生(sheng)物反(fan)應器連(lian)續(xu)進(jin)料(liao)批量(liang)培養技(ji)術在CHO細胞重(zhong)組(zu)蛋(dan)白(bai)生(sheng)產(chan)中的(de)應用(yong)

在生(sheng)物醫(yi)藥領域(yu)，重(zhong)組(zu)蛋(dan)白(bai)（RTPs）的快速(su)發展(zhan)為(wei)人(ren)類健(jian)康帶來(lai)了(le)希望(wang)。隨(sui)著超過120種重(zhong)組(zu)抗(kang)體(ti)獲得(de)歐(ou)盟(meng)和FDA機構(gou)的批(pi)準，市(shi)值(zhi)數千億美(mei)元，單(dan)克(ke)隆抗(kang)體(ti)（mAbs）的市(shi)場(chang)預計將在2025年(nian)超過3000億美(mei)元。在這壹過程(cheng)中(zhong)，中(zhong)國(guo)倉鼠卵(luan)巢（CHO）細胞憑借(jie)較多(duo)的(de)優(you)勢(shi)，成為(wei)生(sheng)產(chan)RTPs的重(zhong)要(yao)細(xi)胞。目前(qian)，哺(bu)乳(ru)動(dong)物細(xi)胞(bao)培養中(zhong)的(de)mAbs 生(sheng)產(chan)主要(yao)采(cai)用(yong)大(da)規(gui)模生(sheng)物反(fan)應器中(zhong)的(de)連(lian)續(xu)進(jin)料(liao)過程(cheng)。

    CHO細(xi)胞(bao)具(ju)有(you)多(duo)種(zhong)優(you)勢(shi)，如不(bu)易(yi)感染(ran)人(ren)類病毒(du)，安(an)全性高；RTPs具(ju)有(you)與(yu)人(ren)類細(xi)胞相(xiang)似(si)的(de)翻(fan)譯後(hou)修(xiu)飾；高密(mi)度CHO細胞(bao)可適應(ying)懸浮培養，使(shi)用(yong)化(hua)學(xue)定義無血清(qing)培養基（CD-SFM）並分泌(mi)蛋白(bai)質到(dao)培養基中。

    連(lian)續(xu)進(jin)料(liao)培養技(ji)術是指在細胞培養過程(cheng)中(zhong)，通(tong)過連(lian)續(xu)或(huo)脈沖(chong)式(shi)進料(liao)添(tian)加(jia)濃(nong)縮(suo)進料(liao)培養基，以(yi)補(bu)充營養物(wu)質並延長培養時(shi)間(jian)。這(zhe)種方(fang)法可以(yi)避免營(ying)養(yang)物(wu)質限制(zhi)，並能(neng)促(cu)進(jin)重(zhong)組(zu)蛋(dan)白(bai)的更高(gao)產(chan)量。連(lian)續(xu)進(jin)料(liao)處理後細胞在靜止期(qi)的(de)培養時(shi)間(jian)比(bi)批次(ci)培養更(geng)長(chang)。連(lian)續(xu)進(jin)料(liao)培養需(xu)要(yao)了(le)解(jie)細胞(bao)生(sheng)長和(he)細胞(bao)代謝(xie)的(de)特(te)點(dian)，以(yi)及(ji)影(ying)響(xiang)RTPs質量和產(chan)量的(de)關鍵(jian)過程(cheng)參(can)數(shu)。

     由於CHO細胞(bao)在指數生(sheng)長期(qi)生(sheng)長速(su)度快，加速(su)消耗(hao)葡(pu)萄糖和(he)氨(an)基酸，會導致(zhi)乳酸和氨的(de)積(ji)累(lei)。所以(yi)在連(lian)續(xu)進(jin)料(liao)培養中(zhong)，溫(wen)度、pH和其(qi)他(ta)過程(cheng)參(can)數(shu)都(dou)會(hui)影(ying)響(xiang)到(dao)抗(kang)體(ti)表(biao)達和質量屬(shu)性。然而，使(shi)用(yong)連(lian)續(xu)進(jin)料(liao)培養可以(yi)改(gai)善(shan)CHO細胞(bao)中RTPs的表(biao)達和生(sheng)產(chan)，但(dan)傳(chuan)統(tong)的脈沖(chong)式(shi)進料(liao)輸送也(ye)會導致(zhi)代謝(xie)副(fu)產(chan)品的(de)積(ji)累(lei)。因此(ci)，選(xuan)擇(ze)合(he)理的進料(liao)策(ce)略非(fei)常重(zhong)要(yao)。

