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使用(yong)便(bian)攜式乳(ru)酸(suan)分析(xi)儀(yi)協(xie)助(zhu)解(jie)決(jue)乳(ru)酸(suan)積累(lei)的(de)問題(ti)
更(geng)新(xin)時間:2024-06-20
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在體(ti)外(wai)培(pei)養重組動(dong)物(wu)細胞的(de)過程(cheng)中(zhong),乳(ru)酸(suan)的(de)大(da)量(liang)積累(lei)是(shi)壹(yi)個(ge)普遍(bian)現(xian)象,這壹(yi)問(wen)題(ti)會(hui)對細胞的(de)生長(chang)環(huan)境(jing)產(chan)生(sheng)負(fu)面影響(xiang),進(jin)而(er)降低(di)細胞的(de)活力(li)和(he)功能。因此,剖(pou)析(xi)乳(ru)酸(suan)積累(lei)的(de)成因,並(bing)探(tan)索(suo)有效(xiao)的(de)解(jie)決(jue)策(ce)略,對於(yu)維持(chi)細胞健康(kang)至(zhi)關重要。本文(wen)旨在分析(xi)乳(ru)酸(suan)積累(lei)的(de)原(yuan)因,提(ti)出(chu)解(jie)決(jue)方案,並(bing)闡(chan)述(shu)便(bian)攜式乳(ru)酸(suan)分析(xi)儀(yi)在這壹(yi)領(ling)域(yu)的(de)重要(yao)作(zuo)用。
壹(yi)、乳(ru)酸(suan)積累(lei)對細胞的(de)影響(xiang)通(tong)常(chang)表(biao)現(xian)為(wei)以下(xia)幾(ji)個(ge)方面:
1. pH降低(di):乳(ru)酸(suan)是(shi)壹(yi)種(zhong)弱酸(suan),當(dang)乳(ru)酸(suan)在培養(yang)液(ye)中(zhong)積累(lei)時,會(hui)導致培養(yang)環(huan)境(jing)的(de)pH下(xia)降。例(li)如(ru),哺乳(ru)動(dong)物(wu)細胞培養液(ye)的(de)正(zheng)常(chang)pH範(fan)圍通(tong)常(chang)在7.2到7.4之(zhi)間。如(ru)果乳(ru)酸(suan)濃度(du)增(zeng)加(jia)到壹(yi)定(ding)程(cheng)度(du),比如(ru)5mM以上,可能(neng)會(hui)使培(pei)養液(ye)的(de)pH降低(di)到6.8以(yi)下(xia),這樣(yang)的(de)酸性(xing)環(huan)境(jing)對(dui)許(xu)多(duo)細胞來(lai)說是(shi)有(you)害的(de),因為(wei)它會(hui)幹(gan)擾細胞內外(wai)的(de)酸堿(jian)平(ping)衡(heng),影響(xiang)酶的(de)活性(xing)和(he)細胞的(de)正(zheng)常(chang)代(dai)謝。
2. 細胞增(zeng)殖抑(yi)制:乳(ru)酸(suan)積累(lei)會(hui)抑(yi)制細胞的(de)增(zeng)殖。壹(yi)項(xiang)研(yan)究發(fa)現(xian),當(dang)培(pei)養(yang)液(ye)中(zhong)的(de)乳(ru)酸(suan)濃度(du)達(da)到10mM時,某(mou)些(xie)細胞系(xi)的(de)增(zeng)殖速率(lv)會(hui)降低(di)50%以上。這種(zhong)抑(yi)制作(zuo)用可能(neng)是(shi)由(you)於(yu)乳(ru)酸(suan)幹(gan)擾了(le)細胞周期(qi)調(tiao)控,或(huo)者(zhe)是(shi)由(you)於(yu)酸性(xing)環(huan)境(jing)影響(xiang)了(le)DNA復制和(he)細胞分裂。
