如(ru)何用(yong)試(shi)劑盒實(shi)現(xian)人源類(lei)器官模(mo)型的(de)高效(xiao)構建(jian)？

  人源類(lei)器官模(mo)型在生(sheng)物醫學(xue)研究中具有(you)重要(yao)的(de)價值，目前(qian)已(yi)知的(de)種類(lei)眾(zhong)多(duo)，其(qi)高效(xiao)構建(jian)對於推(tui)動相關(guan)領(ling)域(yu)的(de)研究至(zhi)關(guan)重要(yao)。使用(yong)試(shi)劑盒構建人源類(lei)器官模(mo)型可以(yi)在(zai)壹(yi)定(ding)程(cheng)度上(shang)提(ti)高構建的(de)效(xiao)率和(he)穩定(ding)性。以(yi)下將詳細介(jie)紹(shao)不同(tong)種類(lei)人源類(lei)器官模(mo)型以(yi)及(ji)如(ru)何用(yong)試(shi)劑盒實(shi)現(xian)高效(xiao)構建(jian)。

壹(yi)、人源類(lei)器官模(mo)型的(de)主要(yao)種類(lei)

胰(yi)腺(xian)腫瘤(liu)類(lei)器官

研究表明，人源胰(yi)腺(xian)腫瘤(liu)類(lei)器官可以(yi)從(cong)接受(shou)手(shou)術切(qie)除(chu)的(de)胰腺(xian)癌患(huan)者組織(zhi)中建立。這種類(lei)器官模(mo)型能(neng)夠(gou)展現(xian)出(chu)與(yu)原患(huan)者腫瘤(liu)相似(si)的(de)組織(zhi)學特(te)征、遺(yi)傳(chuan)和轉(zhuan)錄(lu)異質(zhi)性等(deng)。在構建(jian)過(guo)程中(zhong)，通(tong)常是(shi)將組織(zhi)樣本進(jin)行(xing)機(ji)械和(he)酶(mei)消(xiao)化後，嵌(qian)入細胞外基(ji)質(zhi)凝(ning)膠(jiao)中進(jin)行(xing)培(pei)養。

胎(tai)盤部位(wei)滋(zi)養(yang)細胞腫瘤(liu)類(lei)器官

人源胎(tai)盤部位(wei)滋(zi)養(yang)細胞腫瘤(liu)類(lei)器官是(shi)通(tong)過(guo)選取(qu)胎(tai)盤部位(wei)滋(zi)養(yang)細胞腫瘤(liu)組織(zhi)進(jin)行(xing)消(xiao)化和分(fen)離(li)，得(de)到(dao)腫瘤(liu)細胞後進(jin)行(xing)基(ji)質(zhi)膠(jiao)包埋(mai)，利(li)用特(te)定(ding)的(de)類(lei)器官培(pei)養基(ji)進(jin)行(xing)培(pei)養。該類(lei)器官模(mo)型經鑒定(ding)與(yu)原腫瘤(liu)組織(zhi)具有(you)較高(gao)的(de)壹(yi)致性，包含(han)中間(jian)型滋(zi)養(yang)細胞的(de)標誌(zhi)分(fen)子(zi)。

孤(gu)獨癥譜(pu)系(xi)障(zhang)礙(ai)腦類(lei)器官

  孤(gu)獨癥譜(pu)系(xi)障(zhang)礙(ai)腦類(lei)器官是(shi)由(you)多(duo)能(neng)幹(gan)細胞經懸浮(fu)培(pei)養及(ji)誘導(dao)分(fen)化後自(zi)組織(zhi)形(xing)成的(de)器官樣(yang)三維(wei)組織(zhi)。可在(zai)體(ti)外(wai)模(mo)擬(ni)胚(pei)胎(tai)的(de)早期(qi)腦發(fa)育過(guo)程並(bing)反(fan)映病(bing)理過(guo)程，為研究孤(gu)獨癥譜(pu)系(xi)障(zhang)礙(ai)提(ti)供了理想(xiang)模(mo)型。