     使(shi)用(yong)不(bu)銹(xiu)鋼生(sheng)物反(fan)應器進(jin)行(xing)連(lian)續(xu)進(jin)料(liao)培養中(zhong)降(jiang)低(di)RTPs生(sheng)產(chan)成本(ben)已(yi)成為(wei)制(zhi)藥工業(ye)的研(yan)究(jiu)焦(jiao)點(dian)。連(lian)續(xu)進(jin)料(liao)培養已(yi)從(cong)僅僅追求高產(chan)量的(de)重(zhong)組(zu)蛋(dan)白(bai)轉變為(wei)同(tong)時(shi)追(zhui)求高產(chan)量和(he)高質量的生(sheng)產(chan)目標(biao)。

      在細胞培養方(fang)面，貼(tie)壁(bi)CHO細胞(bao)在含(han)10%胎(tai)牛(niu)血(xue)清(qing)（FBS）的(de)DMEM/F12培養基中，於(yu)37℃、5% CO2的(de)條件(jian)下生(sheng)長。選(xuan)擇(ze)無血清(qing)培養基（SFM）進行(xing)懸浮培養，支持從(cong)貼(tie)壁(bi)培養到(dao)懸浮培養模(mo)式(shi)的(de)轉變。SFM分為普(pu)通(tong)無血清(qing)培養基、無異(yi)種血(xue)清(qing)培養基、無動(dong)物血(xue)清(qing)培養基、無蛋白(bai)培養基和化(hua)學(xue)定義無血清(qing)培養基。在細胞懸浮培養中(zhong)，SFM可以(yi)有(you)效(xiao)避免血(xue)清(qing)培養帶(dai)來(lai)的缺點(dian)，如汙染(ran)和(he)純化(hua)困難(nan)。

批次(ci)培養是(shi)指(zhi)壹(yi)次(ci)性添(tian)加(jia)SFM後(hou)，可以(yi)在壹個(ge)時間(jian)點(dian)收獲重(zhong)組(zu)蛋(dan)白(bai)的培養方(fang)法(fa)。由於培養時(shi)間(jian)短(duan)，收集樣本(ben)時(shi)細胞(bao)密度不(bu)理想(xiang)，RTP生(sheng)產(chan)不(bu)理想(xiang)。連(lian)續(xu)進(jin)料(liao)模式(shi)提高(gao)了(le)RTP生(sheng)產(chan)。據(ju)報道(dao)，在連(lian)續(xu)進(jin)料(liao)培養中(zhong)，單(dan)克(ke)隆抗(kang)體(ti)（mAb）的滴度已達到(dao)10 g/L以(yi)上。近年(nian)來(lai)，連(lian)續(xu)進(jin)料(liao)工藝(yi)已成為大(da)規(gui)模生(sheng)產(chan)RTP的重(zhong)要(yao)生(sheng)產(chan)過程(cheng)。然而，保持細(xi)胞(bao)的高生(sheng)產(chan)力和(he)蛋白(bai)質的質量屬(shu)性仍(reng)然是壹(yi)個(ge)挑戰(zhan)。

綜上所述，生(sheng)物反(fan)應器連(lian)續(xu)進(jin)料(liao)批量(liang)培養技(ji)術在CHO細胞重(zhong)組(zu)蛋(dan)白(bai)生(sheng)產(chan)中的(de)應用(yong)取得(de)較大(da)進展(zhan)，已成為生(sheng)物醫(yi)藥領域(yu)的(de)重(zhong)要(yao)研(yan)究方向(xiang)。