3. 細胞雕亡增(zeng)加(jia):高(gao)濃(nong)度(du)的(de)乳(ru)酸(suan)還(hai)可能(neng)誘(you)導細胞雕亡。在壹(yi)項(xiang)研(yan)究中(zhong),細胞暴露於(yu)20mM的(de)乳(ru)酸(suan)中(zhong)24小(xiao)時後(hou),雕(diao)亡細胞的(de)數量(liang)增(zeng)加(jia)了(le)三(san)倍。這種(zhong)雕亡的(de)增(zeng)加(jia)可(ke)能(neng)是(shi)由(you)於(yu)乳(ru)酸(suan)引起的(de)細胞內氧化(hua)應激(ji)增(zeng)加(jia),或(huo)者(zhe)是(shi)由(you)於(yu)乳(ru)酸(suan)影響(xiang)了(le)細胞雕亡相(xiang)關信號通路的(de)激(ji)活(huo)。
4. 細胞功能受損(sun):乳(ru)酸(suan)積累(lei)還(hai)會(hui)影響(xiang)細胞的(de)特(te)定功能。例(li)如(ru),對於(yu)胰島細胞,乳(ru)酸(suan)積累(lei)會(hui)降低(di)胰島素(su)的(de)分泌(mi)能力(li)。壹(yi)項(xiang)實(shi)驗表明(ming),當(dang)乳(ru)酸(suan)濃度(du)從5mM增(zeng)加(jia)到15mM時,胰島素(su)的(de)分泌(mi)量可(ke)能減少30%。
為(wei)了(le)實(shi)時監(jian)測(ce)乳(ru)酸(suan)積累(lei)的(de)情況,研究者(zhe)可(ke)以使用(yong)便(bian)攜式乳(ru)酸(suan)分析(xi)儀(yi)。這種(zhong)設備可(ke)以(yi)快(kuai)速、準確(que)地(di)測(ce)量培(pei)養液(ye)中(zhong)的(de)乳(ru)酸(suan)濃度(du),幫(bang)助研(yan)究人(ren)員(yuan)及時調(tiao)整(zheng)培(pei)養(yang)條(tiao)件(jian),如(ru)更換(huan)新鮮培養液(ye)或(huo)調(tiao)整營養(yang)物質(zhi)的(de)供給,以減(jian)少(shao)乳(ru)酸(suan)的(de)積累(lei),從而維持(chi)細胞的(de)健康(kang)和(he)功能。
二(er)、乳(ru)酸(suan)積累(lei)的(de)原(yuan)因:
1. 供氧不(bu)足:在細胞培養過程(cheng)中(zhong),供氧不(bu)足是(shi)導致乳(ru)酸(suan)積累(lei)的(de)主要(yao)原(yuan)因之壹(yi)。當(dang)細胞處(chu)於(yu)缺(que)氧狀態時,它(ta)們會(hui)通過(guo)無氧酵(jiao)解(jie)途徑(jing)產(chan)生乳(ru)酸(suan),以維持(chi)能(neng)量供應。因此,提(ti)高(gao)培(pei)養(yang)體(ti)系(xi)的(de)氧傳(chuan)遞(di)效(xiao)率(lv)是(shi)減(jian)少(shao)乳(ru)酸(suan)積累(lei)的(de)關鍵。
2. 葡萄(tao)糖濃度(du)過高(gao):在細胞培養過程(cheng)中(zhong),過高(gao)的(de)葡萄(tao)糖濃度(du)會(hui)導致細胞產生大(da)量(liang)乳(ru)酸(suan)。這是(shi)因為(wei)細胞在高(gao)葡(pu)萄(tao)糖環(huan)境(jing)下(xia),會(hui)優先選擇(ze)酵解(jie)途徑(jing)產(chan)生能量(liang),從(cong)而導致乳(ru)酸(suan)積累(lei)。