新(xin)冠病(bing)毒(du)感染研究類(lei)器官

用於研究新(xin)冠病(bing)毒(du)感染的(de)人源類(lei)器官模(mo)型可以(yi)由(you)人類(lei)多(duo)能(neng)幹(gan)細胞衍生(sheng)的(de)器官 oids 和成人器官 oids 構(gou)建。這(zhe)些(xie)模(mo)型可用(yong)於研究新(xin)冠病(bing)毒(du)的(de)嗜性、宿主(zhu)反(fan)應(ying)以(yi)及(ji)免疫細胞介導(dao)的(de)宿主(zhu)損傷等(deng)，同時也(ye)可用(yong)於藥物發(fa)現和(he)疫苗(miao)開(kai)發(fa)。

腸(chang)道類(lei)器官

人源腸(chang)道類(lei)器官可由(you)多(duo)能(neng)幹(gan)細胞培(pei)養而來(lai)，改(gai)進(jin)的(de)培(pei)養方(fang)法消(xiao)除(chu)了對 Matrigel 的(de)依賴，更(geng)忠(zhong)實(shi)地(di)再(zai)現了人類(lei)小(xiao)腸(chang)的(de)組織(zhi)結構(gou)。例如(ru)，在生(sheng)物惰性環(huan)境(jing)如(ru)未(wei)修(xiu)飾(shi)的(de)海(hai)藻酸鹽(yan)水(shui)凝(ning)膠(jiao)或懸浮(fu)培(pei)養中(zhong)培(pei)養腸(chang)道類(lei)器官，可形(xing)成與人類(lei)腸(chang)道相似(si)的(de)外層(ceng)間(jian)充質(zhi)層(ceng)和(he)漿(jiang)膜(mo)間(jian)皮(pi)。

頭頸(jing)鱗(lin)癌(ai)類(lei)器官

頭頸(jing)鱗(lin)癌(ai)者源性類(lei)器官是(shi)通(tong)過(guo)分(fen)離(li)頭頸(jing)鱗(lin)癌(ai)樣本(ben)中(zhong)的(de)腫瘤(liu)細胞，在基(ji)質(zhi)膠(jiao)中進(jin)行(xing)三維(wei)培(pei)養和(he)傳(chuan)代構建(jian)而成。組織(zhi)病理學及腫瘤(liu)標誌物鑒定(ding)顯示該模(mo)型與患(huan)者組織(zhi)間(jian)壹(yi)致性較高(gao)。

甲狀(zhuang)腺(xian)類(lei)器官

成人源性甲狀(zhuang)腺(xian)類(lei)器官選(xuan)取(qu)成人甲狀(zhuang)腺(xian)乳頭狀(zhuang)癌(ai)患(huan)者癌旁正(zheng)常甲狀(zhuang)腺(xian)組織(zhi)，經消(xiao)化、分(fen)離(li)得(de)到(dao)甲狀(zhuang)腺(xian)細胞，以(yi)基(ji)質(zhi)膠(jiao)包埋(mai)細胞，利(li)用特(te)定(ding)的(de)條件(jian)培(pei)養基(ji)進(jin)行(xing)培(pei)養。該類(lei)器官模(mo)型具有(you)與正(zheng)常甲狀(zhuang)腺(xian)組織(zhi)相似(si)的(de)組織(zhi)學形(xing)態和(he)生(sheng)物標誌(zhi)物特(te)征，且(qie)具(ju)有(you)甲狀(zhuang)腺(xian)激素(su)分(fen)泌(mi)功能(neng)。

糖尿(niao)病相(xiang)關(guan)類(lei)器官

糖尿(niao)病領(ling)域的(de)類(lei)器官是(shi)利(li)用幹(gan)細胞的(de)自我更新(xin)和自(zi)我組裝性能(neng)，經體(ti)外(wai)三(san)維(wei)培(pei)養形(xing)成的(de)微(wei)小(xiao)組織(zhi)器官類(lei)似(si)物，可用(yong)於介(jie)導血(xue)糖調(tiao)控(kong)和糖尿(niao)病慢性血(xue)管並(bing)發(fa)癥的(de)研究。