蘇(su)州阿爾法(fa)生(sheng)物實(shi)驗器材有(you)限公司(si)是(shi)壹(yi)家16年(nian)專註於(yu)提(ti)供實(shi)驗室(shi)設備、實(shi)驗耗材和(he)實(shi)驗試(shi)劑的(de)綜合(he)性公司。我們(men)帶著實驗器材行(xing)業(ye)的發(fa)展，為科研人(ren)員提(ti)供高質量、高效率的(de)實(shi)驗室(shi)解決(jue)方案(an)。

除了(le)日(ri)常供(gong)應的(de)實(shi)驗室(shi)設備主(zhu)要(yao)包(bao)括(kuo)：冷(leng)凍(dong)離(li)心機(ji)、低(di)速(su)離心機(ji)、微量(liang)離(li)心機(ji)、大(da)容(rong)量離(li)心機(ji)、 迷妳(ni)離(li)心機(ji)移(yi)液器、移(yi)液槍(qiang)、Rainin移(yi)液器、 液體(ti)處理工作站、移(yi)液工(gong)作(zuo)站、 磁(ci)力(li)攪拌器、加(jia)熱攪拌器、電動(dong)攪拌器、 恒(heng)溫攪拌器、 恒(heng)速(su)攪拌器、 多(duo)功能(neng)攪拌器、搖(yao)床(chuang)恒(heng)溫振蕩器、 氣(qi)浴(yu)振蕩器、 水(shui)浴(yu)振蕩器、 調速(su)振蕩器、回(hui)旋(xuan)振蕩器、漩(xuan)渦振蕩器、 混(hun)勻(yun)振蕩器、 微量(liang)振蕩器、 大(da)容(rong)量振蕩器、多(duo)功能(neng)振蕩器、 凝(ning)膠電泳儀、電泳儀、電泳槽、核(he)酸純化(hua)系(xi)統(tong)、核酸提取儀、 PCR儀、 基因測(ce)序儀、電穿(chuan)孔(kong)儀、基因導入儀、DNA合(he)成(cheng)儀、蛋(dan)白(bai)質純化(hua)系(xi)統(tong)、 細胞(bao)融合(he)儀、蛋(dan)白(bai)印跡儀、化(hua)學(xue)發(fa)光(guang)儀、流(liu)式(shi)細胞儀、細(xi)胞(bao)分析儀、細(xi)胞(bao)計數(shu)儀、超(chao)凈工(gong)作臺、 生(sheng)物安(an)全櫃(gui)、發酵(jiao)罐、細(xi)胞(bao)破碎(sui)儀、細(xi)胞(bao)生(sheng)物反(fan)應器、 生(sheng)化(hua)培養箱(xiang)、光(guang)照(zhao)培養箱(xiang)、恒(heng)溫培養箱(xiang)、電熱培養箱(xiang)、 隔(ge)水(shui)式培養箱(xiang)、CO2培養箱(xiang)、冷(leng)凍(dong)培養箱(xiang)、振蕩培養箱(xiang)、 低(di)溫(wen)培養箱(xiang)、人(ren)工(gong)氣(qi)候(hou)箱(xiang)、黴(mei)菌(jun)培養箱(xiang)、培養搖(yao)床(chuang)、 多(duo)功能(neng)培養箱(xiang)、厭(yan)氧培養箱(xiang)、粉(fen)碎(sui)機(ji)、破碎(sui)機(ji)、 研(yan)磨(mo)儀、球磨機(ji)、組織研(yan)磨(mo)器等(deng)核(he)心產(chan)品。