3. 細胞代(dai)謝紊亂:細胞在生長(chang)、分化和(he)代(dai)謝過程中(zhong),可能(neng)會(hui)出現(xian)代(dai)謝紊亂,導致乳(ru)酸(suan)脫氫(qing)酶活(huo)性(xing)降低(di),從而使乳(ru)酸(suan)無法(fa)及時轉(zhuan)化(hua)為(wei)丙酮(tong)酸(suan),進(jin)而(er)導致乳(ru)酸(suan)積累(lei)。
4. 培養基成(cheng)分不適(shi)宜:培養基(ji)中(zhong)的(de)壹(yi)些(xie)成(cheng)分可能(neng)會(hui)影響(xiang)細胞的(de)代(dai)謝途徑,導致乳(ru)酸(suan)積累(lei)。例如(ru),某些(xie)氨基酸和維生(sheng)素(su)的(de)缺(que)乏(fa)或(huo)過(guo)量都(dou)可能(neng)影響(xiang)乳(ru)酸(suan)的(de)代(dai)謝。
三(san)、解(jie)決(jue)細胞培養過程(cheng)中(zhong)乳(ru)酸(suan)積累(lei)的(de)方法(fa):
1. 優化(hua)供氧條(tiao)件(jian):提(ti)高(gao)培(pei)養(yang)體(ti)系(xi)的(de)氧傳(chuan)遞(di)效(xiao)率(lv),有助於(yu)減少(shao)乳(ru)酸(suan)積累(lei)。可以通過(guo)增(zeng)加(jia)培(pei)養(yang)液(ye)的(de)溶氧濃(nong)度(du)、提(ti)高(gao)培(pei)養(yang)瓶(ping)的(de)攪拌速度(du)、使用(yong)透(tou)氣(qi)性更(geng)好(hao)的(de)培養(yang)瓶(ping)等方式來(lai)實(shi)現(xian)。
2. 調(tiao)整(zheng)葡(pu)萄(tao)糖濃度(du):適(shi)當(dang)降低(di)葡萄(tao)糖濃度(du),可以(yi)減少細胞通過酵解(jie)途徑(jing)產(chan)生乳(ru)酸(suan)的(de)可能(neng)性(xing)。同(tong)時,可(ke)以(yi)根據(ju)細胞的(de)生長(chang)狀態和需(xu)求,調(tiao)整葡萄(tao)糖的(de)供給量。
3. 補(bu)充乳(ru)酸(suan)脫氫(qing)酶:通(tong)過(guo)添加(jia)乳(ru)酸(suan)脫氫(qing)酶,可(ke)以(yi)提(ti)高(gao)乳(ru)酸(suan)的(de)轉化(hua)速率(lv),減少乳(ru)酸(suan)積累(lei)。此外(wai),還(hai)可以(yi)通過(guo)基因工程(cheng)技(ji)術(shu),提(ti)高(gao)細胞內乳(ru)酸(suan)脫氫(qing)酶的(de)表達(da)量。
4. 優化(hua)培(pei)養基(ji)成分:根據(ju)細胞的(de)特(te)定需(xu)求,調整培養基(ji)中(zhong)氨基(ji)酸(suan)、維生(sheng)素(su)等成(cheng)分的(de)濃度(du),以利於(yu)乳(ru)酸(suan)的(de)代(dai)謝。同(tong)時,可(ke)以(yi)嘗(chang)試(shi)使用(yong)壹(yi)些(xie)具(ju)有抗(kang)氧化(hua)作(zuo)用的(de)添加(jia)劑(ji),以(yi)減輕乳(ru)酸(suan)積累(lei)對細胞的(de)影響(xiang)。
5. 使用(yong)便(bian)攜式乳(ru)酸(suan)分析(xi)儀(yi):在細胞培養過程(cheng)中(zhong),實時監(jian)測(ce)乳(ru)酸(suan)濃度(du)對於(yu)控制乳(ru)酸(suan)積累(lei)具(ju)有重(zhong)要意義。便(bian)攜式乳(ru)酸(suan)分析(xi)儀(yi)可(ke)以(yi)方便(bian)、快(kuai)速地測(ce)定(ding)培養液(ye)中(zhong)的(de)乳(ru)酸(suan)濃度(du),幫(bang)助研(yan)究者(zhe)及(ji)時調(tiao)整(zheng)培(pei)養(yang)條(tiao)件(jian),避免(mian)乳(ru)酸(suan)積累(lei)。
