(xiao)地抑(yi)制常(chang)溫(wen)下引(yin)物(wu)非(fei)特(te)異(yi)性退(tui)火(huo)及引(yin)物(wu)二聚體(ti)所(suo)引(yin)起的非(fei)特(te)異(yi)性擴(kuo)增。
抗(kang)體法熱啟(qi)動(dong)Taq DNA 聚合酶(mei)是使(shi)用(yong)單(dan)克(ke)隆(long)抗(kang)體修飾(shi)的熱(re)啟(qi)動(dong) Taq DNA Polymerase。在 55℃以下(xia)抗(kang)體可(ke)以有(you)效(xiao)封閉 DNA 聚(ju)合(he)酶(mei)活性, 高溫(wen)下發(fa)生不可(ke)逆(ni)解離,使(shi)聚(ju)合(he)酶(mei)恢(hui)復活性(xing),從(cong)而有(you)效(xiao)避免(mian)低(di)溫(wen)下的非(fei)特(te)異(yi)性擴(kuo)增。本(ben)品主(zhu)要(yao)用(yong)於熒(ying)光定(ding)量 PCR,尤其(qi)是(shi) Taqman 探針(zhen)法。
Taq DNA聚合酶(mei)單(dan)抗(kang)(B8) 是Taq DNA polymerase的鼠(shu)源(yuan)單(dan)克(ke)隆(long)抗(kang)體,與(yu) Taq DNA polymerase 結合(he)後能夠(gou)有效(xiao)封閉 DNA 外切酶(mei)活性。
常規(gui)DNA聚合酶(mei)預混液,Taq-AS PCR Mix 的濃(nong)度(du)為(wei) 2×,使(shi)用(yong)方(fang)便快捷,能(neng)減(jian)少PCR操作(zuo)過程中的汙染,使(shi)用(yong)時只(zhi)需(xu)取適量(liang) 2×Taq-AS PCR Mix ,加(jia)入模板(ban)和(he)引(yin)物(wu),並(bing)加(jia)入 ddH₂O 補(bu)足(zu)體(ti)積(ji),使(shi)反(fan)應體(ti)系濃(nong)度(du)為(wei) 1×,即可(ke)進(jin)行 PCR 反(fan)應。PCR 產(chan)物 3' 端(duan)帶(dai)突出(chu) A 堿(jian)基(ji),純化後可(ke)直接用(yong)於 T/A 克(ke)隆(long)。
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