我們(men)還提(ti)供(gong)梅(mei)特(te)勒(le)瑞(rui)寧(ning)Rainin吸頭，以(yi)其(qi)穩定的和可靠性贏(ying)得(de)了(le)廣(guang)泛的(de)認可。不(bu)僅如此，我們(men)還引進了(le)耐(nai)思Nest品牌(pai)的細胞(bao)培養耗(hao)材、PCR耗(hao)材、搖(yao)瓶、細胞(bao)工(gong)廠(chang)、離(li)心管(guan)等(deng)豐(feng)富(fu)系列(lie)產(chan)品。這(zhe)些(xie)產(chan)品采(cai)用(yong)耐(nai)用(yong)的(de)材料(liao)和精(jing)確的制(zhi)造(zao)工藝(yi)，確保了(le)實(shi)驗的穩(wen)定性和準確性。

   此外(wai)，我們(men)還提(ti)供(gong)天根(gen)核(he)酸提取試(shi)劑盒、PCR Taq酶以(yi)及(ji)各種酶等(deng)生(sheng)物試(shi)劑。我們(men)的產(chan)品經(jing)過嚴(yan)格(ge)的質量控制(zhi)，確保了(le)其(qi)在實驗過程(cheng)中(zhong)的(de)穩定性和可靠性。碧雲(yun)天生(sheng)化(hua)試(shi)劑和(he)Biosharp生(sheng)化(hua)試(shi)劑則(ze)是我們(men)配套(tao)的(de)實(shi)驗試(shi)劑，可滿足(zu)您在生(sheng)物研(yan)究過程(cheng)中(zhong)的(de)各種需求。

為了(le)保證(zheng)實驗環(huan)境(jing)的(de)清(qing)潔(jie)與(yu)安(an)全，我們(men)提供(gong)了(le)哈(ha)爵雅消(xiao)毒(du)劑系(xi)列(lie)產(chan)品，包(bao)括(kuo)乙(yi)醇(chun)消(xiao)毒(du)液、異(yi)丙(bing)醇(chun)消(xiao)毒(du)液、過氧化(hua)氫(qing)消(xiao)毒(du)液、復(fu)方(fang)季(ji)銨鹽(yan)(L)消毒(du)液、復(fu)方(fang)過氧化(hua)物(wu)消(xiao)毒(du)液等(deng)等(deng)。這(zhe)些(xie)產(chan)品能(neng)夠有(you)效(xiao)地殺滅細菌(jun)和病(bing)毒(du)，保護實驗器材和(he)樣本(ben)的(de)安(an)全。

 除(chu)了(le)耗(hao)材外(wai)，我們(men)還提(ti)供(gong)國(guo)產(chan)CHO細胞(bao)、HEK細胞、腫(zhong)瘤(liu)細(xi)胞(bao)株(zhu)等(deng)細(xi)胞產(chan)品服務(wu)，致力於(yu)為生(sheng)物領域(yu)的(de)科(ke)學家提(ti)供支持和(he)解(jie)決方案。

我們(men)始終(zhong)堅持以(yi)客(ke)戶為中心，為(wei)科(ke)研人(ren)員提(ti)供優(you)質、快捷(jie)、全面的服務(wu)。我們(men)的團(tuan)隊由經驗豐富(fu)的專(zhuan)業(ye)人員組(zu)成，具(ju)備專(zhuan)業(ye)的(de)知(zhi)識和技(ji)能(neng)。不(bu)僅如此，我們(men)還與(yu)國(guo)內(nei)外(wai)多(duo)家(jia)儀器設備廠(chang)商建(jian)立了(le)長(chang)期(qi)合(he)作(zuo)關(guan)系(xi)，豐富(fu)了(le)產(chan)品類(lei)型。

   在未來(lai)的發(fa)展中(zhong)，我們(men)將秉承客(ke)戶至上的理念，不(bu)斷(duan)優(you)化(hua)產(chan)品質量和服務(wu)體(ti)驗，為科(ke)學家(jia)們(men)提供(gong)更(geng)加(jia)優(you)秀(xiu)的(de)生(sheng)物反(fan)應器,實(shi)驗室(shi)儀器和(he)實(shi)驗耗材和(he)解(jie)決方(fang)案。讓(rang)我們(men)攜手(shou)共(gong)進(jin)，共(gong)創輝(hui)煌(huang)！