二(er)、使用(yong)試(shi)劑盒構建人源類(lei)器官模(mo)型的(de)方法(fa)

選擇合適的(de)試(shi)劑盒

目前(qian)市(shi)場(chang)上(shang)有(you)多(duo)種針對不同(tong)類(lei)型類(lei)器官構(gou)建的(de)試(shi)劑盒。在選擇(ze)試(shi)劑盒時，需要(yao)考(kao)慮(lv)類(lei)器官的(de)類(lei)型、研究目的(de)以(yi)及(ji)試(shi)劑盒的(de)質(zhi)量和(he)可靠(kao)性。例如(ru)，對於構(gou)建胰腺(xian)腫瘤(liu)類(lei)器官，可以(yi)選(xuan)擇(ze)專(zhuan)門針(zhen)對胰腺(xian)癌(ai)類(lei)器官培(pei)養的(de)試(shi)劑盒；對於構(gou)建腦類(lei)器官，則(ze)需要(yao)選擇適用於多(duo)能(neng)幹(gan)細胞誘導(dao)分(fen)化為腦類(lei)器官的(de)試(shi)劑盒。

同時，要(yao)關(guan)註(zhu)試(shi)劑盒中的(de)成分(fen)，包括(kuo)細胞外基(ji)質(zhi)、生(sheng)長(chang)因子(zi)、培(pei)養基(ji)等(deng)。這些成分(fen)的(de)質(zhi)量和(he)組合對於類(lei)器官的(de)構建(jian)至(zhi)關(guan)重要(yao)。優質(zhi)的(de)細胞外基(ji)質(zhi)可以(yi)為細胞提(ti)供良好(hao)的(de)生(sheng)長(chang)環(huan)境(jing)，促(cu)進(jin)細胞的(de)自我組裝和(he)組織(zhi)形(xing)成；合適的(de)生(sheng)長(chang)因子(zi)可以(yi)調(tiao)節(jie)細胞的(de)增(zeng)殖、分(fen)化和功能(neng)表(biao)達(da)。

樣(yang)本(ben)準備(bei)

根(gen)據不同(tong)的(de)類(lei)器官類(lei)型，準備(bei)相(xiang)應(ying)的(de)組織(zhi)樣本或細胞來(lai)源。對於患(huan)者源性的(de)類(lei)器官，如(ru)胰腺(xian)腫瘤(liu)類(lei)器官、頭頸(jing)鱗(lin)癌(ai)類(lei)器官等(deng)，需要(yao)從(cong)患(huan)者的(de)手術(shu)切(qie)除(chu)組織(zhi)中分(fen)離(li)腫瘤(liu)細胞。這通(tong)常涉及(ji)到(dao)機(ji)械和(he)酶(mei)消(xiao)化的(de)過(guo)程，以(yi)獲(huo)得(de)單個細胞懸液(ye)。

在(zai)進(jin)行(xing)樣本準備(bei)時(shi)，要(yao)註意操(cao)作的(de)規範(fan)和無菌條件，以(yi)避(bi)免汙染。同時，要(yao)盡量保持細胞的(de)活性和完(wan)整(zheng)性，避(bi)免過(guo)度消(xiao)化或損(sun)傷細胞。

試(shi)劑盒操作步驟(zhou)

按(an)照(zhao)試(shi)劑盒的(de)說明(ming)書(shu)進(jin)行(xing)操作。壹(yi)般來(lai)說，首(shou)先(xian)將細胞與細胞外基(ji)質(zhi)混合，然(ran)後將混合物滴加到(dao)培(pei)養板(ban)或培(pei)養皿中(zhong)，使其(qi)形(xing)成三維(wei)結構(gou)。接著(zhe)，加入(ru)適量的(de)培(pei)養基(ji)，將培(pei)養板(ban)或培(pei)養皿放置(zhi)在(zai)合適的(de)培(pei)養條(tiao)件下進(jin)行(xing)培(pei)養。