6. 定期(qi)更(geng)換培(pei)養液(ye):定(ding)期(qi)更(geng)換培(pei)養液(ye),可(ke)以有(you)效(xiao)清(qing)除乳(ru)酸(suan)等代(dai)謝廢物,減輕乳(ru)酸(suan)積累(lei)對細胞的(de)影響(xiang)。
7. 控(kong)制細胞密(mi)度(du):適(shi)當(dang)控(kong)制細胞密(mi)度(du),可以(yi)降低(di)細胞間的(de)競爭(zheng),減(jian)輕乳(ru)酸(suan)積累(lei)。同(tong)時,可(ke)以(yi)根據(ju)細胞的(de)生長(chang)狀態,適(shi)時進(jin)行傳(chuan)代(dai),以維持(chi)細胞的(de)活力(li)。
綜上所述(shu),乳(ru)酸(suan)積累(lei)是(shi)重(zhong)組動(dong)物(wu)細胞體(ti)外(wai)培(pei)養過程中(zhong)常(chang)見(jian)的(de)問題(ti)。通(tong)過(guo)便(bian)攜式乳(ru)酸(suan)分析(xi)儀(yi)實(shi)時檢(jian)測(ce),優化(hua)供氧條(tiao)件(jian)、調整葡萄(tao)糖濃度(du)、補充乳(ru)酸(suan)脫氫(qing)酶、優化(hua)培(pei)養基(ji)成分、定期(qi)更(geng)換培(pei)養液(ye)和(he)控制細胞密(mi)度(du)等措(cuo)施(shi),可以有(you)效(xiao)地(di)減輕乳(ru)酸(suan)積累(lei),提(ti)高(gao)細胞的(de)活性(xing)和(he)功能。
蘇(su)州(zhou)阿爾(er)法(fa)生物(wu)16年(nian)來(lai)壹(yi)直致力於(yu)銷售(shou)各(ge)類(lei)實驗室(shi)儀器、實(shi)驗室(shi)設備、細胞培養耗材(cai)、試(shi)劑(ji)、高(gao)品(pin)質(zhi)進(jin)口(kou)移液(ye)器(qi)及其相關耗材(cai)。比如(ru)在移液(ye)槍領(ling)域(yu),我(wo)們作(zuo)為(wei)梅(mei)特(te)勒(le)瑞(rui)寧移液(ye)器(qi)的(de)廠家(jia)合(he)作(zuo)商,可以(yi)提(ti)供單(dan)道移液(ye)器(qi)、8道移液(ye)器(qi)、12道移液(ye)器(qi)、間距(ju)可(ke)調(tiao)移液(ye)器(qi)、電動(dong)移液(ye)器(qi)、微量(liang)移液(ye)器(qi)、移液(ye)工作(zuo)臺(tai)等各(ge)種型(xing)號(hao),以及移液(ye)過(guo)程中(zhong)移液(ye)槍配(pei)套的(de)LTS盒裝(zhuang)吸(xi)頭(tou)、袋裝(zhuang)吸(xi)頭(tou)等耗(hao)材(cai),滿足(zu)客(ke)戶在科研(yan)、醫(yi)學(xue)、制藥(yao)等領(ling)域(yu)的(de)移液(ye)需(xu)求。另(ling)外(wai)還(hai)提(ti)供提(ti)供500多種(zhong)腫瘤細胞,200多種基因編(bian)輯(ji)細胞及細胞培養試(shi)劑(ji)、細胞培養耗材(cai)、細胞培養搖(yao)床、生物反應器(qi)、實驗室(shi)儀器、 EKF乳(ru)酸(suan)分析(xi)儀(yi) 、實(shi)驗室(shi)設備、實(shi)驗室(shi)消毒劑等。
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