熒(ying)光(guang)定(ding)量(liang)PCR儀(yi)是(shi)壹種利用熒(ying)光(guang)信(xin)號(hao)實(shi)時監(jian)測聚(ju)合(he)酶鏈(lian)式(shi)反應(ying)（PCR）進(jin)程(cheng)，並(bing)通(tong)過標(biao)準(zhun)曲(qu)線(xian)對(dui)未(wei)知(zhi)模(mo)板(ban)進(jin)行(xing)定(ding)量(liang)分(fen)析的(de)儀器(qi)。該(gai)技(ji)術以其(qi)高靈敏度、高(gao)特(te)異性及廣泛的(de)應(ying)用領(ling)域(yu)，成為(wei)了(le)分子(zi)生(sheng)物(wu)學研(yan)究中不(bu)可缺工(gong)具(ju)。
熒光(guang)標(biao)記(ji)方(fang)法(fa)：在(zai)PCR體(ti)系(xi)中(zhong)加(jia)入熒(ying)光(guang)基(ji)團(tuan)，如SYBR Green I染(ran)料(liao)或(huo)特(te)定(ding)的(de)熒光(guang)探(tan)針(zhen)（如TaqMan探(tan)針(zhen)），通(tong)過熒(ying)光(guang)信(xin)號(hao)的(de)變化(hua)來(lai)實(shi)時監(jian)測PCR擴(kuo)增(zeng)過程(cheng)。
Ct值(zhi)計算：每個反(fan)應(ying)管(guan)內(nei)的(de)熒光(guang)信(xin)號(hao)達到設定(ding)閾(yu)值(zhi)時所(suo)經歷(li)的(de)循環(huan)數(shu)稱(cheng)為(wei)Ct值(zhi)。Ct值(zhi)與起(qi)始(shi)模(mo)板(ban)拷(kao)貝(bei)數(shu)的(de)對(dui)數(shu)呈(cheng)線(xian)性(xing)關系(xi)，因此(ci)可以用來(lai)定(ding)量(liang)分(fen)析。
定量(liang)原理(li)：通過已(yi)知(zhi)起(qi)始(shi)拷(kao)貝(bei)數(shu)的(de)標(biao)準(zhun)品(pin)制(zhi)作標(biao)準(zhun)曲(qu)線(xian)，未知(zhi)樣(yang)品(pin)的(de)起始(shi)拷(kao)貝(bei)數(shu)可以通(tong)過其(qi)Ct值(zhi)從標(biao)準(zhun)曲(qu)線(xian)中計算得出。
熒光(guang)定(ding)量(liang)PCR儀(yi)應(ying)用領(ling)域(yu):
基因表達研究：比較(jiao)不(bu)同處(chu)理(li)樣本或(huo)不(bu)同時(shi)間(jian)點特(te)定(ding)基因的(de)表達差異，廣泛應(ying)用於生物(wu)醫學(xue)研(yan)究。
病原體檢(jian)測：用於檢(jian)測和(he)定(ding)量分(fen)析病原微生物(wu)或(huo)病毒含量(liang)，如新(xin)冠病毒檢(jian)測等(deng)。
遺(yi)傳疾(ji)病診(zhen)斷(duan)：通(tong)過檢(jian)測特(te)定(ding)的(de)基因突(tu)變或(huo)染(ran)色體(ti)異常(chang)，輔助(zhu)遺(yi)傳性(xing)疾病的(de)診斷(duan)和(he)產前(qian)診(zhen)斷(duan)。
藥(yao)物(wu)開(kai)發(fa)：在新(xin)藥(yao)研發(fa)過程(cheng)中(zhong)，用於驗證(zheng)藥(yao)物(wu)靶點的(de)有效(xiao)性(xing)及藥(yao)物(wu)作用機制(zhi)的(de)研究。
環(huan)境(jing)監測：檢(jian)測環(huan)境(jing)樣本中(zhong)的(de)微生物(wu)汙染(ran)程(cheng)度(du)或(huo)特(te)定(ding)汙染(ran)物(wu)的(de)基因標(biao)誌(zhi)物(wu)。
更(geng)新(xin)時(shi)間：2024-10-16
點擊(ji)次(ci)數(shu)：645
當(dang)前位(wei)置(zhi)：
上壹個：
返(fan)回(hui)列表