在(zai)培(pei)養過(guo)程中(zhong)，要(yao)密切(qie)觀(guan)察(cha)類(lei)器官的(de)生(sheng)長(chang)情(qing)況(kuang)，及(ji)時(shi)調(tiao)整(zheng)培(pei)養條(tiao)件。例如(ru)，根據類(lei)器官的(de)生(sheng)長(chang)速度和(he)形(xing)態，調(tiao)整(zheng)培(pei)養基(ji)的(de)更換(huan)頻率(lv)、生(sheng)長(chang)因子(zi)的(de)濃度等(deng)。同時，要(yao)註意避(bi)免汙染和交叉(cha)汙染(ran)，保持培(pei)養環(huan)境(jing)的(de)清潔(jie)和(he)穩定(ding)。

質(zhi)量控(kong)制(zhi)和(he)鑒定(ding)

   在(zai)構建完(wan)成後，需(xu)要(yao)對類(lei)器官模(mo)型進(jin)行(xing)質(zhi)量控(kong)制(zhi)和(he)鑒定(ding)。這(zhe)包括組織(zhi)學形(xing)態觀(guan)察(cha)、免疫組化和免疫熒(ying)光(guang)染色(se)分(fen)析、基(ji)因(yin)表達分(fen)析等(deng)。通(tong)過(guo)這些(xie)方法，可以(yi)確(que)定(ding)類(lei)器官模(mo)型與原組織(zhi)或細胞來(lai)源的(de)壹(yi)致性，以(yi)及(ji)是(shi)否具有(you)預期(qi)的(de)功能(neng)和(he)特(te)征。

    例如(ru)，對於胎(tai)盤部位(wei)滋(zi)養(yang)細胞腫瘤(liu)類(lei)器官，可以(yi)通(tong)過(guo) HE 染色(se)觀察(cha)類(lei)器官模(mo)型的(de)組織(zhi)學形(xing)態，通(tong)過(guo)免疫組化和免疫熒(ying)光(guang)染色(se)分(fen)析中間(jian)型滋(zi)養(yang)細胞標誌(zhi)物的(de)表達(da)，鑒定(ding)構(gou)建的(de)類(lei)器官模(mo)型與原腫瘤(liu)組織(zhi)之(zhi)間(jian)的(de)壹(yi)致性；對於甲狀(zhuang)腺(xian)類(lei)器官，可以(yi)通(tong)過(guo) H-E 染色(se)觀察(cha)組織(zhi)學形(xing)態，免疫組織(zhi)化學染色(se)檢(jian)測甲狀(zhuang)腺(xian)特(te)異性標誌(zhi)物的(de)表達(da)，以(yi)及(ji)檢(jian)測上(shang)清(qing)液中(zhong)甲狀(zhuang)腺(xian)素和(he)三(san)碘(dian)甲狀(zhuang)腺(xian)原氨(an)酸的(de)水(shui)平(ping)，驗證(zheng)其(qi)是(shi)否具有(you)激素(su)分(fen)泌(mi)功能(neng)。

   使用(yong)試(shi)劑盒構建人源類(lei)器官模(mo)型需要(yao)選擇合適的(de)試(shi)劑盒、進(jin)行(xing)規範的(de)樣本(ben)準備(bei)和(he)操(cao)作步驟(zhou)，並(bing)進(jin)行(xing)嚴格的(de)質(zhi)量控(kong)制(zhi)和(he)鑒定(ding)。通(tong)過(guo)這些(xie)方法，可以(yi)提(ti)高類(lei)器官模(mo)型構建的(de)效(xiao)率和(he)穩定(ding)性，為生(sheng)物醫學(xue)研究提(ti)供有(you)力的(de)工具(ju)。